| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略词 | 第13-15页 |
| 文献综述 | 第15-22页 |
| 引言 | 第22-24页 |
| 1 材料与方法 | 第24-33页 |
| 1.1 试验材料 | 第24-26页 |
| 1.1.1 试验动物 | 第24页 |
| 1.1.2 试验试剂 | 第24-25页 |
| 1.1.3 溶液的配制 | 第25页 |
| 1.1.4 试验仪器设备 | 第25-26页 |
| 1.2 试验方法 | 第26-33页 |
| （一）Nesfatin-1/NUCB2在大鼠下丘脑-垂体-卵巢上的定位 | 第26-27页 |
| 1.2.1 试验动物的处理与样品采集 | 第26页 |
| 1.2.2 组织切片的制作 | 第26页 |
| 1.2.3 免疫组织化学步骤 | 第26-27页 |
| 1.2.4 观察并拍照 | 第27页 |
| （二）Nesfatin-1/NUCB2、Tac2、GnRH mRNA在初情期发育进程中大鼠下丘脑的表达 | 第27-29页 |
| 1.2.1 试验动物的处理与取样 | 第27页 |
| 1.2.2 总RNA的提取 | 第27页 |
| 1.2.3 RNA完整性检测 | 第27-28页 |
| 1.2.4 RNA浓度和纯度测定 | 第28页 |
| 1.2.5 引物的设计与合成 | 第28页 |
| 1.2.6 逆转录反应 | 第28页 |
| 1.2.7 实时荧光定量PCR | 第28-29页 |
| 1.2.8 数据统计分析 | 第29页 |
| （三）侧脑室注射Nesfatin-1 对大鼠促性腺激素分泌的影响 | 第29-31页 |
| 1.2.1 试验动物的处理与样品采集 | 第29页 |
| 1.2.2 侧脑室注射 | 第29-30页 |
| 1.2.3 ELISA检测血清中LH和FSH的含量 | 第30-31页 |
| 1.2.4 统计分析 | 第31页 |
| （四）侧脑室注射Nesfatin-1 对大鼠初情期启动的影响及其机制 | 第31-33页 |
| 1.2.1 试验动物的处理与样本采集 | 第31页 |
| 1.2.2 动物模型的建立 | 第31页 |
| 1.2.3 组织切片的制作 | 第31页 |
| 1.2.4 HE染色步骤 | 第31-32页 |
| 1.2.5 ELISA检测血清中E2的含量 | 第32页 |
| 1.2.6 总RNA的提取、检测、逆转录 | 第32页 |
| 1.2.7 引物的设计与合成 | 第32页 |
| 1.2.8 实时荧光定量PCR | 第32页 |
| 1.2.9 统计分析 | 第32-33页 |
| 2 结果 | 第33-44页 |
| 2.1 Nesfatin-1/NUCB2在大鼠下丘脑-垂体-卵巢上的定位 | 第33-35页 |
| 2.1.1 Nesfatin-1/NUCB2在下丘脑的定位 | 第33-34页 |
| 2.1.2 Nesfatin-1/NUCB2在垂体的定位 | 第34页 |
| 2.1.3 Nesfatin-1/NUCB2在卵巢的定位 | 第34-35页 |
| 2.1.4 Nesfatin-1/NUCB2在子宫的定位 | 第35页 |
| 2.2 Nesfatin-1/NUCB2、Tac2、GnRH mRNA在初情期发育进程中大鼠下丘脑的表达 | 第35-38页 |
| 2.2.1 扩增曲线与溶解曲线 | 第35-36页 |
| 2.2.2 NUCB2、Tac2、GnRH mRNA在下丘脑上的表达 | 第36-37页 |
| 2.2.3 大鼠下丘脑NUCB2、Tac2 mRNA表达丰度的相关性分析 | 第37-38页 |
| 2.3 侧脑室注射Nesfatin-1 对大鼠促性腺激素分泌的影响 | 第38-39页 |
| 2.3.1 侧脑室注射Nesfatin-1 对雌性大鼠LH分泌的影响 | 第38页 |
| 2.3.2 侧脑室注射Nesfatin-1 对雌性大鼠FSH分泌的影响 | 第38-39页 |
| 2.4 侧脑室注射Nesfatin-1 对大鼠初情期启动的影响及其机制 | 第39-44页 |
| 2.4.1 大鼠阴门开启时间、卵巢重量 | 第39页 |
| 2.4.2 大鼠卵巢组织形态学变化 | 第39页 |
| 2.4.3 侧脑室注射Nesfatin-1 对雌性大鼠E2分泌的影响 | 第39-40页 |
| 2.4.4 扩增曲线与溶解曲线 | 第40-41页 |
| 2.4.5 侧脑室注射Nesfatin-1 后大鼠GnRH和Gn RHR mRNA的表达 | 第41-42页 |
| 2.4.6 侧脑室注射Nesfatin-1 后大鼠LH、FSH及其受体mRNA的表达 | 第42-43页 |
| 2.4.7 侧脑室注射Nesfatin-1 后大鼠ERα mRNA的表达 | 第43-44页 |
| 3 讨论 | 第44-54页 |
| 3.1 Nesfatin-1/NUCB2在大鼠下丘脑-垂体-卵巢上的定位 | 第44-45页 |
| 3.2 Nesfatin-1/NUCB2、Tac2、GnRH mRNA在初情期发育进程中大鼠下丘脑的表达 | 第45-47页 |
| 3.3 侧脑室注射Nesfatin-1 对大鼠促性腺激素分泌的影响 | 第47-49页 |
| 3.4 侧脑室注射Nesfatin-1 对大鼠初情期启动的影响及其机制 | 第49-54页 |
| 3.4.1 Nesfatin-1 对大鼠初情期启动的影响 | 第49页 |
| 3.4.2 Nesfatin-1 对大鼠雌激素分泌的影响 | 第49-50页 |
| 3.4.3 Nesfatin-1 对促性腺激素释放激素及其受体m RNA表达的影响 | 第50-51页 |
| 3.4.4 Nesfatin-1 对促性腺激素及其受体mRNA表达的影响 | 第51-52页 |
| 3.4.5 Nesfatin-1 对性腺激素受体mRNA表达的影响 | 第52-54页 |
| 4 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简介 | 第65-66页 |
| 在学期间发表的论著及科研成果清单 | 第66页 |
