| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 英文缩略词 | 第9-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-21页 |
| 1. 研究背景 | 第12-14页 |
| 2. 氧化损伤与心血管疾病 | 第14页 |
| 3. S1P 的研究进展 | 第14-17页 |
| 3.1 S1P 的合成与分解 | 第15页 |
| 3.2 S1P 作用途径 | 第15-16页 |
| 3.3 S1P 在心血管中的作用 | 第16-17页 |
| 4. 钙离子与心血管疾病 | 第17-21页 |
| 4.1 心肌细胞 Ca2+的调控 | 第18-19页 |
| 4.2 Ca2+—CaN—NFAT 信号通路与心血管疾病 | 第19-21页 |
| 第二章 实验试剂、仪器以及实验方法 | 第21-37页 |
| 1. 主要生物学试剂 | 第21-24页 |
| 2. 实验仪器 | 第24-25页 |
| 3. 实验方法与溶液配制 | 第25-36页 |
| 3.1 S1P 溶液的配制 | 第25页 |
| 3.2 大鼠乳鼠心肌细胞的原代培养 | 第25-26页 |
| 3.3 MTT 法测细胞活力实验 | 第26-27页 |
| 3.4 细胞内钙离子的检测 | 第27-28页 |
| 3.5 流式细胞术法检测细胞荧光强度 | 第28页 |
| 3.6 钙调神经磷酸酶(CaN) 活性的测定 | 第28页 |
| 3.7 免疫荧光染色法检测心肌细胞细胞质和细胞核内 NFAT 的表达 | 第28-30页 |
| 3.8 Real-time PCR 检测 Cav1.2 mRNA 表达 | 第30-32页 |
| 3.9 Western blot 检测心肌细胞 L 型钙通道蛋白表达 | 第32-36页 |
| 4 数据分析 | 第36-37页 |
| 第三章 实验结果 | 第37-51页 |
| 1. 差速贴壁法-大鼠乳鼠原代心肌细胞的培养 | 第37页 |
| 2. MTT 测细胞活力实验 | 第37-40页 |
| 2.1 不同浓度 S1P 对正常心肌细胞活力的影响 | 第37-38页 |
| 2.2 S1P 作用不同时间对正常心肌细胞活力的影响 | 第38-39页 |
| 2.3 不同浓度 S1P 对 H2O2损伤的心肌细胞活力的影响 | 第39页 |
| 2.4 S1P 作用不同时间对 H2O2损伤心肌细胞活力的影响 | 第39-40页 |
| 3. 流式细胞术检测细胞内钙离子浓度 | 第40-43页 |
| 3.1 S1P 对正常心肌细胞钙离子浓度的影响 | 第40-41页 |
| 3.2 S1P 对 H2O2损伤的心肌细胞钙离子浓度的影响 | 第41-43页 |
| 4. 荧光显微镜检测细胞内钙离子浓度 | 第43-44页 |
| 4.1 S1P 对正常心肌细胞的钙离子浓度的影响 | 第43页 |
| 4.2 S1P 对 H2O2损伤心肌细胞钙离子浓度的影响 | 第43-44页 |
| 5. 钙调神经磷酸酶活性的测定 | 第44-45页 |
| 5.1 S1P 对正常心肌细胞的 CaN 活性的影响 | 第44-45页 |
| 5.2 S1P 对 H2O2损伤的心肌细胞 CaN 活性影响 | 第45页 |
| 6. 免疫荧光染色检测心肌细胞内 NFAT 的表达和核转位 | 第45-47页 |
| 6.1 S1P 对正常心肌细胞 NFAT 的表达和核转位 | 第46页 |
| 6.2 S1P 对 H2O2损伤心肌细胞 NFAT 的表达和核转位 | 第46-47页 |
| 7. CaN 阻断剂 FK-506 对 H2O2损伤心肌细胞的细胞活力的影响 | 第47-48页 |
| 8. Real-time PCR 检测心肌细胞 Cav1.2 mRNA 的表达 | 第48-50页 |
| 8.1 S1P 对正常心肌细胞 Cav1.2 mRNA 的表达 | 第48-49页 |
| 8.2 S1P 对 H2O2损伤的心肌细胞 Cav1.2 mRNA 的表达 | 第49-50页 |
| 9. Western-blot 检测心肌细胞 L 型钙通道蛋白的表达 | 第50-51页 |
| 9.1 S1P 对正常心肌细胞的 L 型钙通道蛋白的表达的影响 | 第50页 |
| 9.2 S1P 对 H2O2损伤的心肌细胞 L 型钙通道蛋白的表达的影响 | 第50-51页 |
| 第四章 讨论 | 第51-54页 |
| 第五章 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
