中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
中英文缩略语表 | 第11-12页 |
第1章 绪论 | 第12-22页 |
1.1 植物的耐铝机制 | 第12-14页 |
1.1.1 植物的内部忍耐机制 | 第12-13页 |
1.1.2 植物的外排机制 | 第13-14页 |
1.2 耐铝的相关基因 | 第14-17页 |
1.2.1 ALMT 家族 | 第14-15页 |
1.2.2 MATE 家族 | 第15页 |
1.2.3 ATP 结合盒(ABC)通道蛋白家族 | 第15-16页 |
1.2.4 Nramp 家族 | 第16页 |
1.2.5 耐铝基因表达的调控 | 第16-17页 |
1.3 STOP1 的研究进展 | 第17-20页 |
1.3.1 STOP1 的功能 | 第17-18页 |
1.3.2 STOP1 的结构 | 第18-19页 |
1.3.3 STOP1 转录活性的机理 | 第19-20页 |
1.4 研究目的与意义 | 第20-22页 |
第2章 拟南芥转录因子 STOP1 互作蛋白的筛选 | 第22-36页 |
2.1 实验材料 | 第22页 |
2.2 试剂与仪器 | 第22-23页 |
2.2.1 试剂 | 第22-23页 |
2.2.2 仪器 | 第23页 |
2.3 实验方法 | 第23-30页 |
2.3.1 诱饵载体的构建 | 第23-27页 |
2.3.2 酵母转化及诱饵载体条件的优化 | 第27-28页 |
2.3.3 利用 GAL‐4 酵母双杂交系统筛选文库 | 第28-29页 |
2.3.4 X‐gal 蓝斑实验分析筛选阳性克隆 | 第29-30页 |
2.4 结果与分析 | 第30-34页 |
2.4.1 拟南芥 RNA 质量检测 | 第30-31页 |
2.4.2 诱饵载体的构建 | 第31-32页 |
2.4.3 酵母双杂交筛库条件的优化 | 第32-33页 |
2.4.4 酵母双杂交系统筛选文库 | 第33页 |
2.4.5 筛库结果 | 第33-34页 |
2.5 讨论 | 第34-36页 |
第3章 STOP1 和 NaKR1 蛋白互作的验证 | 第36-47页 |
3.1 实验材料 | 第36页 |
3.2 试剂与仪器 | 第36-38页 |
3.2.1 试剂 | 第36-38页 |
3.2.2 仪器 | 第38页 |
3.3 实验方法 | 第38-43页 |
3.3.1 酵母中互作验证实验 | 第38-40页 |
3.3.2 人类细胞 293T 中互作 pull down 验证实验 | 第40-43页 |
3.4 结果与分析 | 第43-46页 |
3.4.1 酵母质粒载体的构建 | 第43页 |
3.4.2 X‐gal 蓝斑实验 | 第43-44页 |
3.4.3 液体显色实验 | 第44页 |
3.4.4 pull down 实验验证 | 第44-46页 |
3.5 讨论 | 第46-47页 |
第4章 NaKR1 在拟南芥耐铝性中的作用 | 第47-60页 |
4.1 实验材料 | 第47页 |
4.2 实验试剂和仪器 | 第47-50页 |
4.2.1 实验试剂 | 第47-49页 |
4.2.2 实验仪器 | 第49页 |
4.2.3 实验引物 | 第49-50页 |
4.3 实验方法 | 第50-55页 |
4.3.1 铝胁迫下 NaKR1 的表达特性分析 | 第50-51页 |
4.3.2 STOP1 和 NaKR1 的亚细胞定位 | 第51-53页 |
4.3.3 农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第53-55页 |
4.4 结果与分析 | 第55-59页 |
4.4.1 铝胁迫下拟南芥 NaKR1 基因表达分析 | 第55-56页 |
4.4.2 STOP1 及 NaKR1 的亚细胞定位 | 第56-57页 |
4.4.3 NaKR1 转基因拟南芥阳性苗的筛选 | 第57页 |
4.4.4 NaKR1 转基因拟南芥的耐铝性筛选 | 第57-59页 |
4.5 讨论 | 第59-60页 |
第5章 结论及展望 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-71页 |
作者简介 | 第71-72页 |
致谢 | 第72页 |