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利用酵母双杂交系统筛选拟南芥耐铝相关转录因子STOP1互作蛋白

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
中英文缩略语表第11-12页
第1章 绪论第12-22页
    1.1 植物的耐铝机制第12-14页
        1.1.1 植物的内部忍耐机制第12-13页
        1.1.2 植物的外排机制第13-14页
    1.2 耐铝的相关基因第14-17页
        1.2.1 ALMT 家族第14-15页
        1.2.2 MATE 家族第15页
        1.2.3 ATP 结合盒(ABC)通道蛋白家族第15-16页
        1.2.4 Nramp 家族第16页
        1.2.5 耐铝基因表达的调控第16-17页
    1.3 STOP1 的研究进展第17-20页
        1.3.1 STOP1 的功能第17-18页
        1.3.2 STOP1 的结构第18-19页
        1.3.3 STOP1 转录活性的机理第19-20页
    1.4 研究目的与意义第20-22页
第2章 拟南芥转录因子 STOP1 互作蛋白的筛选第22-36页
    2.1 实验材料第22页
    2.2 试剂与仪器第22-23页
        2.2.1 试剂第22-23页
        2.2.2 仪器第23页
    2.3 实验方法第23-30页
        2.3.1 诱饵载体的构建第23-27页
        2.3.2 酵母转化及诱饵载体条件的优化第27-28页
        2.3.3 利用 GAL‐4 酵母双杂交系统筛选文库第28-29页
        2.3.4 X‐gal 蓝斑实验分析筛选阳性克隆第29-30页
    2.4 结果与分析第30-34页
        2.4.1 拟南芥 RNA 质量检测第30-31页
        2.4.2 诱饵载体的构建第31-32页
        2.4.3 酵母双杂交筛库条件的优化第32-33页
        2.4.4 酵母双杂交系统筛选文库第33页
        2.4.5 筛库结果第33-34页
    2.5 讨论第34-36页
第3章 STOP1 和 NaKR1 蛋白互作的验证第36-47页
    3.1 实验材料第36页
    3.2 试剂与仪器第36-38页
        3.2.1 试剂第36-38页
        3.2.2 仪器第38页
    3.3 实验方法第38-43页
        3.3.1 酵母中互作验证实验第38-40页
        3.3.2 人类细胞 293T 中互作 pull down 验证实验第40-43页
    3.4 结果与分析第43-46页
        3.4.1 酵母质粒载体的构建第43页
        3.4.2 X‐gal 蓝斑实验第43-44页
        3.4.3 液体显色实验第44页
        3.4.4 pull down 实验验证第44-46页
    3.5 讨论第46-47页
第4章 NaKR1 在拟南芥耐铝性中的作用第47-60页
    4.1 实验材料第47页
    4.2 实验试剂和仪器第47-50页
        4.2.1 实验试剂第47-49页
        4.2.2 实验仪器第49页
        4.2.3 实验引物第49-50页
    4.3 实验方法第50-55页
        4.3.1 铝胁迫下 NaKR1 的表达特性分析第50-51页
        4.3.2 STOP1 和 NaKR1 的亚细胞定位第51-53页
        4.3.3 农杆菌介导的拟南芥遗传转化第53-55页
    4.4 结果与分析第55-59页
        4.4.1 铝胁迫下拟南芥 NaKR1 基因表达分析第55-56页
        4.4.2 STOP1 及 NaKR1 的亚细胞定位第56-57页
        4.4.3 NaKR1 转基因拟南芥阳性苗的筛选第57页
        4.4.4 NaKR1 转基因拟南芥的耐铝性筛选第57-59页
    4.5 讨论第59-60页
第5章 结论及展望第60-62页
参考文献第62-71页
作者简介第71-72页
致谢第72页

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