| 中文摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 中英文缩略语表 | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-21页 |
| 1.1 酸性土壤和植物铝毒害 | 第11-15页 |
| 1.1.1 酸性土壤及大豆生产 | 第11页 |
| 1.1.2 植物的铝毒害机理 | 第11-13页 |
| 1.1.3 大豆抗铝品种的筛选 | 第13-15页 |
| 1.2 大豆抗铝机制研究进展 | 第15-19页 |
| 1.3 GmNADP-ME 基因的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.4 问题的提出及研究目的意义 | 第20-21页 |
| 第二章 大豆 NADP-ME 基因的克隆及生物信息学分析 | 第21-42页 |
| 2.1 材料与方法 | 第21-22页 |
| 2.1.1 植物材料、菌种与载体 | 第21页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第21页 |
| 2.1.3 实验药品 | 第21-22页 |
| 2.1.4 实验软件 | 第22页 |
| 2.2 研究方法 | 第22-33页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第22页 |
| 2.2.2 大豆发芽和培养 | 第22-23页 |
| 2.2.3 大豆根尖 RNA 提取 | 第23页 |
| 2.2.4 cDNA 合成的反转录反应 | 第23-24页 |
| 2.2.5 PCR 扩增体系 | 第24-25页 |
| 2.2.6 目的基因片段回收 | 第25-26页 |
| 2.2.7 线性化 pCAMBIA3301 载体与目的基因片段的连接 | 第26-27页 |
| 2.2.8 连接产物转化 DH5α感受态细胞 | 第27-28页 |
| 2.2.9 质粒的提取 | 第28-29页 |
| 2.2.10 电击转化发根农杆菌感受态细胞 | 第29-30页 |
| 2.2.11 发根农杆菌菌液验证 | 第30页 |
| 2.2.12 GmNADP-ME 基因的生物信息学分析 | 第30页 |
| 2.2.13 GmNADP-ME 亚细胞定位 | 第30-33页 |
| 2.3 结果与分析 | 第33-41页 |
| 2.3.1 提取大豆 RNA 质量检测 | 第33-34页 |
| 2.3.2 GmNADP-ME 基因的扩增 | 第34页 |
| 2.3.3 DH5α菌液 PCR 验证 | 第34-35页 |
| 2.3.4 质粒 PCR 检测 | 第35页 |
| 2.3.5 质粒转化发根农杆菌感受态细胞 | 第35-36页 |
| 2.3.6 大豆 NADP-ME 基因序列及蛋白基本性质分析 | 第36-38页 |
| 2.3.7 GmNADP-ME 蛋白功能结构域预测 | 第38页 |
| 2.3.8 GmNADP-ME 基因同源比对及其进化树分析 | 第38-40页 |
| 2.3.9 大豆 NADP-ME 基因亚细胞定位 | 第40-41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-42页 |
| 第三章 GmNADP-ME 基因在大豆耐铝性中的调控作用 | 第42-53页 |
| 3.1 材料与方法 | 第42-43页 |
| 3.1.1 植物材料、菌种 | 第42页 |
| 3.1.2 实验药品 | 第42页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第42页 |
| 3.1.4 引物设计 | 第42-43页 |
| 3.2 研究方法 | 第43-46页 |
| 3.2.1 大豆 NADP-ME 基因的表达模式分析 | 第43-44页 |
| 3.2.2 大豆发根培养及诱导 | 第44页 |
| 3.2.3 大豆发根阳性验证 | 第44页 |
| 3.2.4 苏木精染色分析 | 第44-45页 |
| 3.2.5 柠檬酸分泌速率的测定 | 第45-46页 |
| 3.3 结果及分析 | 第46-50页 |
| 3.3.1 大豆 NADP-ME 基因的表达模式分析 | 第46-48页 |
| 3.3.2 苏木精染色 | 第48-49页 |
| 3.3.3 Al 胁迫下 GmNADP-ME 过表达大豆根系柠檬酸分泌 | 第49-50页 |
| 3.4 讨论 | 第50-53页 |
| 第四章 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-66页 |
| 作者简介 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
