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甲肝病毒3C蛋白酶识别序列有效性的研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 前言第11-20页
    1.1 甲型肝炎病毒第11-14页
        1.1.1 甲型病毒肝炎第11页
        1.1.2 甲肝病毒特征第11页
        1.1.3 甲肝病毒的致病性第11-12页
        1.1.4 甲肝病毒的基因型第12页
        1.1.5 甲肝病毒的流行情况第12-13页
        1.1.6 甲肝病毒基因组结构第13页
        1.1.7 甲肝病毒的预防第13-14页
    1.2 甲肝病毒 3C 蛋白酶第14-15页
        1.2.1 3C 蛋白酶的结构第14页
        1.2.2 3C 蛋白酶的功能第14页
        1.2.3 3C 蛋白酶酶切位点第14-15页
        1.2.4 蛋白酶酶切位点的检测方法第15页
    1.3 Pro-Interleukin-1B-Gaussia luciferase(ProIL1B-Gluc)第15-18页
        1.3.1 Gaussia 荧光素酶简介第15-16页
        1.3.2 Gaussia 荧光素酶的应用第16页
        1.3.3 ProIL1B-Gluc 融合蛋白荧光素酶报告基因的应用第16-18页
    1.4 本课题研究目的与立题依据第18页
        1.4.1 研究目的第18页
        1.4.2 立题依据第18页
    1.5 实验设计第18-20页
        1.5.1 质粒的构建第18-19页
        1.5.2 融合蛋白表达的鉴定第19页
        1.5.3 ProIL1B-Gluc 转染 293T 细胞荧光值的检测第19页
        1.5.4 3C 蛋白酶体外切割 ProIL1B-Gluc 报告基因第19页
        1.5.5 实验设计图第19-20页
第二章 材料与方法第20-32页
    2.1 实验器材第20-23页
        2.1.1 实验仪器第20-21页
        2.1.2 实验材料第21-22页
        2.1.3 常用试剂配制第22-23页
    2.2 实验方法第23-32页
        2.2.1 质粒构建 PCR 及引物设计第23-28页
        2.2.2 质粒构建筛选与扩增第28-30页
        2.2.3 质粒转染细胞及融合蛋白表达的鉴定第30-31页
        2.2.4 报告基因荧光值的检测第31-32页
第三章 实验结果第32-47页
    3.1 质粒的构建第32-37页
        3.1.1 Pro(9)IL1B-Gluc 质粒的构建第32-33页
        3.1.2 Pro(8-5A)IL1B-Gluc 质粒的构建第33-35页
        3.1.3 IL1B-Gluc 质粒的构建第35-36页
        3.1.4 P3C 质粒的构建第36-37页
    3.2 荧光值的检测和融合蛋白表达的鉴定与分析第37-45页
        3.2.1 ProIL1B-Gluc 报告基因可行性检测第37-38页
        3.2.2 P9-P5A 单转染 293T 细胞荧光值随时间的变化及其相应的 Western blot第38-40页
        3.2.3 P9-P5A 单转染 293T 细胞荧光值随质粒浓度的变化及相应的 Western blot第40-41页
        3.2.4 P9-P5A 六个不同酶切位点长度报告基因的可行性第41-42页
        3.2.5 ProIL1B-Gluc 荧光值与 P3C 转染质粒浓度的关系第42-44页
        3.2.6 ProIL1B-Gluc 与 P3C 共转染 293T 细胞荧光值随时间的变化第44-45页
    3.3 ProIL1B-Gluc 与 P3C 体外切割实验第45-47页
讨论第47-50页
结论第50-51页
文献第51-54页
作者简介第54-55页
致谢第55页

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