| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 文献综述 | 第10-22页 |
| 1.1 植物花色的形成及研究进展 | 第10-14页 |
| 1.1.1 花瓣色素组成 | 第10-11页 |
| 1.1.2 花色素苷的生物合成途径 | 第11-12页 |
| 1.1.3 花色素苷生物合成途径相关基因及其在花色改良中的应用 | 第12-14页 |
| 1.2 二氢黄酮醇4-还原酶基因(DFR)研究进展 | 第14-16页 |
| 1.2.1 DFR的结构和作用机制 | 第14-15页 |
| 1.2.2 DFR基因的克隆及异源表达 | 第15-16页 |
| 1.2.3 DFR基因的系统进化 | 第16页 |
| 1.3 RNA干扰技术及其在植物花色改良中的应用 | 第16-18页 |
| 1.3.1 RNAi的概念及其发现 | 第16-17页 |
| 1.3.2 RNAi的作用机制 | 第17页 |
| 1.3.3 RNAi技术在植物花色改良中的应用 | 第17-18页 |
| 1.4 立题依据 | 第18-19页 |
| 1.5 研究内容及技术路线 | 第19-22页 |
| 1.5.1 主要研究内容 | 第19-21页 |
| 1.5.2 技术路线 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-40页 |
| 2.1 试验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第22页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第22-23页 |
| 2.2 主要培养基及其组成 | 第23-25页 |
| 2.2.1 植物培养基 | 第23-25页 |
| 2.2.2 细菌培养基 | 第25页 |
| 2.3 主要试剂及制备 | 第25-26页 |
| 2.4 抗生素和激素 | 第26-27页 |
| 2.5 实验器材设备 | 第27页 |
| 2.6 试验方法 | 第27-40页 |
| 2.6.1 百合DFR基因的克隆 | 第27-33页 |
| 2.6.2 生物信息学分析 | 第33页 |
| 2.6.3 百合DFR基因功能鉴定 | 第33-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-62页 |
| 3.1 百合LoDFRl和LoDFR2基因的的克隆 | 第40-42页 |
| 3.1.1 RNA提取及检测 | 第40页 |
| 3.1.2 RT-PCR及PCR扩增结果 | 第40-41页 |
| 3.1.3 阳性克隆的筛选和鉴定 | 第41-42页 |
| 3.2 生物信息学分析 | 第42-49页 |
| 3.2.1 测序结果 | 第42-44页 |
| 3.2.2 蛋白质基本理化性质预测 | 第44-45页 |
| 3.2.3 NADP结合区和底物特异结合区分析 | 第45-47页 |
| 3.2.4 同源性分析及系统进化树分析 | 第47-49页 |
| 3.3 百合DFR基因功能鉴定 | 第49-62页 |
| 3.3.1 百合DFR基因RNAi载体的构建 | 第49-55页 |
| 3.3.2 农杆菌介导的百合的遗传转化及检测 | 第55-60页 |
| 3.3.3 农杆菌介导的烟草的遗传转化及检测 | 第60-62页 |
| 3.3.4 转基因百合及烟草的表型观察及分析 | 第62页 |
| 4 讨论 | 第62-65页 |
| 4.1 DFR基因家族的特征 | 第62-63页 |
| 4.2 目的片段的选择及发卡结构RNA介导的基因沉默 | 第63-64页 |
| 4.3 DFR功能鉴定的方法 | 第64-65页 |
| 5 结论 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 附录 | 第73-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
