| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第12-18页 |
| 1.1 刺激隐核虫的分类地位 | 第12页 |
| 1.2 刺激隐核虫的生活史 | 第12-13页 |
| 1.3 刺激隐核虫的宿主范围及地理分布 | 第13页 |
| 1.4 刺激隐核虫的人工传代与培养 | 第13-14页 |
| 1.5 药物防治研究进展 | 第14-15页 |
| 1.6 免疫研究 | 第15-17页 |
| 1.6.1 非特异性免疫 | 第15-16页 |
| 1.6.2 特异性免疫 | 第16页 |
| 1.6.3 功能性蛋白研究 | 第16-17页 |
| 1.7 本论文研究的意义 | 第17-18页 |
| 第二章 刺激隐核虫虫株的分离与分子生物学鉴定分析 | 第18-28页 |
| 2.1 材料与方法 | 第18-22页 |
| 2.1.1 虫株来源 | 第18页 |
| 2.1.2 主要试剂与仪器 | 第18-19页 |
| 2.1.3 刺激隐核虫采集与分离 | 第19页 |
| 2.1.4 刺激隐核虫ITS-1序列扩增与分析 | 第19-21页 |
| 2.1.5 HSP70部分序列的扩增与分析 | 第21-22页 |
| 2.2 结果与分析 | 第22-26页 |
| 2.2.1 ITS-1序列PCR扩增 | 第22页 |
| 2.2.2 3株刺激隐核虫ITS-1序列分析 | 第22-24页 |
| 2.2.3 HSP70部分序列的PCR扩增及测序分析结果 | 第24-26页 |
| 2.3 讨论 | 第26-28页 |
| 第三章 刺激隐核虫在褐牙鲆上的传代及其生活史观察 | 第28-38页 |
| 3.1 材料与方法 | 第28-30页 |
| 3.1.1 试验动物与虫株 | 第28页 |
| 3.1.2 试验方法 | 第28-30页 |
| 3.2 结果与分析 | 第30-34页 |
| 3.2.1 刺激隐核虫的采集 | 第30页 |
| 3.2.3 刺激隐核虫在褐牙鲆上的传代及生活史各时期形态观察 | 第30-32页 |
| 3.2.3 低温冷藏对刺激隐核虫的影响 | 第32-33页 |
| 3.2.4 感染牙鲆血清对幼虫的抑动 | 第33-34页 |
| 3.4 讨论 | 第34-38页 |
| 第四章 刺激隐核虫幼虫膜蛋白单克隆抗体的制备 | 第38-54页 |
| 4.1 试验材料与设备 | 第38-39页 |
| 4.1.1 虫株 | 第38页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第38页 |
| 4.1.3 试验动物与细胞 | 第38页 |
| 4.1.4 主要仪器与耗材 | 第38-39页 |
| 4.2 方法 | 第39-45页 |
| 4.2.1 免疫抗原的制备 | 第39页 |
| 4.2.2 Balb/c小鼠的免疫 | 第39-40页 |
| 4.2.3 SP2/O细胞的复苏与培养 | 第40页 |
| 4.2.4 抗血清的制备 | 第40页 |
| 4.2.5 细胞的杂交融合 | 第40-41页 |
| 4.2.6 阳性克隆的筛选 | 第41-42页 |
| 4.2.7 杂交瘤细胞的亚克隆 | 第42-43页 |
| 4.2.8 单抗腹水的制备 | 第43页 |
| 4.2.9 单抗腹水效价的测定 | 第43-44页 |
| 4.2.10 单抗亚类的鉴定 | 第44页 |
| 4.2.11 单抗的抗原性分析 | 第44-45页 |
| 4.3 结果与分析 | 第45-51页 |
| 4.3.1 刺激隐核虫膜蛋白浓度的测定 | 第45页 |
| 4.3.2 刺激隐核虫幼虫膜蛋白的SDS-PAGE电泳 | 第45-46页 |
| 4.3.3 抗原包被浓度的确定和免疫鼠血清效价滴定 | 第46-47页 |
| 4.3.4 杂交融合与阳性筛选 | 第47页 |
| 4.3.5 单抗亚类的鉴定 | 第47页 |
| 4.3.6 单抗腹水的效价 | 第47-48页 |
| 4.3.7 Western-blotting分析抗原 | 第48-49页 |
| 4.3.8 免疫荧光分析抗原 | 第49-51页 |
| 4.4 讨论 | 第51-54页 |
| 总结 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 附录 | 第60-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 攻读硕士学位期间的主要科研成果 | 第65页 |
