| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩写名词表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-29页 |
| 1.1 研究问题的由来 | 第12-13页 |
| 1.2 拟南芥成花转化机理研究概述 | 第13-14页 |
| 1.3 水稻抽穗期基因调控网络概述 | 第14-16页 |
| 1.3.1 Hd1基因介导的开花调控途径 | 第15页 |
| 1.3.2 Ehd1基因介导的开花调控途径 | 第15-16页 |
| 1.3.3 水稻中其他一些影响开花的基因 | 第16页 |
| 1.4 IDD domain基因研究进展 | 第16-18页 |
| 1.5 糖和糖代谢分子作为信号对植物生长发育的影响 | 第18-24页 |
| 1.5.1 海藻糖代谢过程及其代谢产物对植物生长发育的影响 | 第18-20页 |
| 1.5.2 蔗糖代谢对植物生长发育的影响 | 第20-21页 |
| 1.5.3 淀粉代谢对植物生长发育的影响 | 第21-22页 |
| 1.5.4 T6P、蔗糖和淀粉之间的相互关系 | 第22-24页 |
| 1.6 植物基因定点编辑系统概述 | 第24-28页 |
| 1.6.1 ZFN系统概述 | 第24-25页 |
| 1.6.2 TALEN系统概述 | 第25页 |
| 1.6.3 CRISPR/Cas9系统概述 | 第25-28页 |
| 1.6.3.1 CRISPR/Cas9的结构 | 第26-27页 |
| 1.6.3.2 CRISPR/Cas9的作用机理 | 第27页 |
| 1.6.3.3 CRISPR/Cas9在水稻中的应用 | 第27-28页 |
| 1.7 研究的目的和意义 | 第28-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第29页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第29页 |
| 2.1.2 细菌菌株 | 第29页 |
| 2.1.3 质粒载体 | 第29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-34页 |
| 2.2.1 CTAB法抽提植株DNA | 第29-30页 |
| 2.2.2 水稻RNA抽提、RT-PCR和qRT-PCR检测基因表达量 | 第30-31页 |
| 2.2.3 CRISPR/Cas9靶位点的选择 | 第31页 |
| 2.2.4 遗传转化载体的构建 | 第31-32页 |
| 2.2.4.1 CRISPR/Cas9单靶位点载体构建 | 第31页 |
| 2.2.4.2 CRISPR/Cas9多靶位点载体构建 | 第31-32页 |
| 2.2.4.3 超量表达载体的构建 | 第32页 |
| 2.2.5 农杆菌介导的遗传转化 | 第32页 |
| 2.2.6 CRISPR/Cas9转基因材料的基因型鉴定 | 第32-33页 |
| 2.2.7 比较测序 | 第33页 |
| 2.2.8 葡萄糖、蔗糖、果糖含量的测定 | 第33页 |
| 2.2.9 二硝基水杨酸法定量分析水稻叶片中淀粉含量 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-58页 |
| 3.1 RID1调控水稻成花转化与海藻糖代谢之间的关系研究 | 第34-45页 |
| 3.1.1 绘制海藻糖代谢路径基因表达谱 | 第34-35页 |
| 3.1.2 野生型与rid1材料背景下海藻糖代谢路径基因差异表达分析 | 第35-37页 |
| 3.1.3 RID1直接结合到OsTPS1、OsTPS8的启动子区域 | 第37-38页 |
| 3.1.4 海藻糖代谢路径基因T-DNA插入突变体材料分析 | 第38-45页 |
| 3.1.4.1 海藻糖代谢路径基因T-DNA插入突变体的索取 | 第38-39页 |
| 3.1.4.2 突变体材料的共分离检测与基因表达分析 | 第39-45页 |
| 3.2 RID1调控水稻成花转化与蔗糖代谢、淀粉代谢之间的关系研究 | 第45-50页 |
| 3.2.1 野生型与rid1材料背景下蔗糖代谢、淀粉代谢相关基因表达分析 | 第45-48页 |
| 3.2.2 野生型与rid1材料背景下葡萄糖、果糖、蔗糖含量分析 | 第48-49页 |
| 3.2.3 野生型与rid1材料背景下淀粉含量分析 | 第49-50页 |
| 3.3 利用转基因技术创建碳素代谢突变体材料 | 第50-58页 |
| 3.3.1 利用超表达技术创建pUBQ::OtsA与pUBQ::OtsB材料 | 第50-51页 |
| 3.3.2 利用CRISPR/cas9单位点基因编辑技术创造糖代谢突变体 | 第51-53页 |
| 3.3.3 利用CRISPR/cas9多位点基因编辑技术创造糖代谢突变体 | 第53-58页 |
| 4. 讨论 | 第58-62页 |
| 4.1 RID1可能通过糖代谢网络调控水稻开花 | 第58-60页 |
| 4.1.1 RID1调控水稻开花与海藻糖代谢、蔗糖代谢之间的关系 | 第58-59页 |
| 4.1.2 RID1调控水稻开花与淀粉代谢之间的关系 | 第59页 |
| 4.1.3 海藻糖代谢、蔗糖代谢和淀粉代谢之间可能相互作用 | 第59-60页 |
| 4.2 运用正向遗传学策略与反向遗传学策略研究基因功能 | 第60-61页 |
| 4.3 糖代谢突变体材料创建的意义 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 附表1 引物名称及序列表 | 第69-71页 |
| 附表2 转基因材料编号 | 第71-72页 |
| 附录3 作者简介 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
