中文摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
本论文的主要创新点 | 第14-15页 |
第—章 绪论 | 第15-64页 |
1.1 蛋白质组学发展概况 | 第15-25页 |
1.1.1 蛋白质组学中的生物质谱技术 | 第15-19页 |
1.1.2 基于质谱的蛋白质组学基本分析策略 | 第19-21页 |
1.1.3 蛋白质组学的样品预处理技术 | 第21-25页 |
1.1.3.1 蛋白水平的预处理技术 | 第21-22页 |
1.1.3.2 多肽水平的预处理技术 | 第22-23页 |
1.1.3.3 蛋白酶解技术 | 第23-25页 |
1.2 固定化酶反应器在蛋白质组学研究中的应用 | 第25-38页 |
1.2.1 蛋白质组学中固定化酶反应器研究概况 | 第25-29页 |
1.2.1.1 整体材料用于固定化酶 | 第25-29页 |
1.2.1.2 膜材料用于固定化酶 | 第29页 |
1.2.1.3 开管柱用于固定化酶 | 第29页 |
1.2.2 基于功能性纳米材料的蛋白质组学固定化酶反应器 | 第29-38页 |
1.2.2.1 功能性纳米材料用于固定化酶 | 第30-34页 |
1.2.2.2 微芯片反应器用于固定化酶 | 第34-38页 |
1.3 磷酸肽富集技术在蛋白质组学分析中的应用 | 第38-50页 |
1.3.1 磷酸肽的分离富集技术 | 第38-43页 |
1.3.1.1 化学修饰法 | 第40页 |
1.3.1.2 固定化金属离子亲和色谱法 | 第40-42页 |
1.3.1.3 离子交换色谱法 | 第42-43页 |
1.3.1.4 金属氧化物亲和色谱法 | 第43页 |
1.3.2 功能性纳米材料在磷酸肽富集中的应用 | 第43-50页 |
1.3.2.1 TiO_2纳米材料用于磷酸肽富集 | 第44-46页 |
1.3.2.2 ZrO_2纳米材料用于磷酸肽富集 | 第46-47页 |
1.3.2.3 其他纳米材料用于磷酸肽富集 | 第47-50页 |
1.4 本论文选题思路和主要工作 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-64页 |
第二章 基于介孔硅酶反应器的尺寸选择性酶解及其对低分子量蛋白组的分析应用 | 第64-84页 |
2.1 前言 | 第64-66页 |
2.2 实验部分 | 第66-69页 |
2.2.1 试剂与样品 | 第66页 |
2.2.2 介孔硅材料的制备 | 第66页 |
2.2.3 固定化酶 | 第66-67页 |
2.2.4 固定化酶解吸附的测定 | 第67页 |
2.2.5 模式蛋白吸附实验 | 第67页 |
2.2.6 模式蛋白酶解 | 第67-68页 |
2.2.7 人血清样品酶解 | 第68页 |
2.2.8 质谱分析 | 第68-69页 |
2.2.9 数据检索与处理 | 第69页 |
2.3 结果与讨论 | 第69-81页 |
2.3.1 介孔硅的表征 | 第69-70页 |
2.3.2 固定化酶解吸附评价 | 第70-72页 |
2.3.3 模式蛋白吸附实验 | 第72-73页 |
2.3.4 模式蛋白尺寸选择性酶解 | 第73-78页 |
2.3.5 人血清样品的尺寸选择性酶解 | 第78-81页 |
2.4 结论 | 第81页 |
参考文献 | 第81-84页 |
第三章 磁性介孔硅填充的S形管道微芯片反应器在低分子量蛋白组在线酶解中的应用 | 第84-104页 |
3.1 前言 | 第84-86页 |
3.2 实验部分 | 第86-90页 |
3.2.1 试剂和仪器 | 第86页 |
3.2.2 Fe_3O_4纳米粒子和介孔硅SBA-15的制备 | 第86页 |
3.2.3 磁性介孔硅材料Fe_3O_4-SBA-15的合成以及胰蛋白酶的固定化 | 第86-87页 |
3.2.4 玻璃基底的微流控芯片制作 | 第87-88页 |
3.2.5 模式蛋白的芯片内酶解 | 第88页 |
3.2.6 人血清样品在线酶解分析 | 第88-89页 |
3.2.7 质谱分析 | 第89-90页 |
3.2.8 数据检索与处理 | 第90页 |
3.3 结果与讨论 | 第90-101页 |
3.3.1 磁性介孔硅复合材料Fe_3O_4-SBA-15表征 | 第90-93页 |
3.3.2 磁性介孔硅Fe_3O_4-SBA-15在玻璃芯片中的固定 | 第93-94页 |
3.3.3 模式蛋白在微芯片酶反应器中的选择性酶解 | 第94-99页 |
3.3.4 血清样品在微芯片酶反应器中的在线酶解 | 第99-101页 |
3.4 结论 | 第101页 |
参考文献 | 第101-104页 |
第四章 Fe_3O_4-石墨烯-TiO_2三元复合材料的合成及其对磷酸肽的选择性富集 | 第104-121页 |
4.1 前言 | 第104-106页 |
4.2 实验部分 | 第106-108页 |
4.2.1 试剂和仪器 | 第106页 |
4.2.2 Fe_3O_4-GR-TiO_2三元复合材料的制备 | 第106-107页 |
4.2.3 模式蛋白酶解 | 第107页 |
4.2.4 α-酪蛋白酶解液吸附实验 | 第107-108页 |
4.2.5 三元复合材料Fe_3O_4-GR-TiO_2对磷酸肽的富集 | 第108页 |
4.2.6 质谱分析 | 第108页 |
4.3 结果与讨论 | 第108-118页 |
4.3.1 三元复合材料Fe_3O_4-GR-TiO_2表征 | 第108-113页 |
4.3.2 三元复合材料Fe_3O_4-GR-TiO_2对β-酪蛋白酶解液中磷酸肽的富集 | 第113-116页 |
4.3.3 三元复合材料Fe_3O_4-GR-TiO_2对α-酪蛋白酶解液中磷酸肽的富集 | 第116-117页 |
4.3.4 三元复合材料Fe_3O_4-GR-TiO_2对血清中内源性磷酸肽的富集 | 第117-118页 |
4.4 结论 | 第118-119页 |
参考文献 | 第119-121页 |
第五章 TiO_2纳米管阵列/PDMS微器件用于芯片内的磷酸肽富集 | 第121-141页 |
5.1 前言 | 第121-123页 |
5.2 实验部分 | 第123-127页 |
5.2.1 试剂和仪器 | 第123页 |
5.2.2 图案化钛膜层的制备 | 第123-124页 |
5.2.3 电化学腐蚀法制备TiO_2纳米管 | 第124-125页 |
5.2.4 TiO_2纳米管功能化微器件的构建 | 第125-126页 |
5.2.5 模式蛋白酶解与磷酸肽的芯片内富集 | 第126-127页 |
5.2.6 质谱分析 | 第127页 |
5.3 结果与讨论 | 第127-138页 |
5.3.1 微器件的设计与结构 | 第127-128页 |
5.3.2 玻璃基底的TiO_2纳米管的表征 | 第128-130页 |
5.3.3 直线形管道微器件用于β-酪蛋白酶解液的磷酸肽富集 | 第130-136页 |
5.3.4 S形管道微器件用于α-酪蛋白和β-酪蛋白酶解液的磷酸肽富集 | 第136-138页 |
5.4 结论 | 第138-139页 |
参考文献 | 第139-141页 |
附录 | 第141-151页 |
作者在攻读博士学位期间已发表和待发表的论文 | 第151-153页 |
致谢 | 第153-154页 |