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重组SARS-CoV S蛋白表位肽疫苗的研究

英文缩写词表第7-9页
前言第9-11页
文献回顾第11-32页
    1. SARS 爆发和冠状病毒第11-13页
    2. 流行病学第13-15页
    3. 临床特点第15-16页
    4. SARS-CoV 的基因组特点第16-17页
    5. SARS-CoV 基因组编码的蛋白质分析及预测第17-20页
    6. SARS-CoV 基因组的变异分析第20-22页
    7. SARS-CoV 的生活周期、致病机理及发病机制第22-25页
    8. 抗SARS-CoV 药物的研究现状第25-30页
    9. 有待深入研究的问题第30-32页
材料与方法第32-50页
    1 实验材料第32-35页
        1.1 试剂第32-33页
        1.2 质粒与菌株第33页
        1.3 实验动物第33页
        1.4 引物第33页
        1.5 培养基第33-34页
        1.6 仪器设备第34-35页
    2 实验方法第35-50页
        2.1 S 蛋白B 细胞表位抗原区的预测及疫苗结构设计第35-36页
        2.2 利用PCR 法合成S_2和S_6基因片段第36-38页
        2.3 DNA 片段的TA 克隆及测序第38-39页
        2.4 pMD-18T-PS_2重组质粒的构建第39-40页
        2.5 重组质粒亚克隆入pET28a 表达载体第40页
        2.6 重组蛋白的表达、纯化第40-42页
        2.7 重组蛋白免疫小鼠和多克隆抗体制备第42-43页
        2.8 Western blot第43页
        2.9 间接ELISA 法检测抗体效价第43-44页
        2.10 Immuno-dot blot第44页
        2.11 灭活的SARS-CoV IgG 抗体检测试剂盒检测抗体第44-45页
        2.12 抗体分型和上清中抗51 抗体的检测第45页
        2.13 血清中细胞因子的定量检测第45-46页
        2.14 小鼠脾细胞的分离培养第46页
        2.15 人PBMC 的分离培养第46-47页
        2.16 3H-TdR 掺入实验第47-48页
        2.17 CFSE 染色和FACS 分析第48-49页
        2.18 重组蛋白对人外周血B 细胞活化的检测第49页
        2.19 统计分析第49-50页
实验结果第50-63页
    1. S蛋白B细胞表位抗原区的预测及疫苗设计第50-52页
    2. PS_2和CS_6基因的构建及重组蛋白的表达、纯化和鉴定第52-55页
    3. 重组PS_2和CS_6蛋白的抗原性分析第55-56页
    4. 重组PS_2蛋白诱导的识别SARS-CoV 抗体的检测第56-57页
    5. 重组PS_2蛋白诱生小鼠抗体的型别分析第57-58页
    6. 重组PS_2蛋白免疫小鼠脾细胞培养上清中抗体的检测第58-59页
    7. 重组PS_2蛋白免疫小鼠血清中细胞因子的检测第59页
    8. 重组PS_2蛋白对小鼠脾细胞及B 细胞特异性增殖的诱导作用第59-60页
    9. 重组PS_2蛋白对人PBMC 增殖及B 细胞活化的诱导作用第60-63页
图和照片第63-82页
讨论第82-94页
结论第94-95页
参考文献第95-105页
攻读博士学位期间已或待发表的文章第105-106页
创新性声明第106-107页
中文摘要第107-115页
ABSTRACT第115页
致谢第125页

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