英文缩写词表 | 第7-9页 |
前言 | 第9-11页 |
文献回顾 | 第11-32页 |
1. SARS 爆发和冠状病毒 | 第11-13页 |
2. 流行病学 | 第13-15页 |
3. 临床特点 | 第15-16页 |
4. SARS-CoV 的基因组特点 | 第16-17页 |
5. SARS-CoV 基因组编码的蛋白质分析及预测 | 第17-20页 |
6. SARS-CoV 基因组的变异分析 | 第20-22页 |
7. SARS-CoV 的生活周期、致病机理及发病机制 | 第22-25页 |
8. 抗SARS-CoV 药物的研究现状 | 第25-30页 |
9. 有待深入研究的问题 | 第30-32页 |
材料与方法 | 第32-50页 |
1 实验材料 | 第32-35页 |
1.1 试剂 | 第32-33页 |
1.2 质粒与菌株 | 第33页 |
1.3 实验动物 | 第33页 |
1.4 引物 | 第33页 |
1.5 培养基 | 第33-34页 |
1.6 仪器设备 | 第34-35页 |
2 实验方法 | 第35-50页 |
2.1 S 蛋白B 细胞表位抗原区的预测及疫苗结构设计 | 第35-36页 |
2.2 利用PCR 法合成S_2和S_6基因片段 | 第36-38页 |
2.3 DNA 片段的TA 克隆及测序 | 第38-39页 |
2.4 pMD-18T-PS_2重组质粒的构建 | 第39-40页 |
2.5 重组质粒亚克隆入pET28a 表达载体 | 第40页 |
2.6 重组蛋白的表达、纯化 | 第40-42页 |
2.7 重组蛋白免疫小鼠和多克隆抗体制备 | 第42-43页 |
2.8 Western blot | 第43页 |
2.9 间接ELISA 法检测抗体效价 | 第43-44页 |
2.10 Immuno-dot blot | 第44页 |
2.11 灭活的SARS-CoV IgG 抗体检测试剂盒检测抗体 | 第44-45页 |
2.12 抗体分型和上清中抗51 抗体的检测 | 第45页 |
2.13 血清中细胞因子的定量检测 | 第45-46页 |
2.14 小鼠脾细胞的分离培养 | 第46页 |
2.15 人PBMC 的分离培养 | 第46-47页 |
2.16 3H-TdR 掺入实验 | 第47-48页 |
2.17 CFSE 染色和FACS 分析 | 第48-49页 |
2.18 重组蛋白对人外周血B 细胞活化的检测 | 第49页 |
2.19 统计分析 | 第49-50页 |
实验结果 | 第50-63页 |
1. S蛋白B细胞表位抗原区的预测及疫苗设计 | 第50-52页 |
2. PS_2和CS_6基因的构建及重组蛋白的表达、纯化和鉴定 | 第52-55页 |
3. 重组PS_2和CS_6蛋白的抗原性分析 | 第55-56页 |
4. 重组PS_2蛋白诱导的识别SARS-CoV 抗体的检测 | 第56-57页 |
5. 重组PS_2蛋白诱生小鼠抗体的型别分析 | 第57-58页 |
6. 重组PS_2蛋白免疫小鼠脾细胞培养上清中抗体的检测 | 第58-59页 |
7. 重组PS_2蛋白免疫小鼠血清中细胞因子的检测 | 第59页 |
8. 重组PS_2蛋白对小鼠脾细胞及B 细胞特异性增殖的诱导作用 | 第59-60页 |
9. 重组PS_2蛋白对人PBMC 增殖及B 细胞活化的诱导作用 | 第60-63页 |
图和照片 | 第63-82页 |
讨论 | 第82-94页 |
结论 | 第94-95页 |
参考文献 | 第95-105页 |
攻读博士学位期间已或待发表的文章 | 第105-106页 |
创新性声明 | 第106-107页 |
中文摘要 | 第107-115页 |
ABSTRACT | 第115页 |
致谢 | 第125页 |