摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 前言 | 第10-14页 |
1.1 猪圆环病毒病原学及其相关疾病的简介 | 第10-11页 |
1.2 目前对于猪圆环病毒病的防治措施 | 第11-12页 |
1.3 利用RNAi技术和转基因技术培育抗圆环病毒猪新品种的研究进展 | 第12-14页 |
1.4 研究的目的及意义 | 第14页 |
2 材料与方法 | 第14-23页 |
2.1 实验材料 | 第14页 |
2.1.1 实验动物和PCV2毒株 | 第14页 |
2.2 实验方法 | 第14-23页 |
2.2.1 利用荧光灯观察EGFP蛋白在抗PCV2转基因猪中的表达情况 | 第15页 |
2.2.2 利用PCR方法检测目的基因在转基因猪中的整合 | 第15-16页 |
2.2.3 利用茎环引物法检测不同转基因猪肾脏小RNA转录表达情况 | 第16-23页 |
2.2.4 数据分析 | 第23页 |
3 结果与分析 | 第23-37页 |
3.1 F2代转基因猪绿色荧光蛋白基因的表达检测 | 第23-24页 |
3.2 F2代转基因猪PCR鉴定 | 第24-25页 |
3.3 F2代转基因猪肾组织抗PCV2 siRNA表达检测 | 第25-26页 |
3.4 F2代转基因猪与对照猪抗PCV2感染能力比较 | 第26-37页 |
3.4.1 攻毒前PCV2病毒滴度测定 | 第26-27页 |
3.4.2 攻毒前血清抗原和抗体水平检测 | 第27-28页 |
3.4.3 攻毒后血液PCV2病毒拷贝数变化 | 第28-31页 |
3.4.4 攻毒后血液生化指标的变化 | 第31-33页 |
3.4.5 攻毒后体重变化 | 第33-35页 |
3.4.6 攻毒后血清中PCV2抗体水平的变化 | 第35-36页 |
3.4.7 攻毒结束后组织免疫组化学分析 | 第36-37页 |
4 讨论与结论 | 第37-43页 |
4.1 RNAi技术在抗病毒育种上的应用 | 第37-39页 |
4.2 转基因动物的检测 | 第39-40页 |
4.3 PCV2活体攻毒实验存在的难点和解决途径 | 第40-41页 |
4.4 本研究中转基因猪抗PCV2效果的探讨 | 第41页 |
4.5 结论 | 第41-43页 |
致谢 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-48页 |
附录A | 第48-50页 |
附录B | 第50-51页 |