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转Bt基因水稻Cry1Ab杀虫蛋白的环境动态及其对非靶标昆虫的影响

致谢第5-6页
中文摘要第6-15页
第一部分 文献综述第15-43页
    第一章 转Bt基因植物及其外源ICPs表达的时空特性以及抗虫性第16-24页
        1 转Bt基因植物的研究第16-21页
            1.1 Bt杀虫晶体蛋白及其基因分类第16-17页
            1.2 ICPs的作用机理第17-18页
            1.3 转Bt基因植物的研究第18-21页
                1.3.1 转Bt基因植物的培育第18-21页
                1.3.2 转Bt基因植物的商业化应用第21页
        2 转Bt基因植物外源ICPs表达的时空特性以及抗虫性第21-24页
            2.1 外源基因表达产物ICPs的检测第21页
            2.2 转Bt基因植物ICPs表达的时空特性以及抗虫性第21-23页
                2.2.1 转Bt基因棉花第21-22页
                2.2.2 转Bt基因玉米第22页
                2.2.3 转Bt基因水稻第22-23页
            2.3 影响转Bt基因植物ICPs时空表达的因素第23-24页
                2.3.1 植物内部发育的调控第23页
                2.3.2 环境因素的影响第23-24页
    第二章 转Bt基因作物外源ICPs的环境动态及其生态学效应第24-36页
        1 转Bt基因作物外源ICPs在土壤中的环境动态及其科学意义第24页
        2 转Bt基因作物外源ICPs进入土壤中的途径第24-25页
        3 转Bt基因作物外源ICPs在土壤中的持留和降解第25-30页
            3.1 土壤中ICPs的检测方法第25-26页
                3.1.1 Western印迹法第25-26页
                3.1.2 斑点印迹酶联免疫吸附法(dot-blot ELISA)第26页
                3.1.3 流式细胞仪法(Flow cytometer,FCM)第26页
                3.1.4 免疫法第26页
                3.1.5 生物测定法第26页
            3.2 ICPs在土壤中的持留第26-28页
                3.2.1 持留时间第26-27页
                3.2.2 持留机理第27-28页
            3.3 ICPs在土壤中的降解第28-30页
                3.3.1 影响ICPs降解的因素第29页
                3.3.2 ICPs在土壤中降解的规律第29-30页
        4 结合态ICPs在土壤中的杀虫活性及机理第30-31页
            4.1 杀虫活性第30页
            4.2 杀虫机理第30-31页
        5 土壤中结合态ICPs对土壤生物的影响第31-36页
            5.1 表征土壤质量的生物指标第31-33页
                5.1.1 土壤质量的概念第31页
                5.1.2 土壤生物指标第31-32页
                5.1.3 土壤质量评价中无脊椎动物的生理学标志物第32-33页
            5.2 对土壤生物的影响第33-36页
                5.2.1 对土壤微生物的影响第34页
                5.2.2 对土壤动物的影响第34-36页
    第三章 转Bt基因作物对天敌昆虫的影响第36-43页
        1 转Bt基因作物商品化生产潜在的生态风险性第36页
        2 转Bt基因作物ICPs作用于天敌昆虫的途径第36页
        3 转Bt基因作物ICPs对天敌昆虫的作用方式第36-37页
            3.1 直接作用第37页
            3.2 间接作用第37页
        4 转Bt基因作物对天敌昆虫个体生物学特性的影响第37-40页
            4.1 实验室层次的研究第38-39页
            4.2 半大田受控条件下的研究第39-40页
            4.3 大田环境下的研究第40页
        5 转Bt基因作物对天敌昆虫种群动态的影响第40-41页
        6 转Bt基因作物对天敌昆虫群落的影响第41-43页
第二部分 基本材料与方法第43-49页
    第四章 基本材料与方法第44-49页
        1 材料第44页
            1.1 供试水稻品种第44页
            1.2 供试水稻土壤第44页
            1.3 供试昆虫第44页
        2 方法第44-49页
            2.1 土壤理化性质的测定第44-45页
            2.2 小区设计与栽培管理第45页
            2.3 弹尾虫取样方法和鉴定第45-47页
                2.3.1 吸虫器法第45-46页
                2.3.2 落袋法第46页
                2.3.3 干漏斗法第46-47页
                2.3.4 鉴定第47页
            2.4 稻田水生昆虫调查第47页
            2.5 Bt杀虫蛋白的测定-ELISA第47页
            2.6 数据统计与分析第47-49页
附录一: 研究的技术路线第49-50页
第三部分 试验研究第50-124页
    第五章 Bt水稻Cry1Ab杀虫蛋白在稻田土壤中的降解动态及其影响因子第51-78页
        1 材料与方法第51-54页
            1.1 供试土壤和水稻材料第52页
            1.2 降解动态实验第52-53页
                1.2.1 KMD2去水粉碎叶中Bt蛋白在水稻土中的降解动态第52页
                1.2.2 淹水对华池B_6叶片中Bt蛋白降解的影响第52-53页
                1.2.3 淹水对KMD1茎叶中Bt蛋白降解的影响第53页
            1.3 影响土壤中KMD2粉碎叶中Bt蛋白降解的因素分析第53-54页
                1.3.1 实验材料的准备第53页
                1.3.2 土壤微生物第53-54页
                1.3.3 土壤含水量第54页
                1.3.4 土壤pH第54页
                1.3.5 温度第54页
            1.4 Bt杀虫蛋白的测定-ELISA分析第54页
            1.5 数据统计与分析第54页
        2 结果与分析第54-74页
            2.1 去水KMD2粉碎叶中Bt蛋白降解动态第54-56页
            2.2 淹水对华池B_6叶片中Bt蛋白降解的影响第56-59页
            2.3 淹水对KMD1茎叶中Bt蛋白在水稻土中降解的影响第59-64页
            2.4 影响土壤对KMD2粉碎稻叶中Bt蛋白降解的因素第64-74页
                2.4.1 土壤微生物第64-66页
                2.4.2 土壤含水量第66-69页
                2.4.3 土壤pH第69页
                2.4.4 温度第69-74页
        3 结论与讨论第74-78页
            3.1 不同土壤类型对Bt稻茎叶中Bt蛋白降解的影响第75页
            3.2 淹水对Bt稻茎叶中Bt蛋白降解的影响第75-76页
            3.3 影响土壤中Bt稻粉碎叶中Bt蛋白降解的因素第76-78页
    第六章 Bt水稻组织中Cry1Ab杀虫蛋白表达及其在田间降解的时空动态第78-84页
        1 材料与方法第78-80页
            1.1 供试水稻材料第78-79页
            1.2 Bt稻主要组织中Cry1Ab蛋白表达的时空动态第79页
            1.3 收割后Bt稻组织残体与根系中Cry1Ab蛋白的降解及其在土壤中的残留第79页
            1.4 Bt稻根系分泌物中Cry1Ab蛋白的测定第79页
            1.5 Bt杀虫蛋白的测定-ELISA分析第79-80页
        2 结果与分析第80-82页
            2.1 Bt稻主要组织中Cry1Ab蛋白表达的时空动态第80页
            2.2 收割后Bt稻茎叶残体与根系中Cry1Ab蛋白的降解及其在土壤中的残留动态第80页
            2.3 Bt稻根系中Cry1Ab蛋白的分泌第80-82页
        3 结论与讨论第82-84页
    第七章 Bt水稻Cry1Ab杀虫蛋白在水体中的残留及其对水生昆虫的影响第84-88页
        1 材料与方法第84-85页
            1.1 供试水稻材料第84页
            1.2 Bt稻Cry1Ab杀虫蛋白在水体中的残留第84-85页
            1.3 Bt稻田水生昆虫调查第85页
            1.4 Bt杀虫蛋白测定-ELISA第85页
        2 结果与分析第85-86页
            2.1 Bt稻茎叶组织残体中CryAb杀虫蛋白在水体中的残留第85-86页
            2.2 Bt稻对稻田水生昆虫的影响第86页
        3 结论与讨论第86-88页
    第八章 Bt水稻对龟纹瓢虫取食适合度的影响第88-98页
        1 材料与方法第88-91页
            1.1 供试水稻材料第88-89页
            1.2 供试昆虫第89页
                1.2.1 桃蚜第89页
                1.2.2 龟纹瓢虫第89页
                1.2.3 稻飞虱第89页
            1.3 稻飞虱体内Cry1Ab杀虫蛋白的测定第89页
            1.4 试验方法第89-91页
                1.4.1 Bt稻对龟纹瓢虫的直接作用第89-90页
                1.4.2 Bt稻对龟纹瓢虫间接作用第90-91页
            1.5 数据统计分析第91页
        2 结果与分析第91-96页
            2.1 稻飞虱体内Cry1Ab杀虫蛋白的含量第91-92页
            2.2 Bt稻花粉对龟纹瓢虫幼期适合度的影响第92-93页
            2.3 Bt稻花粉对龟纹瓢虫成虫期适合度的影响第93-94页
            2.4 稻飞虱对龟纹瓢虫幼期适合度的影响第94-95页
            2.5 稻飞虱对龟纹瓢虫成虫期适合度的影响第95-96页
        3 结论与讨论第96-98页
    第九章 Bt水稻花粉对中华通草蛉产卵和成虫寿命的影响第98-104页
        1 材料和方法第98-100页
            1.1 供试虫源第98-99页
            1.2 草蛉人工饲料的配制第99页
            1.3 供试水稻花粉及其啤酒酵母花粉干粉饲料的配制第99页
            1.4 中华草蛉产卵前期取食Bt水稻花粉对其产卵和寿命的影响第99-100页
            1.5 食料中不同花粉比例对中华草蛉产卵和寿命的影响第100页
            1.6 数据统计分析第100页
        2 结果与分析第100-102页
            2.1 产卵前期以Bt水稻花粉饲料饲喂对产卵和寿命的影响第100页
            2.2 食料中花粉比例对草蛉产卵和寿命的影响第100-102页
        3 结论与讨论第102-104页
    第十章 Bt水稻对弹尾虫的影响第104-117页
        1 材料与方法第105-107页
            1.1 试验地点第105页
            1.2 供试水稻第105页
            1.3 Bt稻田弹尾虫种类与数量的调查第105页
                1.3.1 吸虫器法第105页
                1.3.2 网袋法第105页
                1.3.3 干漏斗法第105页
                1.3.4 弹尾虫种类鉴定第105页
            1.4 稻茎叶组织残体质量损失(Biomass loss)第105页
            1.5 弹尾虫虫体Bt杀虫蛋白含量的测定-ELISA分析第105-106页
                1.5.1 样品准备第106页
                1.5.2 测定方法第106页
            1.6 弹尾虫酯酶同工酶-PAGE电泳分析第106页
                1.6.1 供试昆虫及样品处理第106页
                1.6.2 电泳方法与条件第106页
                1.6.3 染色第106页
            1.7 弹尾虫酯酶酶活性测定第106-107页
                1.7.1 供试昆虫及准备第106页
                1.7.2 酯酶酶活测定方法第106-107页
                1.7.3 酯酶动力学分析第107页
                1.7.4 酶源蛋白含量测定第107页
            1.8 数据统计与分析第107页
        2 结果与分析第107-115页
            2.1 Bt稻田弹尾虫的发生种类和数量第107页
            2.2 弹尾虫体内/体表Bt杀虫蛋白的测定第107-109页
            2.3 Bt水稻植株茎叶组织残体的质量分解速率与Cry1Ab残留量第109-110页
            2.4 Bt稻田不同时期弹尾虫优势种种群密度的比较第110-112页
            2.5 弹尾虫酯酶同工酶分析第112页
            2.6 弹尾虫酯酶酶活性分析第112-115页
        3 结论与讨论第115-117页
    第十一章 Bt水稻对尖钩宽黾蝽捕食作用的间接影响第117-124页
        1 材料与方法第118-119页
            1.1 供试水稻第118页
            1.2 供试弹尾虫及其准备第118页
            1.3 供试尖钩宽黾蝽第118页
            1.4 捕食量及功能反应的测定第118页
            1.5 统计方法第118-119页
            1.6 试验条件第119页
        2 结果与分析第119-123页
            2.1 尖钩宽黾蝽的捕食量第119页
            2.2 尖钩宽黾蝽的捕食功能反应第119-123页
        3 结论与讨论第123-124页
第四部分 总讨论第124-129页
    总讨论第125-127页
    今后的研究方向第127-128页
    本论文的创新之处第128-129页
附录二: 稻田几个跳虫种的鉴定特征第129-130页
附录三: 稻田几个跳虫种的图谱第130-131页
参考文献第131-148页
英文摘要第148页
附录四: 博士期间发表的论文第152页

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