| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 中英文对照表 | 第6-14页 |
| 第一部分 RYBP在乳腺癌中的表达及临床意义 | 第14-39页 |
| 1. 研究背景 | 第14-21页 |
| 1.1 乳腺癌简介 | 第14-18页 |
| 1.2 RYBP简介 | 第18-21页 |
| 2. 实验材料 | 第21-23页 |
| 2.1 乳腺癌细胞株与组织芯片 | 第21页 |
| 2.2 主要试剂及耗材 | 第21-22页 |
| 2.3 主要仪器 | 第22-23页 |
| 3.实验方法 | 第23-32页 |
| 3.1 H&E染色 | 第23页 |
| 3.2 IHC | 第23-24页 |
| 3.3 细胞培养 | 第24-26页 |
| 3.4 RNA提取及浓度测定 | 第26-27页 |
| 3.5 RT-PCR | 第27-28页 |
| 3.6 Real-time PCR | 第28-29页 |
| 3.7 蛋白提取及浓度测定 | 第29页 |
| 3.8 Western Bloting | 第29-30页 |
| 3.9 病例临床资料数据统计 | 第30-31页 |
| 3.10 图像及统计学分析 | 第31-32页 |
| 4.实验结果 | 第32-38页 |
| 4.1 病例资料概况 | 第32页 |
| 4.2 H&E与IHC染色结果 | 第32-35页 |
| 4.3 相关性分析 | 第35-37页 |
| 4.4 乳腺（癌）细胞株RYBP表达 | 第37-38页 |
| 5. 小结 | 第38-39页 |
| 第二部分 RYBP相关乳腺（癌）慢病毒稳转细胞系构建及鉴定 | 第39-63页 |
| 1. 研究背景 | 第39-43页 |
| 2. 实验材料 | 第43-45页 |
| 2.1 质粒及细胞 | 第43页 |
| 2.2 主要试剂及耗材 | 第43-44页 |
| 2.3 主要仪器 | 第44-45页 |
| 3.实验方法 | 第45-54页 |
| 3.1 pLVTHM-sh-RYBP重组质粒构建 | 第45-48页 |
| 3.2 pWPXLD-RYBP（人源）重组质粒构建 | 第48-49页 |
| 3.3 质粒大量提取 | 第49-50页 |
| 3.4 慢病毒制备 | 第50-52页 |
| 3.5 慢病毒感染 | 第52页 |
| 3.6 稳转细胞系筛选 | 第52-53页 |
| 3.7 稳转细胞系鉴定 | 第53页 |
| 3.8 琼脂糖凝胶电泳 | 第53-54页 |
| 4. 实验结果 | 第54-62页 |
| 4.1 pLVTHM-sh-RYBP构建 | 第54页 |
| 4.2 pWPXLD-RYBP构建 | 第54-58页 |
| 4.3 慢病毒制备 | 第58-59页 |
| 4.4 稳转细胞系构建 | 第59-62页 |
| 5. 小结 | 第62-63页 |
| 第三部分 RYBP在乳腺癌恶性表型中的调控研究 | 第63-91页 |
| 1. 研究背景 | 第63-67页 |
| 1.1 RYBP与肿瘤增殖 | 第63-64页 |
| 1.2 RYBP与肿瘤转移 | 第64页 |
| 1.3 RYBP与肿瘤药物敏感性 | 第64-65页 |
| 1.4 乳腺肿瘤干细胞简介 | 第65-67页 |
| 2. 实验材料 | 第67-69页 |
| 2.1 实验动物 | 第67页 |
| 2.2 主要试剂及耗材 | 第67-68页 |
| 2.3 主要仪器 | 第68-69页 |
| 3. 实验方法 | 第69-75页 |
| 3.1 MTT | 第69页 |
| 3.2 实时无标记细胞动态分析 | 第69页 |
| 3.3 集落形成 | 第69-70页 |
| 3.4 软琼脂克隆形成 | 第70页 |
| 3.5 流式细胞术 | 第70-72页 |
| 3.6 划痕实验 | 第72页 |
| 3.7 明胶酶谱 | 第72页 |
| 3.8 Transwell侵袭实验 | 第72-73页 |
| 3.9 免疫荧光 | 第73页 |
| 3.10 体内实验 | 第73-75页 |
| 4. 实验结果 | 第75-90页 |
| 4.1 RYBP与乳腺（癌）细胞增殖 | 第75-79页 |
| 4.2 RYBP与乳腺（癌）细胞转移 | 第79-84页 |
| 4.3 RYBP与乳腺癌细胞化疗敏感性 | 第84-87页 |
| 4.4 RYBP与乳腺癌干细胞特性 | 第87-88页 |
| 4.5 RYBP与乳腺肿瘤增殖及转移 | 第88-90页 |
| 5. 小结 | 第90-91页 |
| 第四部分 RYBP干预下的乳腺癌细胞miRNA调控网络构建及miR-206 调控机制研究 | 第91-120页 |
| 1. 研究背景 | 第91-97页 |
| 1.1 芯片技术简介 | 第91-92页 |
| 1.2 miRNA简介 | 第92-93页 |
| 1.3 miRNA靶基因预测 | 第93-95页 |
| 1.4 miR-206 与肿瘤 | 第95-96页 |
| 1.5 RYBP与miRNA | 第96-97页 |
| 2. 实验材料 | 第97-98页 |
| 2.1 miRNA芯片 | 第97页 |
| 2.2 主要试剂 | 第97页 |
| 2.3 主要仪器 | 第97-98页 |
| 3. 实验方法 | 第98-100页 |
| 3.1 RNA提取 | 第98页 |
| 3.2 miRNA芯片数据差异性表达分析 | 第98-99页 |
| 3.3 miRNA靶基因分析及调控网络构建 | 第99-100页 |
| 4. 实验结果 | 第100-119页 |
| 4.1 RNA质控结果 | 第100页 |
| 4.2 miRNA芯片差异表达结果 | 第100-105页 |
| 4.3 miRNA靶基因预测及调控网络预测 | 第105-114页 |
| 4.4 RYBP~miR-206 在乳腺（癌）细胞中的调控研究 | 第114-119页 |
| 5. 小结 | 第119-120页 |
| 讨论 | 第120-122页 |
| 结论 | 第122-123页 |
| 附表 | 第123-127页 |
| 参考文献 | 第127-138页 |
| 作者简介 | 第138-139页 |
| 致谢 | 第139页 |
