| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 引言 | 第11-15页 |
| 1 细胞周期依赖性蛋白激酶2(CDK2)与疾病 | 第11页 |
| 2 常用的蛋白表达系统 | 第11-15页 |
| 第一部分 pET32a-CDK2重组质粒的构建与表达 | 第15-38页 |
| 1 材料与方法 | 第15-24页 |
| ·主要试剂及配制 | 第15-16页 |
| ·主要仪器设备 | 第16页 |
| ·菌株、质粒 | 第16页 |
| ·实验方法 | 第16-24页 |
| 2 结果 | 第24-36页 |
| ·Trizol法提取白细胞中总RNA | 第24页 |
| ·目的基因PCR扩增结果 | 第24页 |
| ·pET32a-CDK2重组质粒转化DH5α后菌落PCR鉴定 | 第24-25页 |
| ·PCR阳性DH5α菌株序列分析鉴定 | 第25-28页 |
| ·含重组质粒pET32a-CDK2的BL21(DE3)转化菌株的筛选 | 第28-29页 |
| ·PCR阳性BL21(DE3)菌株序列分析鉴定 | 第29-32页 |
| ·BL21(DE3)菌株进行IPTG诱导表达后SDS-PAGE检测 | 第32-33页 |
| ·诱导产物SDS-PAGE图灰度分析 | 第33-35页 |
| ·Western-Blot检测诱导产物 | 第35-36页 |
| 3 讨论 | 第36-38页 |
| 第二部分 pPICZαA-CDK2重组质粒的构建与表达 | 第38-52页 |
| 1 材料与方法 | 第38-42页 |
| ·主要试剂及配制 | 第38-39页 |
| ·主要仪器设备 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-42页 |
| 2 结果 | 第42-50页 |
| ·pPICZαA-CDK2重组质粒转化DH5α后菌落PCR鉴定 | 第42页 |
| ·PCR阳性DH5α菌株序列分析鉴定 | 第42-47页 |
| ·含重组质粒pPICZαA-CDK2的GS115转化菌株的筛选 | 第47-48页 |
| ·蛋白表达较高菌株的选择和最佳诱导时间的确定 | 第48-49页 |
| ·表达蛋白的分子量检测 | 第49-50页 |
| 3 讨论 | 第50-52页 |
| 结语 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 研究生在校期间发表论文及参与课题 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
