| 附件 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-23页 |
| 1.1 吡虫啉等新烟碱类杀虫剂的研究概况 | 第14-15页 |
| 1.1.1 吡虫啉等新烟碱类杀虫剂的选择性作用机理 | 第14-15页 |
| 1.2 棉蚜抗药性研究现状 | 第15-17页 |
| 1.2.1 棉蚜对吡虫啉等新烟碱类杀虫剂抗药性现状 | 第15-16页 |
| 1.2.2 寄主植物对棉蚜抗药性的影响 | 第16-17页 |
| 1.3 棉蚜对杀虫剂产生抗性的机制 | 第17-20页 |
| 1.4 烟碱型乙酰胆碱受体基因突变分子检测技术 | 第20-22页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第22-23页 |
| 第二章 吡虫啉对棉蚜毒力测定 | 第23-25页 |
| 2.1 实验材料 | 第23页 |
| 2.1.1 药剂和试剂 | 第23页 |
| 2.1.2 供试虫源 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23页 |
| 2.3 结果与分析 | 第23-24页 |
| 2.4 讨论 | 第24-25页 |
| 第三章 棉蚜烟碱型乙酰胆碱受体beta1亚基基因克隆 | 第25-32页 |
| 3.1 实验材料 | 第25页 |
| 3.1.1 供试虫源 | 第25页 |
| 3.1.2 主要试剂和仪器 | 第25页 |
| 3.1.3 试剂配制 | 第25页 |
| 3.2 实验方法 | 第25-29页 |
| 3.2.1 总RNA提取 | 第25-26页 |
| 3.2.2 RNA纯度及浓度检测 | 第26页 |
| 3.2.3 c DNA第一链的合成 | 第26-27页 |
| 3.2.4 引物设计 | 第27页 |
| 3.2.5 烟碱型乙酰胆碱受体(n ACh R)beta1亚基基因PCR扩增 | 第27-28页 |
| 3.2.6 PCR产物的纯化 | 第28页 |
| 3.2.7 载体连接 | 第28-29页 |
| 3.2.8 转化反应和扩大培养 | 第29页 |
| 3.2.9 菌落PCR鉴定及序列分析 | 第29页 |
| 3.3 结果与分析 | 第29-31页 |
| 3.3.1 总RNA的提取 | 第29-30页 |
| 3.3.2 棉蚜n ACh R beta1亚基基因克隆及序列分析 | 第30-31页 |
| 3.4 讨论 | 第31-32页 |
| 第四章 竞争性等位特异性PCR技术研究 | 第32-36页 |
| 4.1 实验材料 | 第32页 |
| 4.1.1 供试虫源 | 第32页 |
| 4.1.2 主要试剂和仪器 | 第32页 |
| 4.2 实验方法 | 第32-33页 |
| 4.2.1 单头棉蚜RNA提取 | 第32页 |
| 4.2.2 RNA纯度及浓度检测 | 第32页 |
| 4.2.3 cDNA第一链的合成 | 第32页 |
| 4.2.4 引物设计 | 第32-33页 |
| 4.2.5 cPASA技术建立及检测 | 第33页 |
| 4.2.6 cPASA技术检测棉蚜种群基因突变频率 | 第33页 |
| 4.3 结果与分析 | 第33-35页 |
| 4.3.1 c PASA技术检测棉蚜基因型 | 第33-34页 |
| 4.3.2 c PASA技术检测棉蚜田间种群等位基因突变频率 | 第34-35页 |
| 4.4 讨论 | 第35-36页 |
| 第五章 实时荧光定量等位特异性PCR技术研究 | 第36-45页 |
| 5.1 实验材料 | 第36页 |
| 5.1.1 供试虫源 | 第36页 |
| 5.1.2 主要试剂和仪器 | 第36页 |
| 5.2 实验方法 | 第36-39页 |
| 5.2.1 棉蚜RNA提取 | 第36页 |
| 5.2.2 RNA纯度及浓度检测 | 第36页 |
| 5.2.3 c DNA第一链的合成 | 第36-37页 |
| 5.2.4 引物设计 | 第37页 |
| 5.2.5 PCR扩增 | 第37页 |
| 5.2.6 PCR产物的纯化 | 第37页 |
| 5.2.7 rtPASA标准曲线建立 | 第37-39页 |
| 5.2.8 rtPASA检测棉蚜种群突变频率 | 第39页 |
| 5.3 结果与分析 | 第39-44页 |
| 5.3.1 PASA检测单头棉蚜基因型 | 第39-40页 |
| 5.3.2 荧光定量PCR扩增效率及熔解峰图 | 第40-42页 |
| 5.3.3 rtPASA检测技术的标准曲线 | 第42-43页 |
| 5.3.4 rtPASA技术检测棉蚜田间种群等位基因突变频率 | 第43-44页 |
| 5.4 讨论 | 第44-45页 |
| 第六章 结论与展望 | 第45-46页 |
| 6.1 全文结论 | 第45页 |
| 6.2 创新之处 | 第45页 |
| 6.3 展望 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 作者简介 | 第53页 |
