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羊泰勒虫核苷酸合成代谢途径初步分析及OPRT蛋白的免疫保护试验

摘要第6-7页
Abstract第7页
英文缩略表第12-13页
第一章 引言第13-19页
    1.1 羊泰勒虫病第13-15页
        1.1.1 泰勒虫的生活史及病原特征第13-14页
        1.1.2 临床及病理变化第14页
        1.1.3 流行特点第14页
        1.1.4 预防和治疗第14-15页
    1.2 羊泰勒虫诊断方法的研究进展第15-16页
        1.2.1 血涂片染色镜检第15页
        1.2.2 聚合酶链式反应(PCR)第15页
        1.2.3 环介导等温扩增(LAMP)第15页
        1.2.4 反向线性印记(RLB)第15页
        1.2.5 酶联免疫吸附试验(ELISA)第15-16页
    1.3 蛋白组学及其在寄生虫研究中的应用第16-17页
    1.4 泰勒虫病疫苗的研究现状第17-19页
        1.4.1 弱毒疫苗第17页
        1.4.2 重组亚单位疫苗第17页
        1.4.3 载体疫苗第17-19页
第二章 吕氏泰勒虫与尤氏泰勒虫核苷酸合成代谢途径分析第19-24页
    2.1 材料第19页
        2.1.1 COG注释第19页
    2.2 方法第19页
        2.2.1 COG注释第19页
    2.3 结果第19-23页
        2.3.1 吕氏泰勒虫与尤氏泰勒虫核苷酸合成相关蛋白的分析第19-22页
        2.3.2 吕氏泰勒虫和尤氏泰勒虫核苷酸合成相关蛋白的定量分析第22-23页
    2.4 讨论第23-24页
第三章 尤氏泰勒虫OPRT基因的优化表达第24-35页
    3.1 材料第24页
        3.1.1 试验仪器第24页
        3.1.2 试验试剂第24页
        3.1.3 菌株、载体、虫体第24页
        3.1.4 实验动物第24页
    3.2 方法第24-30页
        3.2.1 尤氏泰勒虫的增殖第24页
        3.2.2 虫体的纯化第24-25页
        3.2.4 cDNA链的合成第25页
        3.2.5 引物设计第25页
        3.2.6 OPRT基因的扩增第25-26页
        3.2.7 胶回收第26页
        3.2.8 pGEM-T Easy载体的连接第26页
        3.2.9 转化第26页
        3.2.10 pGEM-T-OPRT质粒的提取第26-27页
        3.2.11 重组表达质粒pET-30a-OPRT的构建第27页
        3.2.12 pET-30a-OPRT的原核表达第27页
        3.2.13 pET-30a-OPRT表达蛋白的纯化第27-28页
        3.2.14 Western-blot分析第28-29页
        3.2.15 兔抗OPRT蛋白多抗的制备第29-30页
    3.3 结果第30-34页
        3.3.1 oprt基因的PCR扩增结果第30页
        3.3.2 尤氏泰勒虫oprt的基因序列第30页
        3.3.3 尤氏泰勒虫的氨基酸序列及生物信息学分析第30-31页
        3.3.4 oprt基因抗原表位分析预测第31页
        3.3.5 重组蛋白的表达及表达条件的优化第31-32页
        3.3.6 表达产物的Western-blot分析第32-33页
        3.3.7 表达产物的免疫原性分析第33-34页
    3.4 讨论第34-35页
第四章 ROPRT动物保护性试验第35-42页
    4.1 材料第35-36页
        4.1.1 主要仪器第35页
        4.1.2 主要试剂第35页
        4.1.3 部分试剂的配制第35页
        4.1.4 寄生虫第35-36页
        4.1.5 实验动物第36页
    4.2 方法第36-37页
        4.2.1 免疫方案第36页
        4.2.2 实验羊攻虫血第36页
        4.2.3 临床症状观察第36页
        4.2.4 红细胞计数第36-37页
        4.2.5 血红蛋白测定第37页
        4.2.6 抗体效价的测定第37页
    4.3 结果第37-40页
        4.3.1 临床观察结果第37-38页
        4.3.2 血涂片观察结果第38-39页
        4.3.3 血红蛋白的测定第39-40页
        4.3.4 红细胞计数结果第40页
        4.3.5 抗体效价的测定第40页
    4.4 讨论第40-42页
第五章 羊泰勒虫病患病率流行病学调查研究第42-46页
    5.1 材料第42页
        5.1.1 主要仪器第42页
        5.1.2 主要试剂第42页
    5.2 方法第42-43页
        5.2.1 样品的采集第42页
        5.2.2 样品的ELISA检测第42-43页
        5.2.3 统计学分析第43页
    5.3 结果第43-45页
        5.3.1 21个省的泰勒虫病患病率第43-44页
        5.3.2 47个地区的泰勒虫病血清学阳性率第44页
        5.3.3 统计学分析第44-45页
    5.4 讨论第45-46页
第六章 全文结论第46-47页
参考文献第47-53页
致谢第53-54页
作者简介第54页

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