摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
英文缩略表 | 第12-13页 |
第一章 引言 | 第13-19页 |
1.1 羊泰勒虫病 | 第13-15页 |
1.1.1 泰勒虫的生活史及病原特征 | 第13-14页 |
1.1.2 临床及病理变化 | 第14页 |
1.1.3 流行特点 | 第14页 |
1.1.4 预防和治疗 | 第14-15页 |
1.2 羊泰勒虫诊断方法的研究进展 | 第15-16页 |
1.2.1 血涂片染色镜检 | 第15页 |
1.2.2 聚合酶链式反应(PCR) | 第15页 |
1.2.3 环介导等温扩增(LAMP) | 第15页 |
1.2.4 反向线性印记(RLB) | 第15页 |
1.2.5 酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第15-16页 |
1.3 蛋白组学及其在寄生虫研究中的应用 | 第16-17页 |
1.4 泰勒虫病疫苗的研究现状 | 第17-19页 |
1.4.1 弱毒疫苗 | 第17页 |
1.4.2 重组亚单位疫苗 | 第17页 |
1.4.3 载体疫苗 | 第17-19页 |
第二章 吕氏泰勒虫与尤氏泰勒虫核苷酸合成代谢途径分析 | 第19-24页 |
2.1 材料 | 第19页 |
2.1.1 COG注释 | 第19页 |
2.2 方法 | 第19页 |
2.2.1 COG注释 | 第19页 |
2.3 结果 | 第19-23页 |
2.3.1 吕氏泰勒虫与尤氏泰勒虫核苷酸合成相关蛋白的分析 | 第19-22页 |
2.3.2 吕氏泰勒虫和尤氏泰勒虫核苷酸合成相关蛋白的定量分析 | 第22-23页 |
2.4 讨论 | 第23-24页 |
第三章 尤氏泰勒虫OPRT基因的优化表达 | 第24-35页 |
3.1 材料 | 第24页 |
3.1.1 试验仪器 | 第24页 |
3.1.2 试验试剂 | 第24页 |
3.1.3 菌株、载体、虫体 | 第24页 |
3.1.4 实验动物 | 第24页 |
3.2 方法 | 第24-30页 |
3.2.1 尤氏泰勒虫的增殖 | 第24页 |
3.2.2 虫体的纯化 | 第24-25页 |
3.2.4 cDNA链的合成 | 第25页 |
3.2.5 引物设计 | 第25页 |
3.2.6 OPRT基因的扩增 | 第25-26页 |
3.2.7 胶回收 | 第26页 |
3.2.8 pGEM-T Easy载体的连接 | 第26页 |
3.2.9 转化 | 第26页 |
3.2.10 pGEM-T-OPRT质粒的提取 | 第26-27页 |
3.2.11 重组表达质粒pET-30a-OPRT的构建 | 第27页 |
3.2.12 pET-30a-OPRT的原核表达 | 第27页 |
3.2.13 pET-30a-OPRT表达蛋白的纯化 | 第27-28页 |
3.2.14 Western-blot分析 | 第28-29页 |
3.2.15 兔抗OPRT蛋白多抗的制备 | 第29-30页 |
3.3 结果 | 第30-34页 |
3.3.1 oprt基因的PCR扩增结果 | 第30页 |
3.3.2 尤氏泰勒虫oprt的基因序列 | 第30页 |
3.3.3 尤氏泰勒虫的氨基酸序列及生物信息学分析 | 第30-31页 |
3.3.4 oprt基因抗原表位分析预测 | 第31页 |
3.3.5 重组蛋白的表达及表达条件的优化 | 第31-32页 |
3.3.6 表达产物的Western-blot分析 | 第32-33页 |
3.3.7 表达产物的免疫原性分析 | 第33-34页 |
3.4 讨论 | 第34-35页 |
第四章 ROPRT动物保护性试验 | 第35-42页 |
4.1 材料 | 第35-36页 |
4.1.1 主要仪器 | 第35页 |
4.1.2 主要试剂 | 第35页 |
4.1.3 部分试剂的配制 | 第35页 |
4.1.4 寄生虫 | 第35-36页 |
4.1.5 实验动物 | 第36页 |
4.2 方法 | 第36-37页 |
4.2.1 免疫方案 | 第36页 |
4.2.2 实验羊攻虫血 | 第36页 |
4.2.3 临床症状观察 | 第36页 |
4.2.4 红细胞计数 | 第36-37页 |
4.2.5 血红蛋白测定 | 第37页 |
4.2.6 抗体效价的测定 | 第37页 |
4.3 结果 | 第37-40页 |
4.3.1 临床观察结果 | 第37-38页 |
4.3.2 血涂片观察结果 | 第38-39页 |
4.3.3 血红蛋白的测定 | 第39-40页 |
4.3.4 红细胞计数结果 | 第40页 |
4.3.5 抗体效价的测定 | 第40页 |
4.4 讨论 | 第40-42页 |
第五章 羊泰勒虫病患病率流行病学调查研究 | 第42-46页 |
5.1 材料 | 第42页 |
5.1.1 主要仪器 | 第42页 |
5.1.2 主要试剂 | 第42页 |
5.2 方法 | 第42-43页 |
5.2.1 样品的采集 | 第42页 |
5.2.2 样品的ELISA检测 | 第42-43页 |
5.2.3 统计学分析 | 第43页 |
5.3 结果 | 第43-45页 |
5.3.1 21个省的泰勒虫病患病率 | 第43-44页 |
5.3.2 47个地区的泰勒虫病血清学阳性率 | 第44页 |
5.3.3 统计学分析 | 第44-45页 |
5.4 讨论 | 第45-46页 |
第六章 全文结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
作者简介 | 第54页 |