摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
第一章 绪论 | 第9-19页 |
1.1 转录因子NF-κB的研究现状 | 第9-14页 |
1.1.1 转录因子NF-κB的概况 | 第9页 |
1.1.2 转录因子NF-κB信号通路的激活 | 第9-11页 |
1.1.3 转录因子NF-κB与靶基因 | 第11-12页 |
1.1.4 转录因子NF-κB与疾病的相关研究 | 第12-13页 |
1.1.5 转录因子NF-κB活性的抑制策略 | 第13-14页 |
1.2 miRNA的研究现状 | 第14-17页 |
1.2.1 miRNA的概述 | 第14页 |
1.2.2 miRNA的合成和作用机制 | 第14-15页 |
1.2.3 miRNA的特点和功能 | 第15-16页 |
1.2.4 miRNA的应用 | 第16-17页 |
1.3 本论文的研究目的和内容 | 第17-19页 |
第二章 人NF-κB miRNA的筛选 | 第19-35页 |
2.1 实验材料与仪器 | 第19页 |
2.1.1 实验材料 | 第19页 |
2.1.2 实验仪器 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-28页 |
2.2.1 载体pMD19-T-mCherry的构建 | 第19-21页 |
2.2.2 载体pCMV-mCherry的构建 | 第21-22页 |
2.2.3 载体pMD19-T-amiR的构建 | 第22-23页 |
2.2.4 通用miRNA干扰载体的构建 | 第23-24页 |
2.2.5 靶向RelA基因的miRNA干扰载体的构建 | 第24-25页 |
2.2.6 载体pMD19-T-RelA的构建 | 第25-26页 |
2.2.7 报告载体pCMV-EGFP-RelA的构建 | 第26-27页 |
2.2.8 靶向RelA基因的miRNA干扰载体的干扰效果评价及筛选 | 第27-28页 |
2.3 结果与讨论 | 第28-34页 |
2.3.1 载体pCMV-mCherry的鉴定 | 第28-29页 |
2.3.2 通用miRNA干扰载体的鉴定 | 第29-30页 |
2.3.3 靶向RelA基因的miRNA干扰载体的鉴定 | 第30-31页 |
2.3.4 报告载体pCMV-EGFP-RelA的鉴定 | 第31-32页 |
2.3.5 靶向RelA基因的miRNA干扰载体的干扰效果评价及筛选 | 第32-34页 |
2.4 本章小结 | 第34-35页 |
第三章 NF-κB特异启动子的设计与评价 | 第35-45页 |
3.1 实验材料与仪器 | 第35页 |
3.1.1 实验材料 | 第35页 |
3.1.2 实验仪器 | 第35页 |
3.2 实验方法 | 第35-38页 |
3.2.1 NF-κB特异调控元件的设计与载体构建 | 第35-36页 |
3.2.2 载体pMD19-T-EGFP的构建 | 第36-37页 |
3.2.3 NF-κB特异启动子载体的构建 | 第37-38页 |
3.2.4 NF-κB特异启动子的活性和特异性评价 | 第38页 |
3.3 结果与讨论 | 第38-42页 |
3.3.1 载体pGL4.10-DMP的鉴定 | 第38-39页 |
3.3.2 NF-κB特异启动子载体的鉴定 | 第39-40页 |
3.3.3 NF-κB特异启动子的活性和特异性评价 | 第40-42页 |
3.4 本章小结 | 第42-45页 |
第四章 NF-κB活性自控型分子的构建与评价 | 第45-53页 |
4.1 实验材料与仪器 | 第45页 |
4.1.1 实验材料 | 第45页 |
4.1.2 实验仪器 | 第45页 |
4.2 实验方法 | 第45-47页 |
4.2.1 载体pMD19-T-DMP的构建 | 第45-46页 |
4.2.2 NF-κB活性自控型分子的构建 | 第46-47页 |
4.2.3 NF-κB活性自控型分子的干扰效果评价 | 第47页 |
4.3 结果与讨论 | 第47-50页 |
4.3.1 NF-κB活性自控型分子的鉴定 | 第47-48页 |
4.3.2 NF-κB活性自控型分子的干扰效果评价 | 第48-50页 |
4.4 本章小结 | 第50-53页 |
第五章 NF-κB活性自控型分子对NF-κB及其靶基因表达的调控和细胞活性的影响 | 第53-61页 |
5.1 实验材料与仪器 | 第53页 |
5.1.1 实验材料 | 第53页 |
5.1.2 实验仪器 | 第53页 |
5.2 实验方法 | 第53-55页 |
5.2.1 NF-κB活性自控型分子对NF-κB及其靶基因表达的调控 | 第53-55页 |
5.2.2 NF-κB活性自控型分子对细胞活性的影响 | 第55页 |
5.3 结果与讨论 | 第55-60页 |
5.3.1 细胞总RNA提取及质量检测 | 第55-56页 |
5.3.2 NF-κB活性自控型分子对NF-κB及其靶基因表达的调控 | 第56-58页 |
5.3.3 NF-κB活性自控型分子对细胞活性的影响 | 第58-60页 |
5.4 本章小结 | 第60-61页 |
第六章 总结与展望 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
作者简介 | 第69-71页 |
致谢 | 第71页 |