| 中文摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 第一章 引言 | 第15-18页 |
| 1.1 立题背景和意义 | 第15-16页 |
| 1.2 本课题的研究思路、技术流程图、研究内容及创新点 | 第16-18页 |
| 1.2.1 本课题研究思路、技术流程图和研究内容 | 第16-17页 |
| 1.2.2 本课题的主要创新点 | 第17-18页 |
| 第二章 文献综述 | 第18-35页 |
| 2.1 远志研究概况 | 第18-22页 |
| 2.1.1 远志本草学研究 | 第18-19页 |
| 2.1.2 远志化学成分研究 | 第19-21页 |
| 2.1.3 远志药理活性研究 | 第21-22页 |
| 2.2 三萜皂苷的生物合成途径及相关酶基因的研究进展 | 第22-25页 |
| 2.2.1 IPP和DMAPP合成途径 | 第23-24页 |
| 2.2.2 2,3-氧化鲨烯生物合成途径 | 第24页 |
| 2.2.3 三萜皂苷环化和修饰 | 第24-25页 |
| 2.3 基于高通量测序转录组学技术研究 | 第25-28页 |
| 2.3.1 高通量测序技术产生及发展 | 第25-26页 |
| 2.3.2 基于高通量测序的转录组研究 | 第26-28页 |
| 2.4 qRT-PCR技术及在基因表达分析中的应用 | 第28-32页 |
| 2.4.1 实时荧光定量PCR原理 | 第29-30页 |
| 2.4.2 实时荧光定量PCR的应用 | 第30-32页 |
| 2.5 植物代谢组学研究应用 | 第32-34页 |
| 2.5.1 植物体内代谢产物变化的监测 | 第32-33页 |
| 2.5.2 “突变型”植物代谢产物研究 | 第33页 |
| 2.5.3 代谢组学在功能基因研究中的应用 | 第33页 |
| 2.5.4 代谢组学与其他“组学”技术的结合 | 第33-34页 |
| 2.6 结语 | 第34-35页 |
| 第三章 基于高通量测序技术的远志转录组研究 | 第35-47页 |
| 3.1 引言 | 第35页 |
| 3.2 实验材料 | 第35-37页 |
| 3.2.1 植物样品 | 第35-36页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第36页 |
| 3.2.3 实验试剂 | 第36-37页 |
| 3.3 实验方法 | 第37-40页 |
| 3.3.1 总RNA的提取 | 第37页 |
| 3.3.2 总RNA的QC检验 | 第37-38页 |
| 3.3.3 mRNA纯化和片段化 | 第38页 |
| 3.3.4 1st Strand cDNA合成和2nd Strand cDNA合成 | 第38页 |
| 3.3.5 末端修复,3'端加A和连接接头 | 第38-39页 |
| 3.3.6 接头产物富集和PCR产物切胶纯化 | 第39-40页 |
| 3.3.7 混合文库上机测序 | 第40页 |
| 3.3.8 测序数据分析流程 | 第40页 |
| 3.4 实验结果与分析 | 第40-45页 |
| 3.4.1 总RNA质检结果 | 第40-41页 |
| 3.4.2 测序数据统计和组装统计 | 第41-42页 |
| 3.4.3 基因功能注释 | 第42-43页 |
| 3.4.4 COG功能分类注释 | 第43-44页 |
| 3.4.5 KEGG功能注释 | 第44-45页 |
| 3.4.6 GO注释分析 | 第45页 |
| 3.4.7 远志三萜皂苷合成途径分析 | 第45页 |
| 3.5 小结与讨论 | 第45-47页 |
| 3.5.1 远志转录组测序与功能注释 | 第45-46页 |
| 3.5.2 远志皂苷合成相关基因的发掘与分析 | 第46-47页 |
| 第四章 不同部位、产地和年限远志的UPLC指纹图谱研究 | 第47-53页 |
| 4.1 引言 | 第47页 |
| 4.2 实验方法 | 第47-48页 |
| 4.2.1 植物样品 | 第47-48页 |
| 4.2.2 实验仪器及试剂 | 第48页 |
| 4.3 实验方法 | 第48-49页 |
| 4.3.1 UPLC样品制备 | 第48页 |
| 4.3.2 UPLC色谱条件 | 第48页 |
| 4.3.3 精密度、稳定性和重现性试验 | 第48-49页 |
| 4.3.4 数据分析 | 第49页 |
| 4.4 实验结果 | 第49-51页 |
| 4.4.1 UPLC色谱图分析 | 第49-50页 |
| 4.4.2 相似度评价 | 第50-51页 |
| 4.4.3 远志不同部位差异成分分析 | 第51页 |
| 4.5 小结与讨论 | 第51-53页 |
| 第五章 基于UPLC/Q-TOF MS代谢组学技术的远志不同部位分析 | 第53-63页 |
| 5.1 引言 | 第53-54页 |
| 5.2 实验材料 | 第54页 |
| 5.2.1 植物样本 | 第54页 |
| 5.2.2 实验仪器及试剂 | 第54页 |
| 5.3 实验方法 | 第54-55页 |
| 5.3.1 样品制备 | 第54页 |
| 5.3.2 UPLC/Q-TOF MS条件 | 第54-55页 |
| 5.3.3 实验数据处理 | 第55页 |
| 5.4 实验结果 | 第55-62页 |
| 5.4.1 远志不同部位的UPLC色谱分析图及远志化合物结构鉴定 | 第55-58页 |
| 5.4.2 基于UPLC/Q-TOF MS的代谢组学分析 | 第58-62页 |
| 5.5 讨论与总结 | 第62-63页 |
| 第六章 基于qRT-PCR技术的远志皂苷生物合成途径研究 | 第63-79页 |
| 6.1 引言 | 第63-64页 |
| 6.2 实验材料 | 第64页 |
| 6.2.1 植物样本 | 第64页 |
| 6.2.2 实验仪器及试剂 | 第64页 |
| 6.3 实验方法 | 第64-66页 |
| 6.3.1 远志总RNA的提取及检验 | 第64页 |
| 6.3.2 引物的设计 | 第64-65页 |
| 6.3.3 mRMA反转录cDNA | 第65页 |
| 6.3.4 SYBR实时荧光定量PCR | 第65页 |
| 6.3.5 数据分析 | 第65-66页 |
| 6.4 实验结果 | 第66-74页 |
| 6.4.1 RNA检验 | 第66-67页 |
| 6.4.2 酶基因引物数据统计 | 第67-70页 |
| 6.4.3 内参基因表达分析 | 第70-71页 |
| 6.4.4 三萜皂苷通路酶基因表达分析 | 第71-72页 |
| 6.4.5 远志皂苷的峰面积强度与基因表达相关系数分析 | 第72-74页 |
| 6.5 讨论与总结 | 第74-79页 |
| 6.5.1 筛选远志不同部位内参基因 | 第74页 |
| 6.5.2 远志皂苷生物合成途径分析 | 第74-79页 |
| 第七章 总结与展望 | 第79-82页 |
| 7.1 研究工作总结 | 第79-80页 |
| 7.2 展望 | 第80-81页 |
| 7.3 学习心得 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-92页 |
| 已发表论文 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
| 个人简况及联系方式 | 第94-95页 |
| 承诺书 | 第95-96页 |
