中文摘要 | 第10-12页 |
ABSTRACT | 第12-14页 |
第一章 前言 | 第15-19页 |
1.1 飞蝗简介 | 第15页 |
1.2 细胞色素P450简介 | 第15-17页 |
1.2.1 细胞色素P450 | 第15页 |
1.2.2 细胞色素P450命名 | 第15页 |
1.2.3 细胞色素P450分类及结构特征 | 第15-16页 |
1.2.4 细胞色素P450功能 | 第16-17页 |
1.3 细胞色素P450还原酶 | 第17页 |
1.4 RNA干扰技术原理及应用 | 第17-18页 |
1.5 细胞色素P450异源表达 | 第18页 |
1.6 研究内容 | 第18页 |
1.7 研究目的及意义 | 第18-19页 |
第二章 飞蝗CYP450基因的克隆及序列分析 | 第19-31页 |
2.1 实验材料 | 第19页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第19页 |
2.1.2 主要试剂与仪器 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-23页 |
2.2.1 引物设计 | 第19-20页 |
2.2.2 飞蝗五龄若虫cDNA模板制备 | 第20-21页 |
2.2.3 PCR扩增及序列测定 | 第21-22页 |
2.2.4 序列同源比对及系统发育树的构建 | 第22-23页 |
2.3 实验结果 | 第23-30页 |
2.3.1 CYP4家族基因序列及系统进化分析 | 第23-26页 |
2.3.2 飞蝗CYP303A1序列特征及系统进化分析 | 第26-27页 |
2.3.3 CPR基因序列特征及聚类分析 | 第27-30页 |
2.4 分析与讨论 | 第30-31页 |
第三章 飞蝗CYP450基因mRNA表达 | 第31-38页 |
3.1 实验材料 | 第31页 |
3.1.1 供试昆虫 | 第31页 |
3.1.2 主要试剂与仪器 | 第31页 |
3.2 实验方法 | 第31-33页 |
3.2.1 引物设计 | 第31-32页 |
3.2.2 飞蝗模板制备 | 第32页 |
3.2.3 实时定量PCR检测CYP450基因表达 | 第32页 |
3.2.4 数据统计与分析 | 第32-33页 |
3.3 实验结果 | 第33-35页 |
3.3.1 飞蝗CYP4基因不同发育阶段和不同组织部位表达 | 第33-34页 |
3.3.2 飞蝗CYP303A1不同发育阶段和不同组织部位表达 | 第34-35页 |
3.4 分析与讨论 | 第35-38页 |
3.4.1 飞蝗CYP4基因在不同发育阶段和不同组织部位表达分析 | 第35-36页 |
3.4.2 飞蝗CYP303A1表达分析 | 第36-38页 |
第四章 飞蝗CYP450基因功能分析 | 第38-53页 |
4.1 实验材料 | 第38页 |
4.1.1 供试昆虫 | 第38页 |
4.1.2 主要试剂与仪器 | 第38页 |
4.2 实验方法 | 第38-41页 |
4.2.1 引物设计 | 第38页 |
4.2.2 CYP450基因dsRNA合成 | 第38-40页 |
4.2.3 沉默CYP4基因后飞蝗对杀虫剂的敏感性检测 | 第40页 |
4.2.4 沉默CYP303A1后飞蝗发育异常的观察与检测 | 第40-41页 |
4.2.5 数据统计与分析 | 第41页 |
4.3 实验结果 | 第41-51页 |
4.3.1 飞蝗CYP4C69、CYP4C73和CYP4DH1的分子功能 | 第41-44页 |
4.3.2 飞蝗CYP303A1的分子功能 | 第44-51页 |
4.4 分析与讨论 | 第51-53页 |
4.4.1 飞蝗CYP4C69、CYP4C73和CYP4DH1功能分析 | 第51页 |
4.4.2 飞蝗CYP303A1功能分析 | 第51-53页 |
第五章 CYP303A1和CPR原核表达载体构建及检测 | 第53-60页 |
5.1 主要试剂与仪器 | 第53页 |
5.2 实验方法 | 第53-57页 |
5.2.1 pCWOri+载体及目的片段制备 | 第53-56页 |
5.2.2 构建pCWCYP303A1和pCWCPR重组质粒 | 第56-57页 |
5.2.3 pCWCYP303A1和pCWCPR原核表达 | 第57页 |
5.3 实验结果 | 第57-58页 |
5.3.1 pCWCYP303A1和pCWCPR重组质粒构建 | 第57页 |
5.3.2 pCWCYP303A1和pCWCPR原核表达 | 第57-58页 |
5.4 分析与讨论 | 第58-60页 |
全文总结 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-68页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第68-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
个人简况及联系方式 | 第70-72页 |