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小麦孢囊线虫脂肪酸和视黄醇结合蛋白基因的克隆及表达分析

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
英文缩略表第11-12页
第一章 文献综述第12-22页
    1.1 小麦孢囊线虫简介第12-15页
        1.1.1 我国小麦孢囊线虫病发生现状第12-13页
        1.1.2 禾谷孢囊线虫简介第13-15页
        1.1.3 菲利普孢囊线虫简介第15页
    1.2 植物寄生线虫效应子的重要性第15-17页
        1.2.1 促进线虫的侵染第16页
        1.2.2 减弱寄主的防卫反应第16-17页
        1.2.3 诱导取食细胞的形成及其维持第17页
    1.3 线虫脂肪酸和视黄醇结合蛋白研究进展第17-19页
        1.3.1 已发现的脂肪酸和视黄醇结合蛋白及其结构特点第17-18页
        1.3.2 脂肪酸和视黄醇结合蛋白的重要性第18-19页
    1.4 荧光分析法第19-21页
        1.4.1 荧光分析法的原理第19-20页
        1.4.2 荧光分析法在蛋白质与其它分子互作中的应用第20-21页
    1.5 研究目的与意义第21-22页
第二章 禾谷孢囊线虫和菲利普孢囊线虫far基因cDNA及gDNA全长克隆第22-45页
    2.1 实验材料和方法第22-36页
        2.1.1 线虫材料第22页
        2.1.2 主要试剂第22页
        2.1.3 主要仪器和耗材第22-23页
        2.1.4 试剂及培养基的配制第23页
        2.1.5 far基因转录组序列分析第23-24页
        2.1.6 总RNA的制备第24-25页
        2.1.7 far基因 3′ 末端和 5′ 末端扩增第25-32页
        2.1.8 far基因ORF序列验证第32-34页
        2.1.9 far基因gDNA全长扩增第34-35页
        2.1.10 生物信息学分析第35-36页
    2.2 结果与分析第36-43页
        2.2.1 far基因序列完整性分析第36页
        2.2.2 Ha-far-1 基因ORF序列验证第36-37页
        2.2.3 Ha-far-2 基因cDNA全长扩增第37-39页
        2.2.4 Hf-far-1 基因cDNA全长扩增第39-40页
        2.2.5 生物信息学分析第40-42页
        2.2.6 Ha-far-1 基因和Ha-far-2 基因gDNA全长扩增第42-43页
    2.3 小结与讨论第43-45页
第三章 禾谷孢囊线虫和菲利普孢囊线虫FAR蛋白的结合活性检测第45-57页
    3.1 实验材料和方法第45-52页
        3.1.1 主要试剂第45页
        3.1.2 主要仪器和耗材第45页
        3.1.3 试剂的配制第45-46页
        3.1.4 重组表达载体构建第46-49页
        3.1.5 原核表达与蛋白纯化第49-51页
        3.1.6 FAR蛋白结合活性检测第51-52页
    3.2 结果及分析第52-56页
        3.2.1 重组表达载体的构建第52-53页
        3.2.2 FAR蛋白提取与纯化第53-54页
        3.2.3 FAR蛋白质结合活性检测第54-56页
    3.3 小结与讨论第56-57页
第四章 发育表达分析第57-61页
    4.1 材料和方法第57-59页
        4.1.1 线虫材料第57页
        4.1.2 主要试剂第57页
        4.1.3 主要仪器和耗材第57页
        4.1.4 总RNA的提取及cDNA合成第57-58页
        4.1.5 qRT-PCR实验第58-59页
    4.2 结果与分析第59页
    4.3 小结与讨论第59-61页
第五章 表达组织定位第61-69页
    5.1 材料与方法第61-66页
        5.1.1 线虫材料第61页
        5.1.2 主要试剂第61页
        5.1.3 主要仪器及耗材第61页
        5.1.4 溶液的配制第61-63页
        5.1.5 杂交探针的合成第63-64页
        5.1.6 线虫的固定第64-65页
        5.1.7 杂交及显色检测第65-66页
    5.2 结果与分析第66-67页
        5.2.1 地高辛标记探针合成第66-67页
        5.2.2 far基因表达组织定位第67页
    5.3 小结与讨论第67-69页
第六章 全文结论与展望第69-71页
    6.1 结论第69-70页
    6.2 展望第70-71页
参考文献第71-78页
附录第78-80页
致谢第80页

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