摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
英文缩略表 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
1.1 小麦孢囊线虫简介 | 第12-15页 |
1.1.1 我国小麦孢囊线虫病发生现状 | 第12-13页 |
1.1.2 禾谷孢囊线虫简介 | 第13-15页 |
1.1.3 菲利普孢囊线虫简介 | 第15页 |
1.2 植物寄生线虫效应子的重要性 | 第15-17页 |
1.2.1 促进线虫的侵染 | 第16页 |
1.2.2 减弱寄主的防卫反应 | 第16-17页 |
1.2.3 诱导取食细胞的形成及其维持 | 第17页 |
1.3 线虫脂肪酸和视黄醇结合蛋白研究进展 | 第17-19页 |
1.3.1 已发现的脂肪酸和视黄醇结合蛋白及其结构特点 | 第17-18页 |
1.3.2 脂肪酸和视黄醇结合蛋白的重要性 | 第18-19页 |
1.4 荧光分析法 | 第19-21页 |
1.4.1 荧光分析法的原理 | 第19-20页 |
1.4.2 荧光分析法在蛋白质与其它分子互作中的应用 | 第20-21页 |
1.5 研究目的与意义 | 第21-22页 |
第二章 禾谷孢囊线虫和菲利普孢囊线虫far基因cDNA及gDNA全长克隆 | 第22-45页 |
2.1 实验材料和方法 | 第22-36页 |
2.1.1 线虫材料 | 第22页 |
2.1.2 主要试剂 | 第22页 |
2.1.3 主要仪器和耗材 | 第22-23页 |
2.1.4 试剂及培养基的配制 | 第23页 |
2.1.5 far基因转录组序列分析 | 第23-24页 |
2.1.6 总RNA的制备 | 第24-25页 |
2.1.7 far基因 3′ 末端和 5′ 末端扩增 | 第25-32页 |
2.1.8 far基因ORF序列验证 | 第32-34页 |
2.1.9 far基因gDNA全长扩增 | 第34-35页 |
2.1.10 生物信息学分析 | 第35-36页 |
2.2 结果与分析 | 第36-43页 |
2.2.1 far基因序列完整性分析 | 第36页 |
2.2.2 Ha-far-1 基因ORF序列验证 | 第36-37页 |
2.2.3 Ha-far-2 基因cDNA全长扩增 | 第37-39页 |
2.2.4 Hf-far-1 基因cDNA全长扩增 | 第39-40页 |
2.2.5 生物信息学分析 | 第40-42页 |
2.2.6 Ha-far-1 基因和Ha-far-2 基因gDNA全长扩增 | 第42-43页 |
2.3 小结与讨论 | 第43-45页 |
第三章 禾谷孢囊线虫和菲利普孢囊线虫FAR蛋白的结合活性检测 | 第45-57页 |
3.1 实验材料和方法 | 第45-52页 |
3.1.1 主要试剂 | 第45页 |
3.1.2 主要仪器和耗材 | 第45页 |
3.1.3 试剂的配制 | 第45-46页 |
3.1.4 重组表达载体构建 | 第46-49页 |
3.1.5 原核表达与蛋白纯化 | 第49-51页 |
3.1.6 FAR蛋白结合活性检测 | 第51-52页 |
3.2 结果及分析 | 第52-56页 |
3.2.1 重组表达载体的构建 | 第52-53页 |
3.2.2 FAR蛋白提取与纯化 | 第53-54页 |
3.2.3 FAR蛋白质结合活性检测 | 第54-56页 |
3.3 小结与讨论 | 第56-57页 |
第四章 发育表达分析 | 第57-61页 |
4.1 材料和方法 | 第57-59页 |
4.1.1 线虫材料 | 第57页 |
4.1.2 主要试剂 | 第57页 |
4.1.3 主要仪器和耗材 | 第57页 |
4.1.4 总RNA的提取及cDNA合成 | 第57-58页 |
4.1.5 qRT-PCR实验 | 第58-59页 |
4.2 结果与分析 | 第59页 |
4.3 小结与讨论 | 第59-61页 |
第五章 表达组织定位 | 第61-69页 |
5.1 材料与方法 | 第61-66页 |
5.1.1 线虫材料 | 第61页 |
5.1.2 主要试剂 | 第61页 |
5.1.3 主要仪器及耗材 | 第61页 |
5.1.4 溶液的配制 | 第61-63页 |
5.1.5 杂交探针的合成 | 第63-64页 |
5.1.6 线虫的固定 | 第64-65页 |
5.1.7 杂交及显色检测 | 第65-66页 |
5.2 结果与分析 | 第66-67页 |
5.2.1 地高辛标记探针合成 | 第66-67页 |
5.2.2 far基因表达组织定位 | 第67页 |
5.3 小结与讨论 | 第67-69页 |
第六章 全文结论与展望 | 第69-71页 |
6.1 结论 | 第69-70页 |
6.2 展望 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-78页 |
附录 | 第78-80页 |
致谢 | 第80页 |