摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第11-33页 |
1.1 糖尿病的介绍 | 第11页 |
1.2 Ⅱ型糖尿病的发病机制 | 第11-12页 |
1.3 h IAPP对Ⅱ型糖尿病的影响及其聚集机制 | 第12-14页 |
1.4 影响h IAPP聚集的因素 | 第14-15页 |
1.5 h IAPP可能的毒性机理 | 第15-17页 |
1.6 抑制h IAPP等淀粉样蛋白聚集的药物 | 第17-21页 |
1.6.1 小分子抑制剂 | 第17-18页 |
1.6.2 以肽为基础的淀粉样蛋白抑制剂 | 第18-20页 |
1.6.3 以抗体为基础的抑制剂 | 第20-21页 |
1.7 纳米材料在抑制h IAPP聚集中的应用 | 第21-25页 |
1.7.1 无机纳米粒子 | 第21-22页 |
1.7.2 碳纳米材料 | 第22-24页 |
1.7.3 介孔纳米材料 | 第24页 |
1.7.4 磁性纳米材料 | 第24-25页 |
1.8 本课题的选题意义和研究目的 | 第25-27页 |
参考文献 | 第27-33页 |
第二章 nGO@PEG@E纳米复合物作为Ⅱ型糖尿病中抑制h IAPP聚集的研究 | 第33-57页 |
2.1 摘要 | 第33页 |
2.2 引言 | 第33-34页 |
2.3 实验部分 | 第34-40页 |
2.3.1 实验试剂及细胞培养 | 第34-35页 |
2.3.2 溶液配制 | 第35页 |
2.3.3 n GO@PEG@E纳米复合物的制备 | 第35页 |
2.3.4 n GO@PEG@E纳米复合物的表征 | 第35-36页 |
2.3.5 h IAPP聚集体的孵育 | 第36页 |
2.3.6 检测游离状态的自由h IAPP | 第36页 |
2.3.7 h IAPP浊度检测 | 第36页 |
2.3.8 Th T荧光实验 | 第36-37页 |
2.3.9 圆二色光谱(CD)实验 | 第37页 |
2.3.10 透射电镜(TFM) | 第37页 |
2.3.11 原子力显微镜(AFM) | 第37页 |
2.3.12 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第37-38页 |
2.3.13 ANS荧光发射光谱检测 | 第38页 |
2.3.14 细胞毒性检测 | 第38页 |
2.3.15 乳酸脱氢酶(LDH)检测 | 第38-39页 |
2.3.16 细胞内活性氧(ROS)的检测 | 第39页 |
2.3.17 INS-1 细胞凋亡检测 | 第39页 |
2.3.18 线粒体膜电位的测定 | 第39页 |
2.3.19 免疫荧光 | 第39-40页 |
2.3.20 Caspase-3 活性测定 | 第40页 |
2.3.21 统计方法 | 第40页 |
2.4 结果和讨论 | 第40-52页 |
2.4.1 n GO,n GO@PEG和n GO@PEG@E的制备和表征 | 第40-41页 |
2.4.2 游离h IAPP和浊度测定法 | 第41-42页 |
2.4.3 Th T检测和CD光谱检测h IAPP结构的改变 | 第42-43页 |
2.4.4 TEM和AFM观察h IAPP聚集形态的变化 | 第43-45页 |
2.4.5 ANS检测 | 第45-46页 |
2.4.6 SDS-PAGE检测 | 第46页 |
2.4.7 一种快速检测h IAPP聚集的方法[34, 35] | 第46-48页 |
2.4.8 MTT和LDH检测 | 第48-49页 |
2.4.9 纳米复合物减少h IAPP多肽诱导产生的ROS | 第49-50页 |
2.4.10 纳米复合物减低h IAPP细胞毒性保护INS-1 细胞 | 第50-51页 |
2.4.11 纳米复合物对h IAPP诱导线粒体膜电位的影响 | 第51页 |
2.4.12 n GO@PEG@E降低caspase-3 的活性 | 第51-52页 |
2.5 本章小结 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
第三章 DL@CS@NF纳米粒子抑制h IAPP聚集及保护细胞免受h IAPP损伤的研究 | 第57-81页 |
3.1 摘要 | 第57页 |
3.2 引言 | 第57-59页 |
3.3 实验部分 | 第59-64页 |
3.3.1 实验试剂及细胞培养 | 第59页 |
3.3.2 溶液配制 | 第59页 |
3.3.3 h IAPP聚集体的制备 | 第59页 |
3.3.4 MSNs,DLMSNs,DL@CS和DL@CS@NF的制备 | 第59-60页 |
3.3.5 MSNs,DLMSNs,DL@CS和DL@CS@NF的表征 | 第60页 |
3.3.6 浊度实验检测 | 第60-61页 |
3.3.7 Th T荧光实验 | 第61页 |
3.3.8 透射电子显微镜(TEM) | 第61页 |
3.3.9 原子力显微镜(AFM) | 第61页 |
3.3.10 纳米粒子抑制荧光标记的h IAPP聚集 | 第61页 |
3.3.11 细胞毒性检测 | 第61-62页 |
3.3.12 细胞电导率的测定 | 第62页 |
3.3.13 溶血实验 | 第62页 |
3.3.14 Caspase-3 活性测定 | 第62页 |
3.3.15 PARP裂解分析 | 第62-63页 |
3.3.16 细胞内活性氧(ROS)的检测 | 第63页 |
3.3.17 INS-1 细胞对DL@CS和DL@CS@NF纳米粒子的吸收 | 第63页 |
3.3.18 TUNEL-DAPI染色 | 第63-64页 |
3.3.19 细胞线粒体膜电位(MMDP)的检测 | 第64页 |
3.3.20 统计方法 | 第64页 |
3.4 结果和讨论 | 第64-76页 |
3.4.1 MSNs,DLMSNs,DL@CS和DL@CS@NF的制备和表征 | 第64-66页 |
3.4.2 浊度和Th T检测及纳米粒子抑制荧光标记的h IAPP聚集 | 第66-68页 |
3.4.3 AFM和TEM观察纳米粒子对h IAPP形态结构的影响 | 第68-69页 |
3.4.4 纳米粒子毒性检测 | 第69-71页 |
3.4.5 细胞形态,Caspase-3 活性和PARP检测 | 第71-72页 |
3.4.6 活性氧(ROS)检测 | 第72-73页 |
3.4.7 细胞吸收实验 | 第73-74页 |
3.4.8 TUNEL-DAPI共染色实验 | 第74-75页 |
3.4.9 细胞内线粒体膜电位检测 | 第75-76页 |
3.5 本章小结 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-81页 |
硕士期间发表的论文 | 第81-82页 |
致谢 | 第82页 |