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产菊粉酶菌株的筛选及菊粉同步糖化发酵产D-乳酸研究

致谢第3-4页
摘要第4-5页
abstract第5-6页
1 绪论第11-23页
    1.1 研究背景第11页
    1.2 菊粉概述第11-14页
        1.2.1 菊粉的性质和来源第11-13页
        1.2.2 菊粉的应用价值第13页
        1.2.3 菊粉的生物炼制第13-14页
    1.3 菊粉酶研究现状第14-16页
        1.3.1 菊粉酶的来源和分类第14-15页
        1.3.2 菊粉酶的生产第15-16页
        1.3.3 菊粉酶的应用第16页
    1.4 微生物发酵制备D-乳酸研究进展第16-21页
        1.4.1 D-乳酸概述第16-17页
        1.4.2 发酵产D-乳酸的微生物第17-19页
            1.4.2.1 乳酸细菌第17-18页
            1.4.2.2 基因工程菌株第18-19页
        1.4.3 D-乳酸生产工艺第19-20页
            1.4.3.1 分批发酵第19-20页
            1.4.3.2 分批补料发酵第20页
            1.4.3.3 连续发酵第20页
        1.4.4 生物质发酵制备D-乳酸第20-21页
    1.5 研究目的和内容第21-23页
        1.5.1 研究目的第21页
        1.5.2 研究内容第21-23页
2 产菊粉酶菌株的筛选及其发酵条件的优化第23-37页
    2.1 引言第23页
    2.2 材料与方法第23-27页
        2.2.1 菌种第23页
        2.2.2 试剂第23-24页
        2.2.3 仪器第24页
        2.2.4 培养基及溶液第24-25页
        2.2.5 培养条件及方法第25-26页
            2.2.5.1 菌种初筛第25页
            2.2.5.2 菌种活化第25页
            2.2.5.3 菌种复筛和发酵培养第25-26页
        2.2.6 菌种18S rRNA鉴定第26页
            2.2.6.1 基因组提取第26页
            2.2.6.2 PCR扩增第26页
        2.2.7 分析方法第26-27页
            2.2.7.1 酶活性测定第26-27页
            2.2.7.2 蛋白样品的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析第27页
    2.3 结果与讨论第27-36页
        2.3.1 产菊粉酶菌株的筛选第27-29页
            2.3.1.1 选择性培养基筛选第27-28页
            2.3.1.2 摇瓶复筛第28-29页
        2.3.2 真菌XL01的鉴定第29-30页
            2.3.2.1 菌落形态观察第29页
            2.3.2.2 18S rRNA鉴定第29-30页
        2.3.3 产酶发酵条件的优化第30-36页
            2.3.3.1 有机氮源对微生物产菊粉酶的影响第30-31页
            2.3.3.2 碳源对微生物产菊粉酶的影响第31-32页
            2.3.3.3 温度对微生物产菊粉酶的影响第32-33页
            2.3.3.4 初始pH对微生物产菊粉酶的影响第33-34页
            2.3.3.5 接种量对微生物产菊粉酶的影响第34页
            2.3.3.6 摇床转速对微生物产菊粉酶的影响第34-35页
            2.3.3.7 装液量对微生物产菊粉酶的影响第35-36页
            2.3.3.8 发酵时间对微生物产菊粉酶的影响第36页
    2.4 本章小结第36-37页
3 菊粉发酵制备D-乳酸的工艺研究第37-58页
    3.1 引言第37页
    3.2 材料与方法第37-42页
        3.2.1 原料、酶液及菌种第37页
        3.2.2 试剂第37-38页
        3.2.3 仪器第38-39页
        3.2.4 培养基及溶液第39-40页
        3.2.5 菊粉水解实验第40页
        3.2.6 发酵培养条件及方法第40-41页
            3.2.6.1 菌种活化第40页
            3.2.6.2 种子培养第40页
            3.2.6.3 发酵培养第40-41页
        3.2.7 分析方法第41-42页
            3.2.7.1 菊粉酶活性测定第41页
            3.2.7.2 菌体浓度测定第41页
            3.2.7.3 糖及乳酸浓度测定第41页
            3.2.7.4 计算公式第41-42页
    3.3 结果与讨论第42-57页
        3.3.1 保加利亚乳杆菌果糖发酵制备D-乳酸性能研究第42-43页
        3.3.2 菊粉酶解条件优化研究第43-48页
            3.3.2.1 商业菊粉酶第44-46页
            3.3.2.2 自产菊粉酶第46-48页
        3.3.3 菊粉酸解工艺研究第48-49页
        3.3.4 不同策略对菊粉发酵产D-乳酸性能的影响第49-53页
            3.3.4.1 菊粉酸解后发酵制备D-乳酸第49-50页
            3.3.4.2 菊粉酶解后发酵制备D-乳酸第50-51页
            3.3.4.3 同步糖化发酵制备D-乳酸第51-53页
        3.3.5 同步糖化发酵制备D-乳酸发酵条件优化第53-55页
            3.3.5.1 温度对同步糖化发酵制备D-乳酸的影响第53页
            3.3.5.2 pH对同步糖化发酵制备D-乳酸的影响第53-54页
            3.3.5.3 菊粉浓度对同步糖化发酵制备D-乳酸的影响第54-55页
            3.3.5.4 菊粉酶用量对同步糖化发酵制备D-乳酸的影响第55页
        3.3.6 不同菊粉酶同步糖化发酵制备D-乳酸的比较第55-57页
    3.4 本章小结第57-58页
4 菊粉同步糖化发酵制备D-乳酸动力学研究第58-74页
    4.1 引言第58页
    4.2 材料与方法第58-59页
        4.2.1 原料、酶液及菌种第58页
        4.2.2 试剂第58页
        4.2.3 仪器第58页
        4.2.4 培养基及溶液第58页
        4.2.5 培养条件及方法第58页
        4.2.6 菊粉水解反应初速度测定第58-59页
        4.2.7 分析方法第59页
            4.2.7.1 菌体干重测定第59页
            4.2.7.2 糖及乳酸浓度测定第59页
    4.3 结果与讨论第59-72页
        4.3.1 果糖发酵制备D-乳酸动力学研究第59-65页
            4.3.1.1 动力学模型构建第59-61页
            4.3.1.2 模型拟合分析第61-65页
        4.3.2 菊粉酶解动力学研究第65-69页
            4.3.2.1 动力学模型构建第65-66页
            4.3.2.2 模型拟合分析第66-69页
        4.3.3 菊粉同步糖化发酵制备D-乳酸动力学研究第69-72页
            4.3.3.1 动力学模型构建第70页
            4.3.3.2 细胞生长动力学模拟第70-71页
            4.3.3.3 乳酸生成动力学模拟第71页
            4.3.3.4 还原糖动力学验证第71-72页
    4.4 本章小结第72-74页
5 结论与展望第74-76页
    5.1 结论第74-75页
    5.2 展望第75-76页
附录第76-79页
    附录1 P.oxalicum18S rRNA基因部分序列第76-77页
    附录2 酸解时间优化表第77-78页
    附录3 符号说明第78-79页
攻读学位期间发表的学术论文第79-80页
参考文献第80-88页

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