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抑制GARFT建立小鼠NTDs动物模型及其机制的研究

中文摘要第7-10页
英文摘要第10-13页
常用缩写词中英文对照表第14-15页
前言第15-21页
第一部分 洛美曲松致小鼠神经管畸形动物模型的制备第21-30页
    1 材料与方法第21-25页
        1.1 实验材料第21-23页
            1.1.1 实验动物第21页
            1.1.2 主要器材第21-22页
            1.1.3 主要试剂第22-23页
            1.1.4 主要溶液配制第23页
        1.2 实验方法第23-25页
            1.2.1 动物模型建立第23页
            1.2.2 组织病理检测第23-24页
            1.2.3 统计学分析第24-25页
    2 结果第25-29页
        2.1 DDATHF致出生缺陷动物模型的建立第25-27页
        2.2 DDATHF诱导的胚胎异常发育结果第27页
        2.3 DDATHF引起胚胎神经管发育异常的病理改变第27-29页
    3 讨论第29-30页
第二部分 甘氨酰胺核糖核苷酸甲酰基转移酶活性及嘌呤代谢的检测第30-37页
    1 材料与方法第30-34页
        1.1 实验材料第30-31页
            1.1.1 主要材料第30页
            1.1.2 主要试剂第30-31页
            1.1.3 主要溶液配制第31页
        1.2 实验方法第31-34页
            1.2.1 GARFT酶活性检测第31-32页
            1.2.2 高效液相色谱法第32-33页
            1.2.3 统计学分析第33-34页
    2 结果第34-36页
        2.1 NTDs胚胎组织GARFT酶活性变化第34页
        2.2 NTDs胚胎组织核苷酸含量变化第34-36页
    3 讨论第36-37页
第三部分 洛美曲松对NTDs小鼠胚胎组织细胞增殖和凋亡的研究第37-49页
    1 材料与方法第37-43页
        1.1 实验材料第37-39页
            1.1.1 主要材料第37-38页
            1.1.2 主要试剂第38页
            1.1.3 主要溶液配制第38-39页
        1.2 实验方法第39-43页
            1.2.1 免疫组化方法第39页
            1.2.2 蛋白印迹方法第39-40页
            1.2.3 小鼠全胚胎组织RNA的提取第40页
            1.2.4 Real time-PCR第40-42页
            1.2.5 统计学处理第42-43页
    2 结果第43-47页
        2.1 PH3在小鼠胚胎组织细胞表达情况第43页
        2.2 Casp-3 在小鼠胚胎组织细胞表达情况第43-44页
        2.3 PH3蛋白和裂解的Casp-3 蛋白的表达情况第44-45页
        2.4 RT-PCR结果第45-47页
    3 讨论第47-49页
第四部分 GAR-FGAR代谢障碍小鼠胚胎干细胞增殖与凋亡的研究第49-63页
    1 材料与方法第49-56页
        1.1 实验材料第49-52页
            1.1.1 主要材料第49-50页
            1.1.2 主要试剂第50-51页
            1.1.3 主要溶液配制第51-52页
        1.2 实验方法第52-56页
            1.2.1 DDATHF 干预 ESC 细胞培养第52-53页
            1.2.2 检测DDATHF干预后ESC细胞的GARFT 酶活性第53页
            1.2.3 ESC的CCK-8反应检测第53页
            1.2.4 BrdU渗入法标记DDATHF抑制ESC 细胞增殖状态第53-54页
            1.2.5 AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡第54页
            1.2.6 DDATHF干预对 ESC线粒体膜电位的影响第54-55页
            1.2.7 慧星实验分析DDATHF干预ESC细胞 DNA 断裂情况第55-56页
    2 结果第56-61页
        2.1 CCK-8 试剂盒检测DDATHF抑制小鼠胚胎干细胞增殖第56页
        2.2 BrdU渗入法检测DDATHF抑制ESC细胞增殖能力第56-57页
        2.3 Annexin V/PI双染法检测DDATHF诱导 ESC 细胞凋亡第57-58页
        2.4 DDATHF干预对ESC线粒体膜电位的影响第58-59页
        2.5 DDATHF干预ESC细胞中DNA损伤明显增加第59-61页
    3 讨论第61-63页
结论第63-64页
展望第64-65页
参考文献第65-71页
综述 营养,一碳单位代谢和神经管畸形第71-80页
    参考文献第76-80页
致谢第80-81页
个人简历第81页

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