| 摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 主要中英文名词对照表 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-52页 |
| 1.1 前言 | 第15-16页 |
| 1.2 p53的功能-基因组的保护者 | 第16-19页 |
| 1.3 细胞增殖状态加强了细胞和机体对应激和死亡信号的灵敏性且该现象与p53的活力直接相关 | 第19-23页 |
| 1.3.1 细胞增殖的激发、维持和细胞周期监测点的失调是肿瘤发生和发展的前提 | 第19-21页 |
| 1.3.2 细胞增殖信号通路与c-MYC蛋白 | 第21-22页 |
| 1.3.3 增殖状态加强了细胞和机体对应激信号和死亡信号的灵敏性且该现象与p53的活力直接相关 | 第22-23页 |
| 1.4 p53活力的调控 | 第23-35页 |
| 1.4.1 p53蛋白的翻译后调控 | 第23-26页 |
| 1.4.2 p53mRNA表达、翻译及其调控的研究现状 | 第26-35页 |
| 1.5 BAC转基因技术构建转基因小鼠在研究体内基因的表达及其调控机制和谱系跟踪中的应用 | 第35-38页 |
| 1.5.1 应用BAC转基因技术构建报告基因小鼠并用于研究体内基因的表达及其调控机制 | 第35-37页 |
| 1.5.2 应用BAC转基因技术构建Cre小鼠并用于谱系跟踪研究 | 第37-38页 |
| 1.6 结语 | 第38-40页 |
| 参考文献 | 第40-52页 |
| 第二章 p53RNA表达及其调控初探和四株BAC转基因p53-LacZ报告小鼠的构建 | 第52-78页 |
| 摘要 | 第52-53页 |
| 前言 | 第53-54页 |
| 材料与方法 | 第54-73页 |
| 2.1 利用原位杂交技术观察三种组织中p53 mRNA的表达情况 | 第62-64页 |
| 2.2 利用染色体免疫共沉淀技术考察c-MYC结合NIH3T3细胞中p53启动子的情况 | 第64-65页 |
| 2.3 利用BAC转基因技术构建四株p53-LacZ报告小鼠 | 第65-73页 |
| 2.3.1 构建四种修饰后的p53 BAC | 第66-67页 |
| 2.3.2 鉴定BAC的稳定性和完整性 | 第67-68页 |
| 2.3.3 构建转基因小鼠 | 第68-69页 |
| 2.3.4 估算各个品系小鼠中转入BAC的拷贝数 | 第69-71页 |
| 2.3.5 检测和比较p53 BAC转基因小鼠各株各品系10.5天胚胎的β-gal表达模式和水平 | 第71-73页 |
| 2.3.6 检测ZPE小鼠中的β-gal表达水平和模式并与原位杂交的数据相比较 | 第73页 |
| 讨论 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-78页 |
| 第三章 在小鼠的多种组织中探讨p53表达的主要模式 | 第78-96页 |
| 摘要 | 第78-79页 |
| 前言 | 第79-81页 |
| 材料与方法 | 第81-91页 |
| 3.1 ZPE50 MEF中LacZ和内源性p53 mRNA表达模式相互一致且高水平的β-gal和细胞的增殖状态存在正向相关性 | 第84-85页 |
| 3.2 β-gal的表达水平与小鼠皮肤毛囊的增殖状态成正相关 | 第85-86页 |
| 3.3 高水平β-gal能在多种组织中与Ki67共定位 | 第86-89页 |
| 3.4 多种组织中增殖细胞表达高水平的β-gal且其水平有随年龄增加而下降的趋势 | 第89-90页 |
| 3.5 ZPE50;APC~(min)小鼠产生的小肠息肉广泛异位表达高水平β-gal且其表达模式和Ki67一致 | 第90-91页 |
| 讨论 | 第91-93页 |
| 参考文献 | 第93-96页 |
| 第四章 在小鼠多种组织中探讨p53启动子中保守的E-box和p53 3'UTR对p3，UTR对p53表达调控的作用 | 第96-117页 |
| 摘要 | 第96-97页 |
| 前言 | 第97-98页 |
| 材料与方法 | 第98-110页 |
| 4.1 p53启动区域E-box突变显著下调了胚胎、幼年期和成年期小鼠多种组织中LacZ mRNA和p-gal的水平 | 第101-104页 |
| 4.2 c-MYC在增殖细胞中通过p53启动区域E-box调控p53的表达 | 第104-106页 |
| 4.3 去除p53 3'UTR大幅下调了BAC转基因小鼠胚胎、幼年期和成年期多种组织中β-gal的表达水平而不显著影响LacZ mRNA的水平 | 第106-110页 |
| 讨论 | 第110-113页 |
| 参考文献 | 第113-117页 |
| 第五章 建立p53~(ERT2CreERT2-IRES-EGFP)小鼠并结合ROSA26报告系统对多种组织中增殖细胞进行谱系跟踪 | 第117-129页 |
| 摘要 | 第117-118页 |
| 前言 | 第118-119页 |
| 材料与方法 | 第119-126页 |
| 5.1 构建p53~(ERT2CreERT2-IRES-EGFP)(简称p53-ECE)小鼠 | 第122-124页 |
| 5.1.1 构建p53-ECE BAC | 第122-123页 |
| 5.1.2 构建p53-ECE转基因小鼠 | 第123-124页 |
| 5.2 利用p53-ECE;LSL-LacZ小鼠检测Cre的活性及其标记和跟踪增殖细胞的情况 | 第124-126页 |
| 讨论 | 第126-127页 |
| 参考文献 | 第127-129页 |
| 致谢 | 第129-130页 |
| Publications | 第130-131页 |
