| 符号说明 | 第5-8页 |
| 中文摘要 | 第8-11页 |
| 英文摘要 | 第11-14页 |
| 1 前言 | 第15-31页 |
| 1.1 正链RNA病毒基因组UTR的结构与功能 | 第15-20页 |
| 1.1.1 5′-UTR及 3′-UTR各元件的结构特征 | 第16-17页 |
| 1.1.2 5′-UTR及 3′-UTR结构与功能的研究方法 | 第17页 |
| 1.1.3 UTR的高级结构与功能的关系 | 第17-20页 |
| 1.2 病毒的末端修复 | 第20-24页 |
| 1.2.1 病毒末端修复的现象 | 第20-21页 |
| 1.2.2 病毒末端修复的机制 | 第21-24页 |
| 1.3 侵染性克隆的构建 | 第24-29页 |
| 1.3.1 影响病毒侵染性克隆致病的因素 | 第25-26页 |
| 1.3.2 侵染性克隆在超表达及沉默方面的应用 | 第26-27页 |
| 1.3.3 烟草脉带花叶病毒研究现状 | 第27-28页 |
| 1.3.4 马铃薯X病毒研究现状 | 第28-29页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第29页 |
| 1.5 本研究的流程图 | 第29-31页 |
| 1.5.1 TVBVM UTR对病毒侵染的影响 | 第29-30页 |
| 1.5.2 马铃薯X病毒超表达及沉默载体的构建 | 第30-31页 |
| 2 材料和方法 | 第31-51页 |
| 2.1 实验材料 | 第31-35页 |
| 2.1.1 病毒来源、供试材料、菌株和质粒及血清 | 第31页 |
| 2.1.2 生化及分子生物学试剂及主要实验仪器 | 第31页 |
| 2.1.3 寡聚核苷酸引物 | 第31-35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-51页 |
| 2.2.1 质粒DNA的定点突变 | 第35-38页 |
| 2.2.2 农杆菌感受态的制备及转化 | 第38-39页 |
| 2.2.3 农杆菌共浸润试验及荧光观察 | 第39-40页 |
| 2.2.4 Western blot表达分析 | 第40-42页 |
| 2.2.5 ELISA检测病毒积累量 | 第42-43页 |
| 2.2.6 病毒RNA的提取 | 第43页 |
| 2.2.7 除去RNA中的基因组DNA | 第43-44页 |
| 2.2.8 反转录聚合酶链式反应 | 第44页 |
| 2.2.9 cDNA末端快速扩增法（RACE）获得 5′-UTR序列 | 第44-47页 |
| 2.2.10 荧光定量PCR分析 | 第47-49页 |
| 2.2.11 以不依赖于连接的PVX沉默载体连接外源片段的方法 | 第49-51页 |
| 3 结果与分析 | 第51-76页 |
| 3.1 TVBMV 5′-UTR在病毒侵染中的作用 | 第51-60页 |
| 3.1.1 TVBMV 5′-UTR从 5′-端依次缺失对病毒侵染的影响 | 第51-52页 |
| 3.1.2 5′-UTR从 5′-端依次缺失突变体侵染植株后发生了体内修复 | 第52-56页 |
| 3.1.3 5′-UTR序列分段缺失对病毒侵染的影响 | 第56-58页 |
| 3.1.4 缺失碱基数少的子代RNA在侵染过程中具有优势 | 第58-59页 |
| 3.1.5 RdRp的活性是病毒末端修复必需的 | 第59页 |
| 3.1.6 病毒的修复过程与寄主因子有关 | 第59-60页 |
| 3.2 TVBMV 3′-UTR对病毒侵染的影响 | 第60-68页 |
| 3.2.1 TVBMV 3′-UTR从 5′-端依次缺失对病毒侵染的影响 | 第60-64页 |
| 3.2.2 TVBMV 3′-UTR内部序列的分段缺失对病毒侵染的影响 | 第64-65页 |
| 3.2.3 TVBMV 3′-UTR从 3′-端依次缺失对病毒侵染的影响 | 第65-68页 |
| 3.3 马铃薯X病毒超表达载体及沉默载体的构建 | 第68-76页 |
| 3.3.1 PVX 1985分离物侵染性克隆的构建 | 第68-69页 |
| 3.3.2 pCaPVX100在茄科寄主上的侵染性 | 第69-70页 |
| 3.3.3 植物超表达载体pCaPVX440的构建及外源基因的表达 | 第70-73页 |
| 3.3.4 以不依赖于连接的PVX沉默载体沉默内源基因 | 第73-76页 |
| 4 讨论 | 第76-84页 |
| 5 结论 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-98页 |
| 致谢 | 第98页 |
