| 中文摘要 | 第10-13页 |
| ABSTRACT | 第13-15页 |
| 第一章文献综述 | 第16-26页 |
| 1.1 编程性核糖体移码 | 第16-18页 |
| 1.2 游仆虫中的PRF基因 | 第18-20页 |
| 1.2.1 八肋游仆虫 | 第18-19页 |
| 1.2.2 游仆虫中的移码基因 | 第19-20页 |
| 1.3 ADP核糖基化因子 | 第20-22页 |
| 1.3.1 ADP核糖基化因子家族 | 第20-22页 |
| 1.3.2 ADP核糖基化因子 1（ARF1） | 第22页 |
| 1.4 本课题研究思路及意义 | 第22-26页 |
| 1.4.1 研究思路 | 第24-25页 |
| 1.4.2 研究意义 | 第25-26页 |
| 第二章 八肋游仆虫ARF1基因的克隆与序列分析 | 第26-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-27页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第26页 |
| 2.1.2 实验试剂和引物 | 第26页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第26-27页 |
| 2.1.4 实验试剂配制 | 第27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-30页 |
| 2.2.1 大肠杆菌感受态DH5α 的制备 | 第27页 |
| 2.2.2 八肋游仆虫的培养和收集 | 第27页 |
| 2.2.3 八肋游仆虫基因组的提取 | 第27-28页 |
| 2.2.4 八肋游仆虫总RNA的提取 | 第28页 |
| 2.2.5 总RNA反转录为cDNA | 第28页 |
| 2.2.6 PCR | 第28-29页 |
| 2.2.7 PCR产物与pMD18-T载体的连接 | 第29-30页 |
| 2.2.8 序列比对分析 | 第30页 |
| 2.3 实验结果 | 第30-33页 |
| 2.3.1 EoARF1的基因克隆与序列分析 | 第30-32页 |
| 2.3.2 EoARF1的氨基酸序列比对分析 | 第32-33页 |
| 2.4 讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 八肋游仆虫ARF1基因表达的分析验证 | 第35-47页 |
| 3.1 实验材料 | 第35-38页 |
| 3.1.1 菌株与质粒 | 第35-36页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第36页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第36页 |
| 3.1.4 实验试剂配制 | 第36-37页 |
| 3.1.5 PCR引物合成 | 第37-38页 |
| 3.2 实验方法 | 第38-42页 |
| 3.2.1 大肠杆菌感受态DH5α 的制备 | 第38页 |
| 3.2.2 八肋游仆虫的培养和收集 | 第38页 |
| 3.2.3 八肋游仆虫基因组的提取 | 第38页 |
| 3.2.4 荧光素酶报告质粒的构建 | 第38-39页 |
| 3.2.5 通过质粒洗牌技术对酵母菌株YDB447/pDB967筛选 | 第39页 |
| 3.2.6 双荧光素酶移码效率测定实验 | 第39-42页 |
| 3.3 实验结果 | 第42-45页 |
| 3.3.1 双荧光素酶报告质粒的构建 | 第42-44页 |
| 3.3.2 双荧光素酶移码效率分析 | 第44-45页 |
| 3.4 讨论 | 第45-47页 |
| 第四章 八肋游仆虫ARF1蛋白的表达纯化及其与嘌呤核苷酸的相互作用 | 第47-55页 |
| 4.1 实验材料 | 第47-48页 |
| 4.1.1 实验仪器 | 第47页 |
| 4.1.2 菌株与质粒 | 第47-48页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第48页 |
| 4.2 实验方法 | 第48-50页 |
| 4.2.1 EoARF1基因的克隆 | 第48页 |
| 4.2.2 pET28a-ARF1-T重组表达质粒的构建 | 第48-49页 |
| 4.2.3 EoARF1重组蛋白的表达纯化 | 第49页 |
| 4.2.4 重组蛋白pET28a-ARF1的Western Blot检测 | 第49-50页 |
| 4.2.5 荧光光谱法测定ARF1蛋白与嘌呤核苷酸的相互作用 | 第50页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第50-53页 |
| 4.3.1 重组质粒pET28a-ARF1的构建 | 第50-51页 |
| 4.3.2EoARF1重组蛋白的表达纯化 | 第51页 |
| 4.3.3EoARF1蛋白与嘌呤核苷酸相互作用的荧光光谱法研究 | 第51-53页 |
| 4.4 讨论 | 第53-55页 |
| 总结与展望 | 第55-58页 |
| 参考文献 | 第58-67页 |
| 附录1 缩略表 | 第67-68页 |
| 附录2 主要仪器设备 | 第68-69页 |
| 附录3 本研究构建的重组质粒一览表 | 第69-70页 |
| 附录4 实验试剂配制 | 第70-73页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 个人简况及联系方式 | 第75-76页 |
