摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩略表 | 第7-12页 |
第1章 绪论 | 第12-26页 |
1.1 赭曲霉毒素A简介 | 第12-19页 |
1.1.1 赭曲霉毒素A的产生及其理化性质 | 第12-13页 |
1.1.2 赭曲霉毒素A的危害及其限量标准 | 第13-14页 |
1.1.3 赭曲霉毒素A的检测方法及其研究现状 | 第14-19页 |
1.1.3.1 化学分析法 | 第14-15页 |
1.1.3.2 仪器分析法 | 第15-16页 |
1.1.3.3 免疫分析方法 | 第16-19页 |
1.2 光子晶体材料 | 第19-21页 |
1.2.1 光子晶体概述 | 第19页 |
1.2.2 光子晶体微球的制备 | 第19-21页 |
1.2.2.1 单分散相胶体微球自组装法 | 第20页 |
1.2.2.2 人工组装法 | 第20-21页 |
1.3 核酸适配体 | 第21-24页 |
1.3.1 核酸适配体生物传感体系的优点 | 第21-22页 |
1.3.2 基于核酸适配体检测赭曲霉毒素A的研究进展 | 第22页 |
1.3.3 G-四联体DNAzyme | 第22-24页 |
1.5 本课题研究的内容及意义 | 第24-26页 |
1.5.1 本课题研究的内容 | 第24页 |
1.5.2 本课题的研究意义 | 第24-26页 |
第2章 光子晶体微球的制备及其表面修饰的研究 | 第26-35页 |
2.1 单分散二氧化硅微球的制备 | 第27-28页 |
2.1.1 试验材料 | 第27页 |
2.1.2 试验仪器 | 第27页 |
2.1.3 试验方法 | 第27-28页 |
2.1.3.1 乳液的配置 | 第27-28页 |
2.1.3.2 光子晶体微球的自组装 | 第28页 |
2.2 微球的表面修饰及其红外表征 | 第28-34页 |
2.2.1 试验试剂及仪器 | 第28-29页 |
2.2.1.1 试验试剂 | 第28-29页 |
2.2.1.2 试验仪器 | 第29页 |
2.2.2 表面修饰的不同方法 | 第29-31页 |
2.2.2.1 羧基(-COOH)的修饰 | 第30-31页 |
2.2.2.2 醛基(-CHO)的修饰 | 第31页 |
2.2.2.3 异硫氰根(-NCS)的修饰 | 第31页 |
2.2.2.4 环氧基(-CH(O)CH-)的修饰 | 第31页 |
2.2.3 基团的红外表征 | 第31-34页 |
2.3 本章总结 | 第34-35页 |
第3章 适配体竞争化学发光法检测赭曲霉毒素A | 第35-54页 |
3.1 试验原理 | 第35-36页 |
3.2 试验试剂及仪器 | 第36-38页 |
3.2.1 试验试剂 | 第36-37页 |
3.2.2 试验仪器 | 第37页 |
3.2.3 主要试剂的配置 | 第37-38页 |
3.2.3.1 PBS(0.1mol/L,pH7.4) | 第37-38页 |
3.2.3.2 PBST | 第38页 |
3.2.3.3 Tris-HCl缓冲液的配置 | 第38页 |
3.2.3.4 结合缓冲液的配置 | 第38页 |
3.2.3.5 鲁米诺发光体系溶液的配置 | 第38页 |
3.2.4 核酸适配体序列 | 第38页 |
3.3 试验步骤 | 第38-39页 |
3.3.1 OTA检测反应步骤 | 第38-39页 |
3.3.2 化学信号值测量 | 第39页 |
3.4 试验条件的优化 | 第39-40页 |
3.4.1 OTA-aptamer互补链浓度的优化 | 第39页 |
3.4.2 OTA-aptamer 浓度的优化 | 第39页 |
3.4.3 竞争反应温度的优化 | 第39-40页 |
3.4.4 竞争反应时间的优化 | 第40页 |
3.4.5 表面官能团的优化 | 第40页 |
3.5 OTA毒素的检测 | 第40-42页 |
3.5.1 标准曲线的制作 | 第40页 |
3.5.2 特异性分析 | 第40-41页 |
3.5.3 加标回收率测定 | 第41-42页 |
3.5.3.1 样品前处理 | 第41页 |
3.5.3.2 样品提取 | 第41页 |
3.5.3.3 回收率的测定 | 第41页 |
3.5.3.4 ELISA方法的比较 | 第41-42页 |
3.5.4 真实样品的测定 | 第42页 |
3.6 试验结果分析与讨论 | 第42-52页 |
3.6.1 化学发光信号值的测定 | 第42页 |
3.6.2 试验优化条件的分析 | 第42-46页 |
3.6.2.1 OTA-aptamer互补链浓度的优化分析 | 第42-43页 |
3.6.2.2 OTA-aptamer浓度的优化分析 | 第43-44页 |
3.6.2.3 竞争反应温度优化 | 第44-45页 |
3.6.2.4 竞争反应时间优化 | 第45页 |
3.6.2.5 官能团优化 | 第45-46页 |
3.6.3 OTA标准曲线的制作 | 第46-47页 |
3.6.4 特异性分析 | 第47-48页 |
3.6.5 回收率的比较 | 第48-51页 |
3.6.5.1 本法测加标回收率 | 第48-49页 |
3.6.5.2 ELISA方法测回收率 | 第49-51页 |
3.6.6 实际样品测量 | 第51-52页 |
3.7 本章小结 | 第52-54页 |
第4章 应用DNAzyme-aptamer化学发光法检测赭曲霉毒素A | 第54-70页 |
4.1 试验原理 | 第54-56页 |
4.2 试验试剂与仪器 | 第56-57页 |
4.2.1 试验试剂与材料 | 第56页 |
4.2.2 试验仪器 | 第56-57页 |
4.2.3 主要试剂的配置 | 第57页 |
4.2.4 核酸适配体序列 | 第57页 |
4.3 试验步骤 | 第57-58页 |
4.3.1 OTA检测 | 第57页 |
4.3.2 样品中OTA提取 | 第57-58页 |
4.4 试验条件优化 | 第58-59页 |
4.4.1 Mg~(2+)浓度的优化 | 第58页 |
4.4.2 K~+浓度的优化 | 第58页 |
4.4.3 B2链反应时间的优化 | 第58页 |
4.4.4 G-四联体催化活性与Hemin催化活性的比较分析 | 第58-59页 |
4.5 OTA的测定分析 | 第59页 |
4.5.1 标准曲线的制作 | 第59页 |
4.5.2 特异性分析 | 第59页 |
4.6 ELISA方法的比较 | 第59页 |
4.7 试验结果与讨论 | 第59-69页 |
4.7.1 条件优化分析 | 第59-62页 |
4.7.1.1 Mg~(2+)浓度的优化分析 | 第59-60页 |
4.7.1.2 K~+浓度的优化 | 第60页 |
4.7.1.3 B2链反应时间的优化 | 第60-62页 |
4.7.2 G-四联体结构催化活性与Hemin催化活性的比较分析 | 第62-63页 |
4.7.3 本法标准曲线的制作 | 第63-65页 |
4.7.4 特异性分析 | 第65-66页 |
4.7.5 回收率的比较 | 第66-67页 |
4.7.5.1 本法测回收率 | 第66-67页 |
4.7.6 实际样品测量 | 第67-69页 |
4.8 本章小结 | 第69-70页 |
全文总结 | 第70-71页 |
论文创新点 | 第71-72页 |
展望 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-79页 |
致谢 | 第79页 |