| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 绪论 | 第10-19页 |
| 1.1 诺如病毒简介 | 第10页 |
| 1.2 诺如病毒的病毒学特征及病毒多样性 | 第10-11页 |
| 1.3 人源诺如病毒的传播途径 | 第11-12页 |
| 1.3.1 人-人传播途径 | 第11-12页 |
| 1.3.2 人-食物传播途径 | 第12页 |
| 1.4 人源诺如病毒与受体的互作 | 第12-14页 |
| 1.4.1 人源诺如病毒与组织血型抗原的互作 | 第12-13页 |
| 1.4.2 人源诺如病毒与果蔬的互作 | 第13-14页 |
| 1.5 食品中诺如病毒研究的方法 | 第14-17页 |
| 1.5.1 ELISA | 第15页 |
| 1.5.2 激光共聚焦荧光显微镜 | 第15-16页 |
| 1.5.3 Real-time RT-PCR | 第16-17页 |
| 1.6 本课题的研究内容与意义 | 第17-19页 |
| 1.6.1 人源诺如病毒研究中存在的问题 | 第17页 |
| 1.6.2 本课题的研究目的和意义 | 第17-19页 |
| 第2章 GⅠ.1/GⅡ.4型人源诺如病毒在生菜表面的分布规律 | 第19-27页 |
| 2.1 前言 | 第19页 |
| 2.2 材料 | 第19-21页 |
| 2.2.1 实验菌株 | 第19页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第19-20页 |
| 2.2.3 主要仪器 | 第20页 |
| 2.2.4 试剂的配置 | 第20-21页 |
| 2.3 实验方法 | 第21-22页 |
| 2.3.1 菌种的培养 | 第21页 |
| 2.3.2 pET28a-BL21细胞裂解液的制备 | 第21页 |
| 2.3.3 生菜叶的选取及处理 | 第21页 |
| 2.3.4 激光共聚焦荧光显微镜镜检 | 第21页 |
| 2.3.5 人工污染生菜叶面时间的优化 | 第21页 |
| 2.3.6 生菜叶清洗方式的优化 | 第21-22页 |
| 2.3.7 抗体的优化 | 第22页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第22-26页 |
| 2.4.1 不同污染时间下NP-P(GⅠ.1)BL21在生菜表面的结合 | 第22-23页 |
| 2.4.2 不同清洗方式下INP-P(GⅠ.1)BL21与生菜表面的结合 | 第23页 |
| 2.4.3 GⅠ.1/GⅡ.4型诺如病毒替代物在生菜新/老叶表面的结合 | 第23-24页 |
| 2.4.4 GⅠ.1/GⅡ.4型诺如病毒替代物在生菜叶面和叶脉的分布 | 第24-26页 |
| 2.5 本章小结 | 第26-27页 |
| 第3章 GⅠ.1/GⅡ.4型人源诺如病毒与生菜的特异性结合及受体性质初步分析 | 第27-42页 |
| 3.1 前言 | 第27页 |
| 3.2 材料 | 第27-29页 |
| 3.2.1 菌株 | 第27-28页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第28页 |
| 3.2.3 主要仪器 | 第28页 |
| 3.2.4 试剂的配置 | 第28-29页 |
| 3.3 实验方法 | 第29-31页 |
| 3.3.1 菌种的培养 | 第29页 |
| 3.3.2 唾液的收集和预处理 | 第29页 |
| 3.3.3 生菜提取液的制备 | 第29页 |
| 3.3.4 生菜提取液/PGM结合的酶联免疫吸附实验(ELISA) | 第29-30页 |
| 3.3.5 ELISA中抗体的优化 | 第30页 |
| 3.3.6 ELISA中RE稀释度优化 | 第30页 |
| 3.3.7 ELISA中唾液稀释度优化 | 第30-31页 |
| 3.3.8 PGM和唾液竞争性抑制实验 | 第31页 |
| 3.3.9 NaIO_4浓度对生菜提取液与诺如病毒替代物结合的影响 | 第31页 |
| 3.3.10 煮沸生菜提取液对诺如病毒替代物结合的影响 | 第31页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第31-40页 |
| 3.4.1 抗体处理方式对结合的影响 | 第31-32页 |
| 3.4.2 抗体稀释度对结合的影响 | 第32-33页 |
| 3.4.3 生菜提取液稀释度对结合的影响 | 第33-35页 |
| 3.4.4 唾液稀释度对RE结合诺如病毒替代物抑制效果的影响 | 第35-36页 |
| 3.4.5 PGM和唾液竞争抑制作用 | 第36-37页 |
| 3.4.6 不同浓度NaIO_4对RE与诺如病毒替代物结合的影响 | 第37-38页 |
| 3.4.7 煮沸和氧化对生菜提取液与诺如病毒替代物结合的影响 | 第38-40页 |
| 3.5 结论 | 第40-42页 |
| 第4章 pH、盐离子和吐温-80对人源诺如病毒与生菜结合的影响 | 第42-52页 |
| 4.1 前言 | 第42页 |
| 4.2 材料 | 第42-43页 |
| 4.2.1 菌株 | 第42页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第42-43页 |
| 4.2.3 主要仪器 | 第43页 |
| 4.2.4 试剂的配置 | 第43页 |
| 4.3 实验方法 | 第43-44页 |
| 4.3.1 菌种的培养 | 第43页 |
| 4.3.2 生菜提取液的制备 | 第43页 |
| 4.3.3 Ex PASy等电点分析诺如病毒P结构域等电点分析 | 第43页 |
| 4.3.4 pH梯度实验 | 第43-44页 |
| 4.3.5 NaCl/MgCl_2浓度梯度实验 | 第44页 |
| 4.3.6 吐温-80浓度梯度实验 | 第44页 |
| 4.3.7 NaCl+吐温-80浓度梯度实验 | 第44页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第44-50页 |
| 4.4.1 诺如病毒P结构域等电点分析 | 第44页 |
| 4.4.2 不同pH对诺如病毒替代物同生菜提取液结合的影响 | 第44-45页 |
| 4.4.3 不同浓度NaCl/MgCl_2对诺如病毒替代物同生菜提取液结合的影响 | 第45-48页 |
| 4.4.4 不同浓度吐温-80对诺如病毒替代物同生菜提取液结合的影响 | 第48-49页 |
| 4.4.5 NaCl+吐温-80对诺如病毒替代物同生菜提取液结合的影响 | 第49-50页 |
| 4.5 结论 | 第50-52页 |
| 第5章 结论与展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 攻读学位期间所开展的科研项目和发表的学术论文 | 第61页 |
