| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 英文名称及缩写词 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-22页 |
| 1. 溶栓药物的发展 | 第11-12页 |
| 2. 乳腺生物反应器概述 | 第12-15页 |
| 2.1 腺生物反应器原理 | 第12-13页 |
| 2.2 转基因动物乳腺生物反应器制药的优点 | 第13页 |
| 2.3 利用乳腺生物反应器生产重组t-PA的研究进展 | 第13-14页 |
| 2.4 家兔作为乳腺生物反应器的优势 | 第14页 |
| 2.5 显微注射法制备乳腺生物反应器 | 第14-15页 |
| 3. 人组织纤溶酶原激活剂概述 | 第15-18页 |
| 3.1 人组织纤溶酶原激活剂的发展历史 | 第15-16页 |
| 3.2 人组织纤溶酶原激活剂基因序列分析 | 第16页 |
| 3.3 人组织纤溶酶原激活剂机构与功能分析 | 第16-17页 |
| 3.4 人组织纤溶酶原激活剂变构体 | 第17-18页 |
| 4. 多基因表达研究 | 第18-20页 |
| 4.1 转基因整合位点机制的概述 | 第18页 |
| 4.2 外源基因的表达水平与整合位点的位置效应 | 第18-19页 |
| 4.3 多基因共表达的方式 | 第19页 |
| 4.4 单基因载体多重转化 | 第19-20页 |
| 5. 血栓动物模型制备的方法 | 第20-22页 |
| 5.1 物理损伤法 | 第20页 |
| 5.2 化学损伤法 | 第20-22页 |
| 第二章 乳腺特异性表达rhPA基因载体的构建 | 第22-33页 |
| 1. 材料 | 第22-25页 |
| 1.1 菌种及质粒 | 第22-23页 |
| 1.2 主要仪器和设备 | 第23-24页 |
| 1.3 分子生物学试剂 | 第24页 |
| 1.4 主要试剂的配制 | 第24-25页 |
| 2. 方法 | 第25-31页 |
| 2.1 大量提取PCL25/LTF-Neo质粒以及PCL25/rhPA质粒 | 第25-26页 |
| 2.2 从PCL25/LTF-Neo质粒中获取Neo~r基因和PCL25+rhPA质粒的线性化 | 第26-27页 |
| 2.3 Neo~r基因片段插入PCL25/rhPA载体 | 第27页 |
| 2.4 连接产物的转化以及重组质粒PCL-25/rhPA-Neo的酶切鉴定 | 第27-28页 |
| 2.5 显微注射片段PCL-25/rhPA-Neo的回收 | 第28-31页 |
| 3. 结果 | 第31-33页 |
| 第三章 多位点整合转rhPA基因兔的制备及其整合表达检测 | 第33-48页 |
| 1. 材料 | 第33-36页 |
| 1.1 实验动物 | 第33页 |
| 1.2 实验仪器 | 第33-34页 |
| 1.3 主要器材 | 第34页 |
| 1.4 主要药品与试剂 | 第34-35页 |
| 1.5 主要试剂的配制 | 第35-36页 |
| 2. 实验方法 | 第36-45页 |
| 2.1 用FSH/hCH对供体母兔进行超数排卵 | 第36页 |
| 2.2 用hCG对供受体母兔进行同期发情处理 | 第36页 |
| 2.3 超数排卵的供体母兔与转PCL25/tPA公兔配种 | 第36-37页 |
| 2.4 手术法收集供体母兔受精卵 | 第37-38页 |
| 2.5 原核期兔受精卵显微注射PCL-25/rhPA-Neo基因片段 | 第38-39页 |
| 2.6 原核期兔受精卵显微注射PCL-25/rhPA-Neo基因片段后移植受体母兔 | 第39-40页 |
| 2.7 受体母兔术后护理以及分娩 | 第40-41页 |
| 2.8 转基PLC-25/rhPA-Neo基因兔的整合检测 | 第41-43页 |
| 2.9 转基因兔的配种及表达检测 | 第43-45页 |
| 3. 结果 | 第45-48页 |
| 3.1 转rhPA基因兔基因组PCR整合检测 | 第45-46页 |
| 3.2 转rhPA基因兔兔奶ELISA检测 | 第46-47页 |
| 3.3 转rhPA基因兔兔奶FAPA检测结果 | 第47-48页 |
| 第四章 小鼠血栓模型的建立及其体内溶栓试验 | 第48-59页 |
| 1. 材料 | 第48-49页 |
| 1.1 实验动物 | 第48页 |
| 1.2 主要试剂 | 第48-49页 |
| 1.3 仪器和材料 | 第49页 |
| 2. 方法 | 第49-52页 |
| 2.1 rhPA的纯化及其去除内毒素 | 第49页 |
| 2.2 角叉菜胶制备小鼠尾部血栓模型 | 第49-51页 |
| 2.3 重组产物rhPA治疗小鼠尾血栓试验 | 第51-52页 |
| 3. 结果 | 第52-59页 |
| 3.1 不同浓度角叉菜胶诱导小鼠尾血栓形成结果 | 第52-54页 |
| 3.2 不同浓度纯化产物rhPA溶解小鼠尾部血栓试验结果 | 第54-59页 |
| 讨论 | 第59-63页 |
| 全文总结 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
