| 摘要 | 第3-10页 |
| ABSTRACT | 第10-18页 |
| 第一章 前言 | 第22-27页 |
| (一) 结肠癌的发展现状 | 第22-23页 |
| (二) 远华蟾蜍精与肿瘤 | 第23-24页 |
| (三) 凋亡与坏死 | 第24-27页 |
| 第二章 材料与方法 | 第27-51页 |
| 2.1 材料 | 第27-33页 |
| 2.1.1 细胞来源 | 第27页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.3 主要药品试剂 | 第28-30页 |
| 2.1.4 主要溶液配制 | 第30-32页 |
| 2.1.5 消毒灭菌 | 第32-33页 |
| 2.2 方法 | 第33-50页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第33-35页 |
| 2.2.2 远华蟾蜍精毒性检测 | 第35-37页 |
| 2.2.3 Hoechst 33342/PI检测细胞核形态学变化 | 第37-38页 |
| 2.2.4 流式细胞术检测细胞坏死凋亡情况 | 第38-39页 |
| 2.2.5 ROS和线粒体膜电位分析 | 第39-40页 |
| 2.2.6 蛋白样品制备 | 第40-41页 |
| 2.2.7 Western blot检测相关蛋白表达变化 | 第41-45页 |
| 2.2.8 应激与凋亡信号抗体芯片分析相关靶点表达变化 | 第45-50页 |
| 2.3 统计学分析 | 第50-51页 |
| 第三章 结果 | 第51-68页 |
| 3.1 MTT法检测TBG对不同细胞活力的影响 | 第51-55页 |
| 3.1.1 TBG抑制CRC细胞活力 | 第51-53页 |
| 3.1.2 TBG对人正常肠上皮细胞的杀伤作用较CRC细胞减弱 | 第53-55页 |
| 3.2 TBG诱导CRC细胞死亡方式鉴定 | 第55-59页 |
| 3.2.1 TBG诱导CRC细胞发生凋亡坏死,胞核形态改变 | 第55-57页 |
| 3.2.2 TBG显著增加CRC细胞凋亡率和坏死率 | 第57-59页 |
| 3.3 TBG诱导HCT116细胞死亡的分子机制探讨 | 第59-68页 |
| 3.3.1 TBG诱导HCT116细胞内ROS增加和线粒体膜电位降低 | 第59-60页 |
| 3.3.2 蛋白免疫印迹证实TBG引起HCT116细胞应激与凋亡通路的活化 | 第60-62页 |
| 3.3.3 敲除p53、Bax基因后,TBG抑制HCT116细胞增殖能力明显减弱 | 第62-63页 |
| 3.3.4 敲除p53、Bax基因后,TBG引起HCT116细胞凋亡率和坏死率逐渐减少 | 第63-65页 |
| 3.3.5 敲除p53、Bax基因后,TBG引起HCT116细胞应激与凋亡通路的活化受阻 | 第65-66页 |
| 3.3.6 抗体芯片也证实TBG能引起HCT116细胞中的凋亡靶点表达改变 | 第66-68页 |
| 第四章 讨论 | 第68-73页 |
| 第五章 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-80页 |
| 中英文对照缩略词表 | 第80-82页 |
| 研究生期间发表论文情况 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-85页 |
