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水产品中环丙沙星ELISA快速检测试剂盒的初步研制

中文摘要第1-9页
Abstract第9-11页
前言第11-23页
 第一部分 氟喹诺酮类药物概述第11-12页
  1 喹诺酮类药物第11-12页
  2 氟喹诺酮类药物第12页
 第二部分 水产品中环丙沙星药物残留第12-19页
  1 环丙沙星的结构与物理性质第12-13页
  2 环丙沙星药效第13-14页
  3 环丙沙星的作用机理第14页
  4 环丙沙星药物代谢动力学第14-16页
  5 环丙沙星的耐药性问题第16页
  6 环丙沙星药物残留问题第16-18页
  7 环丙沙星药物残留对于水产行业的影响第18-19页
 第三部分 环丙沙星残留检测技术研究进展第19-22页
  1 微生物检验法(MIA)第19页
  2 高效液相色谱法(HPLC)第19-20页
  3 液相色谱-串联质谱法(LC-MS)第20-21页
  4 毛细管电泳分析法(CE)第21页
  5 免疫分析法(IA)第21-22页
 第四部分 本文的研究意义第22-23页
第一章 环丙沙星完全抗原的制备与鉴定第23-31页
 1 仪器和试剂第23页
   ·主要仪器第23页
   ·试剂材料第23页
   ·工作液配制第23页
 2 方法第23-26页
   ·环丙沙星完全抗原的合成第23-25页
   ·环丙沙星完全抗原的鉴定第25-26页
 3 结果与分析第26-28页
   ·偶联物的SDS-PAGE 电泳鉴定第26页
   ·完全抗原蛋白质浓度测定第26-27页
   ·偶联物的紫外分光光度(UV)法测定第27页
   ·偶联物的质谱(MASS)鉴定第27-28页
 4 讨论第28-31页
   ·药物半抗原的合成第28-29页
   ·药物半抗原偶联方法第29页
   ·EDC 用量的控制第29页
   ·环丙沙星半抗原与蛋白载体的偶联比第29-30页
   ·环丙沙星人工抗原的鉴定第30-31页
第二章 环丙沙星单克隆抗体的制备及性质鉴定第31-55页
 1 仪器和材料第31-35页
   ·主要仪器第31页
   ·试剂第31-32页
   ·部分试剂的配制第32-34页
   ·其他材料第34-35页
 2 方法第35-45页
   ·试验动物免疫第35-37页
   ·杂交瘤细胞株的建立第37-41页
   ·单克隆抗体腹水制备第41-42页
   ·单克隆抗体腹水纯化第42-43页
   ·单克隆抗体纯度鉴定(SDS-PAGE 电泳法)第43-44页
   ·单克隆抗体性质鉴定第44-45页
 3 结果与分析第45-50页
   ·Balb/c 免疫小鼠血清中抗体效价的测定iELISA 方法检测第45-46页
   ·血清抗体特异性的确定第46页
   ·单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立与冻存第46-47页
   ·单克隆抗体纯度鉴定第47-48页
   ·腹水蛋白质含量测定第48页
   ·CPFX-McAb 效价测定第48-49页
   ·CPFX- McAb 免疫球蛋白亚类鉴定第49页
   ·单克隆抗体特异性分析第49-50页
 4 讨论第50-55页
   ·完全抗原免疫第50页
   ·免疫原的纯度第50页
   ·影响细胞融合的因素第50-51页
   ·阳性杂交瘤细胞筛选方案第51-52页
   ·杂交瘤细胞的阳性克隆化第52页
   ·单克隆抗体细胞株冻存与复苏第52页
   ·单克隆抗体制备第52-53页
   ·单克隆抗体特异性第53-55页
第三章 环丙沙星ELISA 检测试剂盒的初步研制第55-66页
 1 材料第55页
   ·主要试剂与仪器设备第55页
   ·主要溶液配制第55页
 2 方法第55-57页
   ·ELISA 基本程序第55页
   ·最佳反应条件的确定第55-57页
   ·ic-ELISA 标准工作曲线的建立第57页
   ·LOD 的确定第57页
   ·加标样品回收率的测定第57页
 3 结果与分析第57-64页
   ·最佳反应条件的确定第57-62页
   ·ic-ELISA 标准工作曲线的建立第62-63页
   ·LOD 的确定第63页
   ·加标样品回收率的测定第63-64页
 4 讨论第64-66页
   ·药物小分子半抗原ELISA 检测方法的建立第64页
   ·ELISA 检测效果的影响因素第64-65页
   ·最低检测限第65页
   ·实际样品回收率测定第65-66页
第四章 结论第66-67页
参考文献第67-71页
致谢第71页

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