中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
前言 | 第11-23页 |
第一部分 氟喹诺酮类药物概述 | 第11-12页 |
1 喹诺酮类药物 | 第11-12页 |
2 氟喹诺酮类药物 | 第12页 |
第二部分 水产品中环丙沙星药物残留 | 第12-19页 |
1 环丙沙星的结构与物理性质 | 第12-13页 |
2 环丙沙星药效 | 第13-14页 |
3 环丙沙星的作用机理 | 第14页 |
4 环丙沙星药物代谢动力学 | 第14-16页 |
5 环丙沙星的耐药性问题 | 第16页 |
6 环丙沙星药物残留问题 | 第16-18页 |
7 环丙沙星药物残留对于水产行业的影响 | 第18-19页 |
第三部分 环丙沙星残留检测技术研究进展 | 第19-22页 |
1 微生物检验法(MIA) | 第19页 |
2 高效液相色谱法(HPLC) | 第19-20页 |
3 液相色谱-串联质谱法(LC-MS) | 第20-21页 |
4 毛细管电泳分析法(CE) | 第21页 |
5 免疫分析法(IA) | 第21-22页 |
第四部分 本文的研究意义 | 第22-23页 |
第一章 环丙沙星完全抗原的制备与鉴定 | 第23-31页 |
1 仪器和试剂 | 第23页 |
·主要仪器 | 第23页 |
·试剂材料 | 第23页 |
·工作液配制 | 第23页 |
2 方法 | 第23-26页 |
·环丙沙星完全抗原的合成 | 第23-25页 |
·环丙沙星完全抗原的鉴定 | 第25-26页 |
3 结果与分析 | 第26-28页 |
·偶联物的SDS-PAGE 电泳鉴定 | 第26页 |
·完全抗原蛋白质浓度测定 | 第26-27页 |
·偶联物的紫外分光光度(UV)法测定 | 第27页 |
·偶联物的质谱(MASS)鉴定 | 第27-28页 |
4 讨论 | 第28-31页 |
·药物半抗原的合成 | 第28-29页 |
·药物半抗原偶联方法 | 第29页 |
·EDC 用量的控制 | 第29页 |
·环丙沙星半抗原与蛋白载体的偶联比 | 第29-30页 |
·环丙沙星人工抗原的鉴定 | 第30-31页 |
第二章 环丙沙星单克隆抗体的制备及性质鉴定 | 第31-55页 |
1 仪器和材料 | 第31-35页 |
·主要仪器 | 第31页 |
·试剂 | 第31-32页 |
·部分试剂的配制 | 第32-34页 |
·其他材料 | 第34-35页 |
2 方法 | 第35-45页 |
·试验动物免疫 | 第35-37页 |
·杂交瘤细胞株的建立 | 第37-41页 |
·单克隆抗体腹水制备 | 第41-42页 |
·单克隆抗体腹水纯化 | 第42-43页 |
·单克隆抗体纯度鉴定(SDS-PAGE 电泳法) | 第43-44页 |
·单克隆抗体性质鉴定 | 第44-45页 |
3 结果与分析 | 第45-50页 |
·Balb/c 免疫小鼠血清中抗体效价的测定iELISA 方法检测 | 第45-46页 |
·血清抗体特异性的确定 | 第46页 |
·单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立与冻存 | 第46-47页 |
·单克隆抗体纯度鉴定 | 第47-48页 |
·腹水蛋白质含量测定 | 第48页 |
·CPFX-McAb 效价测定 | 第48-49页 |
·CPFX- McAb 免疫球蛋白亚类鉴定 | 第49页 |
·单克隆抗体特异性分析 | 第49-50页 |
4 讨论 | 第50-55页 |
·完全抗原免疫 | 第50页 |
·免疫原的纯度 | 第50页 |
·影响细胞融合的因素 | 第50-51页 |
·阳性杂交瘤细胞筛选方案 | 第51-52页 |
·杂交瘤细胞的阳性克隆化 | 第52页 |
·单克隆抗体细胞株冻存与复苏 | 第52页 |
·单克隆抗体制备 | 第52-53页 |
·单克隆抗体特异性 | 第53-55页 |
第三章 环丙沙星ELISA 检测试剂盒的初步研制 | 第55-66页 |
1 材料 | 第55页 |
·主要试剂与仪器设备 | 第55页 |
·主要溶液配制 | 第55页 |
2 方法 | 第55-57页 |
·ELISA 基本程序 | 第55页 |
·最佳反应条件的确定 | 第55-57页 |
·ic-ELISA 标准工作曲线的建立 | 第57页 |
·LOD 的确定 | 第57页 |
·加标样品回收率的测定 | 第57页 |
3 结果与分析 | 第57-64页 |
·最佳反应条件的确定 | 第57-62页 |
·ic-ELISA 标准工作曲线的建立 | 第62-63页 |
·LOD 的确定 | 第63页 |
·加标样品回收率的测定 | 第63-64页 |
4 讨论 | 第64-66页 |
·药物小分子半抗原ELISA 检测方法的建立 | 第64页 |
·ELISA 检测效果的影响因素 | 第64-65页 |
·最低检测限 | 第65页 |
·实际样品回收率测定 | 第65-66页 |
第四章 结论 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-71页 |
致谢 | 第71页 |