| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 文献综述 | 第11-21页 |
| 1.丹参质量研究概况 | 第11-16页 |
| 1.1 影响丹参质量的外在因素 | 第11-12页 |
| 1.2 影响丹参质量的内在因素 | 第12-13页 |
| 1.3 道地性研究 | 第13-16页 |
| 2.丹参道地性遗传机制研究 | 第16-18页 |
| 2.1 丹参道地药材遗传多样性及遗传分化研究 | 第16-17页 |
| 2.2 道地药材地理变异及环境适应性研究 | 第17-18页 |
| 2.3 道地药材功能基因表达及调控研究 | 第18页 |
| 3.丹参酮类次生代谢途径及功能基因的研究进展 | 第18-21页 |
| 3.1 丹参酮类次生代谢途径 | 第18-19页 |
| 3.2 SmKSL基因的研究进展 | 第19-20页 |
| 3.3 功能基因多态性与次生代谢产物的研究 | 第20-21页 |
| 前言 | 第21-24页 |
| 实验研究 | 第24-61页 |
| 1.SmKSL基因全长克隆及产地趋向变异分析 | 第24-39页 |
| 1.1 材料与方法 | 第24-28页 |
| 1.1.1 材料 | 第24页 |
| 1.1.2 试剂与仪器 | 第24-25页 |
| 1.1.3 丹参主根总RNA的提取 | 第25页 |
| 1.1.4 逆转录cDNA第一条链的合成 | 第25页 |
| 1.1.5 SmKSL基因的PCR扩增 | 第25-26页 |
| 1.1.6 PCR产物回收纯化 | 第26-27页 |
| 1.1.7 目的片段与克隆载体的连接 | 第27页 |
| 1.1.8 重组质粒转化E.coli DH5α感受态细胞 | 第27-28页 |
| 1.1.9 阳性克隆的筛选及测序 | 第28页 |
| 1.1.10 生物信息学分析 | 第28页 |
| 1.1.11 不同产地基因序列比对及产地特异性变异位点寻找 | 第28页 |
| 1.2 结果与分析 | 第28-38页 |
| 1.2.1 SmKSL克隆条件的建立 | 第28-29页 |
| 1.2.2 SmKSL基因cDNA的获得 | 第29-31页 |
| 1.2.3 SmKSL基因生物信息学分析 | 第31-32页 |
| 1.2.4 SmKSL产地趋向变异分析 | 第32-38页 |
| 1.3 小结 | 第38-39页 |
| 2.SmKSL基因原核表达体系的构建 | 第39-50页 |
| 2.1 材料与方法 | 第39-45页 |
| 2.1.1 材料 | 第39页 |
| 2.1.2 试剂与仪器 | 第39页 |
| 2.1.3 重组质粒的提取 | 第39-40页 |
| 2.1.4 质粒DNA的双酶切 | 第40-41页 |
| 2.1.5 SmKSL片段和pET-32a(+)载体的连接 | 第41-42页 |
| 2.1.6 重组质粒转化DH5α感受态细胞 | 第42页 |
| 2.1.7 pET-SmKSL转化BL21 (DE3)感受态细胞 | 第42页 |
| 2.1.8 IPTG诱导表达可溶蛋白SmKSL | 第42-43页 |
| 2.1.9 IPTG诱导表达可溶蛋白SmCPS | 第43页 |
| 2.1.10 SmKSL蛋白的SDS-PAGE分析 | 第43-45页 |
| 2.1.11 可溶蛋白的富集纯化 | 第45页 |
| 2.2 结果与分析 | 第45-49页 |
| 2.2.1 pET-KSL重组质粒的构建 | 第45-47页 |
| 2.2.2 诱导表达 | 第47-48页 |
| 2.2.3 可溶蛋白的富集纯化 | 第48-49页 |
| 2.3 小结 | 第49-50页 |
| 3.SmKSL基因功能的验证及不同产地基因型催化效率的初步比较 | 第50-57页 |
| 3.1 材料与方法 | 第50-52页 |
| 3.1.1 材料 | 第50页 |
| 3.1.2 试剂与仪器 | 第50页 |
| 3.1.3 蛋白浓度的测定 | 第50-51页 |
| 3.1.4 SmKSL基因的体外催化反应 | 第51-52页 |
| 3.1.5 SmKSL基因催化反应产物的GC-MS分析 | 第52页 |
| 3.2 结果与分析 | 第52-56页 |
| 3.2.1 SmKSL基因生化功能的验证 | 第52-55页 |
| 3.2.2 不同产地SmKSL基因型催化效能的比较 | 第55-56页 |
| 3.3 小结 | 第56-57页 |
| 4.总结与讨论 | 第57-61页 |
| 4.1 丹参SmKSL基因"产地趋向变异规律"的分析 | 第57-58页 |
| 4.2 丹参道地性遗传特征的探讨 | 第58-59页 |
| 4.3 丹参道地性形成机制 | 第59页 |
| 4.4 待解决的科学问题及展望 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 附录 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 个人简历 | 第67页 |
