| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-20页 |
| 一、胰岛素及其应用 | 第11-12页 |
| （一）胰岛素的分子结构 | 第11页 |
| （二）胰岛素的生物学功能及应用 | 第11-12页 |
| 二、胰岛素检测手段 | 第12-15页 |
| （一）放射免疫分析法 | 第12页 |
| （二）免疫放射分析法 | 第12-13页 |
| （三）酶联免疫分析法 | 第13页 |
| （四）荧光免疫分析法 | 第13-14页 |
| （五）化学发光免疫分析法 | 第14页 |
| （六）其他新型的检测技术 | 第14-15页 |
| 三、抗体的研究进展及其应用 | 第15-19页 |
| （一）抗体制备技术 | 第15-17页 |
| （二）抗体研究进展 | 第17-18页 |
| （三）抗体的应用 | 第18-19页 |
| 四、本课题研究的目的与意义 | 第19-20页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第20-32页 |
| 一、实验材料 | 第20-25页 |
| （一）实验仪器及器材 | 第20页 |
| （二）实验动物及细胞系 | 第20页 |
| （三）实验试剂 | 第20-21页 |
| （四）主要溶液配制 | 第21-25页 |
| 二、实验方法 | 第25-32页 |
| （一）细胞培养相关实验方法 | 第25页 |
| （二）间接ELISA | 第25-26页 |
| （三）抗胰岛素单克隆抗体制备 | 第26-28页 |
| （四）抗胰岛素多克隆抗体制备 | 第28-29页 |
| （五）SDS-PAGE电泳分离和考马斯亮蓝染色 | 第29-30页 |
| （六）抗体特性鉴定 | 第30-32页 |
| 第三部分 实验结果 | 第32-48页 |
| 一、不同物种来源的胰岛素蛋白质序列对比 | 第32-33页 |
| 二、检测抗体水平的间接ELISA方法条件的优化 | 第33-37页 |
| （一）检测抗胰岛素单抗的间接ELISA方法最佳工作条件的确立 | 第33-36页 |
| （二）检测抗胰岛素多抗的间接ELISA方法最佳工作条件的确立 | 第36-37页 |
| 三、抗胰岛素单克隆抗体制备 | 第37-44页 |
| （一）小鼠加强免疫前小鼠血清效价测定 | 第37-38页 |
| （二）细胞融合 | 第38-39页 |
| （三）阳性克隆检测、筛选及亚克隆 | 第39-41页 |
| （四）单抗亚型鉴定 | 第41页 |
| （五）单抗腹水制备及效价检测 | 第41-42页 |
| （六）单抗纯化 | 第42-43页 |
| （七）单抗交叉反应性分析 | 第43-44页 |
| 四、抗胰岛素多克隆抗体制备 | 第44-48页 |
| （一）免疫动物血清效价测定 | 第44-45页 |
| （二）多抗纯化 | 第45页 |
| （三）多抗纯化后效价测定 | 第45-46页 |
| （四）多抗交叉反应性分析 | 第46-48页 |
| 第四部分 讨论 | 第48-52页 |
| 第五部分 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 英文缩写词 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简介 | 第60页 |