| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3页 |
| 第1章 前言 | 第7-24页 |
| 1.1 植物花粉与柱头的表面结构 | 第7-8页 |
| 1.2 植物亲和授粉及调控花粉与柱头相互作用的因子 | 第8-13页 |
| 1.3 花粉水合过程及相关基因 | 第13-15页 |
| 1.4 拟南芥花药发育过程 | 第15-19页 |
| 1.5 花粉壁的形成及绒毡层在花粉壁形成中的作用 | 第19-23页 |
| 1.6 本研究工作的内容和意义 | 第23-24页 |
| 第2章 材料方法 | 第24-37页 |
| 2.1 材料 | 第24-25页 |
| 2.1.1 植株 | 第24页 |
| 2.1.2 菌株 | 第24页 |
| 2.1.3 质粒 | 第24页 |
| 2.1.4 仪器 | 第24-25页 |
| 2.1.5 试剂、抗生素 | 第25页 |
| 2.2 拟南芥种植 | 第25页 |
| 2.3 柱头与花粉管苯胺蓝染色 | 第25-26页 |
| 2.4 花粉体外萌发 | 第26页 |
| 2.5 花粉体内授粉观察 | 第26页 |
| 2.6 甲醛处理花粉及授粉方法 | 第26页 |
| 2.7 花粉表面的扫描电镜观察 | 第26-27页 |
| 2.8 花粉外被质谱分析 | 第27页 |
| 2.9 突变体育性恢复 | 第27-28页 |
| 2.9.1 高湿度处理 | 第27页 |
| 2.9.2 施加外源脂质处理 | 第27-28页 |
| 2.10 花药发育的透射电镜观察 | 第28页 |
| 2.11 T-DNA插入鉴定 | 第28-30页 |
| 2.11.1 植物总DNA提取 | 第28-29页 |
| 2.11.2 PCR扩增 | 第29页 |
| 2.11.3 DNA胶回收、测序 | 第29-30页 |
| 2.12 基因克隆与互补植株 | 第30-33页 |
| 2.12.1 植物总RNA提取 | 第30页 |
| 2.12.2 植物总RNA纯化 | 第30-31页 |
| 2.12.3 RNA反转录体系 | 第31页 |
| 2.12.4 扩增片段与pEasy-Blunt Simple载体连接 | 第31页 |
| 2.12.5 菌落PCR鉴定阳性克隆 | 第31页 |
| 2.12.6 大肠杆菌质粒提取 | 第31-32页 |
| 2.12.7 双酶切鉴定 | 第32页 |
| 2.12.8 目的片段与终载连接 | 第32页 |
| 2.12.9 农杆菌感受态制备与转化 | 第32-33页 |
| 2.12.10 转化植株及筛苗鉴定 | 第33页 |
| 2.13 原位杂交 | 第33-36页 |
| 2.14 烟草瞬转 | 第36页 |
| 2.15 引物序列 | 第36-37页 |
| 第3章 结果 | 第37-48页 |
| 3.1 cer3突变体花粉不能在柱头表面萌发 | 第37-39页 |
| 3.2 cer3-8 突变花粉可在体外萌发 | 第39页 |
| 3.3 cer3-8 突变体花粉在水合过程中受阻 | 第39-40页 |
| 3.4 cer3-8 突变花粉缺少特异的信号物质 | 第40-41页 |
| 3.5 cer3-8 突变体存在器官融合及茎部蜡质成分缺少现象 | 第41-42页 |
| 3.6 cer3-8 突变体花粉缺乏长链脂肪酸 | 第42-43页 |
| 3.7 长链脂肪酸可以使cer3-8 突变体恢复育性 | 第43-44页 |
| 3.8 cer3-8 突变体花粉表面光滑且含油层增多 | 第44-45页 |
| 3.9 CER3在花药发育第9期的绒毡层和小孢子中高表达 | 第45-46页 |
| 3.10 CER3为膜定位蛋白 | 第46-48页 |
| 第4章 讨论 | 第48-52页 |
| 4.1 cer3-8 为花粉水合受阻的条件性雄性不育突变体 | 第48页 |
| 4.2 含油层参与水合中的花粉与柱头的相互作用 | 第48-49页 |
| 4.3 绒毡层细胞膜蛋白CER3参与花粉表面结构的形成 | 第49-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
