| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略表(中英文对照) | 第9-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-47页 |
| 1.1 Bt生物学特性及分类 | 第15-19页 |
| 1.1.1 Bt生物学特性 | 第15-16页 |
| 1.1.2 Bt分类 | 第16页 |
| 1.1.3 Bt活性谱 | 第16-18页 |
| 1.1.4 Bt产生的活性物质 | 第18-19页 |
| 1.2 Bt产生的杀虫晶体蛋白及其编码基因 | 第19-26页 |
| 1.2.1 杀虫晶体蛋白及其编码基因的应用 | 第19页 |
| 1.2.2 杀虫晶体蛋白及其编码基因 | 第19-20页 |
| 1.2.3 杀虫晶体蛋白基因的分类 | 第20-22页 |
| 1.2.4 杀虫晶体蛋白的结构与功能 | 第22-26页 |
| 1.3 Bt产生的营养期杀虫蛋白及其编码基因 | 第26-27页 |
| 1.3.1 营养期杀虫蛋白蛋白及其编码基因的应用 | 第26页 |
| 1.3.2 营养期杀虫蛋白蛋白及其编码基因 | 第26页 |
| 1.3.3 营养期杀虫蛋白基因的分类 | 第26-27页 |
| 1.3.4 营养期杀虫蛋白蛋白的结构与功能 | 第27页 |
| 1.4 Bt产生的伴胞蛋白（PS）及其编码基因 | 第27-35页 |
| 1.4.1 伴胞蛋白对癌细胞的活性 | 第27-29页 |
| 1.4.2 伴胞蛋白及其编码基因 | 第29-30页 |
| 1.4.3 伴胞蛋白基因的分类 | 第30-32页 |
| 1.4.4 伴胞蛋白的结构与功能 | 第32-35页 |
| 1.5 Bt杀虫晶体蛋白基因的高效表达 | 第35-39页 |
| 1.5.1 高效目的基因的克隆 | 第36页 |
| 1.5.2 目的基因的改造 | 第36页 |
| 1.5.3 高表达载体的构建 | 第36-38页 |
| 1.5.4 增效基因的转录调控 | 第38-39页 |
| 1.6 Bt杀虫晶体蛋白的改造 | 第39-44页 |
| 1.6.1 定点突变的研究进展 | 第39-40页 |
| 1.6.2 杀虫晶体蛋白结构域Ⅰ的改造 | 第40页 |
| 1.6.3 杀虫晶体蛋白结构域Ⅱ的改造 | 第40页 |
| 1.6.4 杀虫晶体蛋白结构域Ⅲ的改造 | 第40-41页 |
| 1.6.5 突变蛋白对提高活性、延缓抗性、扩大杀虫谱的影响 | 第41-44页 |
| 1.7 苏云金芽胞杆菌在医学上的研究和应用进展 | 第44-45页 |
| 1.7.1 苏云金芽胞杆菌防治医学昆虫 | 第44页 |
| 1.7.2 苏云金芽胞杆菌抗寄生虫的作用 | 第44-45页 |
| 1.7.3 Bt抗癌作用的展望 | 第45页 |
| 1.8 立题依据和意义 | 第45-47页 |
| 第二章 Cry1Ac5蛋白的分析和突变位点确定 | 第47-61页 |
| 2.1 材料和方法 | 第47-49页 |
| 2.1.1 Cry1Ac5蛋白序列 | 第47页 |
| 2.1.2 软件和数据库 | 第47页 |
| 2.1.3 分析方法 | 第47-49页 |
| 2.2 结果与分析 | 第49-59页 |
| 2.2.1 Cry1Ac5蛋白与其它Cry1A蛋白的比较 | 第49-52页 |
| 2.2.2 三维结构特征 | 第52-54页 |
| 2.2.3 Cry1Ac5蛋白结构域Ⅲ的特点 | 第54-57页 |
| 2.2.4 β20-β21 loop在Cry1Ac5蛋白三维结构中的位置 | 第57页 |
| 2.2.5 β20-β21 loop的特点及作用 | 第57-58页 |
| 2.2.6 Cry1Ac5与其它Cry蛋白的β20-β21 loop比较 | 第58-59页 |
| 2.3 讨论 | 第59-60页 |
| 2.4 小结 | 第60-61页 |
| 第三章 Cry1Ac5蛋白β20-β21 loop丙氨酸扫描突 | 第61-90页 |
| 3.1 材料与方法 | 第62-72页 |
| 3.1.1 材料 | 第62-68页 |
| 3.1.2 方法 | 第68-72页 |
| 3.2 结果与分析 | 第72-86页 |
| 3.2.1 Cry1Ac蛋白的丙氨酸扫描突变 | 第72-75页 |
| 3.2.2 突变子表达载体的构建 | 第75-78页 |
| 3.2.3 突变子在cry-B宿主菌中的表达 | 第78-81页 |
| 3.2.4 突变株生物活性测定分析 | 第81-82页 |
| 3.2.5 软件分析 | 第82-86页 |
| 3.3 讨论 | 第86-88页 |
| 3.3.1 PCP定点突变原理 | 第86-87页 |
| 3.3.2 突变效果 | 第87页 |
| 3.3.3 突变前后的变化 | 第87-88页 |
| 3.4 小结 | 第88-90页 |
| 第四章 I585的定点突变及其功能分析 | 第90-110页 |
| 4.1 材料与方法 | 第90-93页 |
| 4.1.1 材料 | 第90-92页 |
| 4.1.2 方法 | 第92-93页 |
| 4.2 结果与分析 | 第93-107页 |
| 4.2.1 I585在Cry1Ac5三维结构中的作用 | 第93-94页 |
| 4.2.2 突变子的测序结果分析 | 第94-96页 |
| 4.2.3 I585突变子镜检和SDS-PAGE验分析 | 第96-98页 |
| 4.2.4 生测分析 | 第98-101页 |
| 4.2.5 毒蛋白的纯化 | 第101-102页 |
| 4.2.6 稳定性分析 | 第102-103页 |
| 4.2.7 突变前后结构变化比较 | 第103-105页 |
| 4.2.8 I585A与野生Cry1Ac晶体的形态比较 | 第105-106页 |
| 4.2.9 荧光光谱分析 | 第106-107页 |
| 4.3 讨论 | 第107-109页 |
| 4.3.1 I585 在Cry1Ac5蛋白中的作用 | 第107-108页 |
| 4.3.2 I585 突变稳定性和杀虫活性之间的联系 | 第108页 |
| 4.3.3 I585A增强蛋白稳定性的意义 | 第108-109页 |
| 4.4 小结 | 第109-110页 |
| 第五章 主要结论和今后的研究设想 | 第110-112页 |
| 5.1 本研究的主要结论 | 第110页 |
| 5.2 本研究的创新点和科学意义 | 第110-111页 |
| 5.3 下一步的研究设想 | 第111-112页 |
| 参考文献 | 第112-132页 |
| 攻读博士学位期间撰写和发表的论文 | 第132-134页 |
| 致谢 | 第134页 |
