| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 英文略词与译名 | 第7-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-26页 |
| 1.1 研究目的和意义 | 第13-16页 |
| 1.1.1 蛋白酶及其分类 | 第13-15页 |
| 1.1.2 蛋白酶的来源 | 第15页 |
| 1.1.3 蛋白酶的应用 | 第15-16页 |
| 1.2 蛋白酶的研究现状及进展 | 第16-24页 |
| 1.2.1 微生物蛋白酶研究进展 | 第16-19页 |
| 1.2.2 植物蛋白酶研究进展 | 第19页 |
| 1.2.3 蛋白酶基因克隆表达研究进展 | 第19-20页 |
| 1.2.4 蛋白酶在食品工业的应用研究进展 | 第20-24页 |
| 1.3 本课题研究的内容和目标 | 第24-26页 |
| 1.3.1 研究内容 | 第24-25页 |
| 1.3.2 研究目标 | 第25-26页 |
| 第二章 植物蛋白酶的筛选及猕猴桃蛋白酶的纯化、性质和应用研究 | 第26-48页 |
| 2.1 前言 | 第26-27页 |
| 2.2 材料与方法 | 第27-31页 |
| 2.2.1 主要仪器和试剂 | 第27页 |
| 2.2.2 植物样品来源及处理 | 第27-28页 |
| 2.2.3 蛋白酶活力、凝乳酶活力及蛋白含量测定 | 第28页 |
| 2.2.4 SDS-PAGE、蛋白酶酶谱及肽段分析 | 第28页 |
| 2.2.5 猕猴桃蛋白酶Actinidin的分离纯化 | 第28-29页 |
| 2.2.6 猕猴桃蛋白酶Actinidin的分子量测定 | 第29页 |
| 2.2.7 猕猴桃蛋白酶Actinidin的最适pH及pH稳定性 | 第29页 |
| 2.2.8 猕猴桃蛋白酶Actinidin的最适温度及温度稳定性 | 第29-30页 |
| 2.2.9 金属离子及化合物对猕猴桃蛋白酶Actinidin活力的影响 | 第30页 |
| 2.2.10 蛋白酶抑制剂对猕猴桃蛋白酶Actinidin活力的影响 | 第30页 |
| 2.2.11 猕猴桃蛋白酶Actinidin的底物特异性 | 第30页 |
| 2.2.12 猕猴桃蛋白酶Actinidin对猪肉和兔肉嫩化效果的研究 | 第30-31页 |
| 2.2.13 猕猴桃蛋白酶Actinidin在ACE抑制肽制备中的应用 | 第31页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第31-46页 |
| 2.3.1 植物蛋白酶的筛选 | 第31-35页 |
| 2.3.2 五种植物样品提取液SDS-PAGE、酶谱、蛋白类型及肽段分析 | 第35-37页 |
| 2.3.3 七个品种猕猴桃提取液活性测定和蛋白分析 | 第37-38页 |
| 2.3.4 猕猴桃蛋白酶Actinidin的分离纯化 | 第38-39页 |
| 2.3.5 猕猴桃蛋白酶Actinidin的分子量测定 | 第39页 |
| 2.3.6 猕猴桃蛋白酶Actinidin的最适pH及pH稳定性 | 第39页 |
| 2.3.7 猕猴桃蛋白酶Actinidin的最适温度及温度稳定性 | 第39-40页 |
| 2.3.8 金属离子及化合物对猕猴桃蛋白酶Actinidin酶活力的影响 | 第40-41页 |
| 2.3.9 蛋白酶抑制剂对猕猴桃蛋白酶Actinidin酶活力的影响 | 第41-42页 |
| 2.3.10 猕猴桃蛋白酶Actinidin的底物特异性 | 第42-43页 |
| 2.3.11 猕猴桃蛋白酶Actinidin对猪肉和兔肉的嫩化效果 | 第43-44页 |
| 2.3.12 猕猴桃蛋白酶Actinidin在ACE抑制肽制备中的应用 | 第44-46页 |
| 2.4 本章小结 | 第46-48页 |
| 第三章 铜绿假单胞菌产蛋白酶条件的优化、酶的纯化、性质和应用研究 | 第48-71页 |
| 3.1 前言 | 第48页 |
| 3.2 材料与方法 | 第48-52页 |
| 3.2.1 主要仪器和试剂 | 第48-49页 |
| 3.2.2 培养基与培养方法 | 第49页 |
| 3.2.3 铜绿假单胞菌菌株的分离和鉴定 | 第49-50页 |
| 3.2.4 铜绿假单胞菌CAU342A产蛋白酶发酵条件的优化 | 第50页 |
| 3.2.5 蛋白酶活力、蛋白含量、SDS-PAGE及酶谱分析 | 第50-51页 |
| 3.2.6 蛋白酶PaproA的分离纯化 | 第51页 |
| 3.2.7 蛋白酶PaproA的分子量测定 | 第51页 |
| 3.2.8 蛋白酶PaproA的最适pH及pH稳定性 | 第51页 |
| 3.2.9 蛋白酶PaproA的最适温度及温度稳定性 | 第51页 |
| 3.2.10 金属离子及化合物对蛋白酶PaproA活性的影响 | 第51页 |
| 3.2.11 蛋白酶抑制剂对蛋白酶PaproA活性的影响 | 第51页 |
| 3.2.12 蛋白酶PaproA的底物特异性 | 第51-52页 |
| 3.2.13 蛋白酶PaproA在ACE抑制肽制备中的应用 | 第52页 |
| 3.2.14 蛋白酶PaproA在配制酱油制备中的应用 | 第52页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第52-70页 |
| 3.3.1 铜绿假单胞菌CAU342A的分离与鉴定 | 第52-54页 |
| 3.3.2 铜绿假单胞菌CAU342A产蛋白酶发酵条件的优化 | 第54-61页 |
| 3.3.3 铜绿假单胞菌CAU342A粗酶液的SDS-PAGE及酶谱分析 | 第61-62页 |
| 3.3.4 蛋白酶PaproA的分离纯化 | 第62-63页 |
| 3.3.5 蛋白酶PaproA的分子量测定 | 第63页 |
| 3.3.6 蛋白酶PaproA的性质测定 | 第63-67页 |
| 3.3.7 蛋白酶PaproA在ACE抑制肽制备中的应用 | 第67-68页 |
| 3.3.8 蛋白酶PaproA在配制酱油制备中的应用 | 第68-70页 |
| 3.4 本章小结 | 第70-71页 |
| 第四章 米黑根毛霉蛋白酶基因的克隆表达、纯化、性质和应用研究 | 第71-90页 |
| 4.1 前言 | 第71-72页 |
| 4.2 材料与方法 | 第72-78页 |
| 4.2.1 主要仪器和试剂 | 第72页 |
| 4.2.2 菌株和质粒 | 第72页 |
| 4.2.3 培养基 | 第72-73页 |
| 4.2.4 米黑根毛霉CAU432总RNA的提取和基因组DNA的提取 | 第73页 |
| 4.2.5 米黑根毛霉CAU432总mRNA的提取及cDNA第一链合成 | 第73-74页 |
| 4.2.6 蛋白酶基因RmproA的克隆和序列分析 | 第74页 |
| 4.2.7 蛋白酶基因RmproA在毕赤酵母(Pichia.pastoris)中的表达 | 第74-77页 |
| 4.2.8 菌体密度、酶活力及蛋白含量的测定 | 第77页 |
| 4.2.9 SDS-PAGE、去糖基化检测及酶谱分析 | 第77页 |
| 4.2.10 重组蛋白酶RmproA的纯化 | 第77页 |
| 4.2.11 重组蛋白酶RmproA分子量的测定 | 第77页 |
| 4.2.12 重组蛋白酶RmproA的最适pH及pH稳定性 | 第77页 |
| 4.2.13 重组蛋白酶RmproA的最适温度及温度稳定性 | 第77-78页 |
| 4.2.14 金属离子及化合物对重组蛋白酶RmproA酶活力的影响 | 第78页 |
| 4.2.15 蛋白酶抑制剂对重组蛋白酶RmproA酶活力的影响 | 第78页 |
| 4.2.16 重组蛋白酶RmproA的底物特异性及对酪蛋白的水解特性 | 第78页 |
| 4.2.17 重组蛋白酶RmproA在猪肉嫩化中的应用 | 第78页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第78-89页 |
| 4.3.1 蛋白酶基因RmproA的克隆 | 第78-79页 |
| 4.3.2 蛋白酶基因RmproA在毕赤酵母(P.pastoris)中的表达 | 第79-82页 |
| 4.3.3 重组蛋白酶RmproA的纯化 | 第82-83页 |
| 4.3.4 重组蛋白酶RmproA的分子量测定 | 第83-84页 |
| 4.3.5 重组蛋白酶RmproA的最适pH及pH稳定性 | 第84页 |
| 4.3.6 重组蛋白酶RmproA的最适温度及温度稳定性 | 第84-85页 |
| 4.3.7 金属离子及化合物对重组蛋白酶RmproA酶活力的影响 | 第85-86页 |
| 4.3.8 蛋白酶抑制剂对重组蛋白酶RmproA酶活力的影响 | 第86页 |
| 4.3.9 重组蛋白酶RmproA的底物特异性及对酪蛋白的水解特性 | 第86-88页 |
| 4.3.10 重组蛋白酶RmproA在猪肉嫩化中的应用 | 第88-89页 |
| 4.4 本章小结 | 第89-90页 |
| 第五章 结论与建议 | 第90-92页 |
| 5.1 结论 | 第90-91页 |
| 5.2 论文创新点 | 第91页 |
| 5.3 建议 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-107页 |
| 附录 | 第107-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |
| 个人简历 | 第112页 |
