| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略词 | 第12-13页 |
| 上篇 文献综述 | 第13-32页 |
| 引言 | 第14-16页 |
| 第一章 黄瓜绿斑驳病毒的研究概况 | 第16-20页 |
| ·黄瓜绿斑驳花叶病毒的生物学特性 | 第16页 |
| ·黄瓜绿斑驳花叶病基因组结构和功能 | 第16-17页 |
| ·黄瓜绿斑驳花叶病毒的检测方法 | 第17-20页 |
| ·生物学鉴定 | 第17页 |
| ·电镜观察 | 第17-18页 |
| ·血清学鉴定 | 第18页 |
| ·分子生物学方法 | 第18-20页 |
| 第二章 环介导等温扩增(LAMP)的研究概况 | 第20-24页 |
| ·LAMP的原理 | 第20-23页 |
| ·引物设计 | 第20-21页 |
| ·LAMP扩增过程 | 第21-23页 |
| ·反应结果判定 | 第23页 |
| ·RT-LAMP的运用 | 第23-24页 |
| 第三章 番茄斑萎病毒的研究概况 | 第24-28页 |
| ·番茄斑萎病毒的生物学特性 | 第24页 |
| ·番茄斑萎病毒的基因组结构 | 第24-25页 |
| ·番茄斑萎病毒的检测方法 | 第25-28页 |
| ·电子显微镜检测 | 第25页 |
| ·血清学检测技术 | 第25-26页 |
| ·分子生物学技术检测 | 第26-28页 |
| 第四章 胶体金免疫层析的研究概况 | 第28-32页 |
| ·胶体金免疫层析技术的原理和分类 | 第28-31页 |
| ·胶体金的制备 | 第28-29页 |
| ·胶体金标记蛋白的原理 | 第29-30页 |
| ·胶体金免疫技术的主要模式 | 第30-31页 |
| ·免疫胶体金试纸条的应用 | 第31-32页 |
| 下篇 研究内容 | 第32-96页 |
| 第五章 黄瓜绿斑驳花叶病毒的RT-LAMP检测 | 第34-56页 |
| ·试验材料、试剂及器材 | 第35-36页 |
| ·试验材料 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| ·试验器材 | 第35-36页 |
| ·试验方法 | 第36-41页 |
| ·黄瓜绿斑驳花叶病毒RT-LAMP引物的设计 | 第36页 |
| ·RNA的提取 | 第36-37页 |
| ·RT-PCR反应 | 第37-38页 |
| ·RT-LAMP反应 | 第38页 |
| ·反应条件的优化 | 第38-40页 |
| ·荧光染料方法检测RT-LAMP扩增产物 | 第40页 |
| ·特异性试验 | 第40页 |
| ·RT-LAMP RT-PCR灵敏性比较 | 第40页 |
| ·RT-LAMP检测西瓜种子 | 第40-41页 |
| ·实验结果 | 第41-52页 |
| ·CGMMV RT-LAMP引物的设计和验证 | 第41-42页 |
| ·反应条件优化结果 | 第42-48页 |
| ·快速提取总RNA做RT-LAMP | 第48-49页 |
| ·CGMMV RT-LAMP特异性试验结果 | 第49-50页 |
| ·CGMMV RT-LAMP可视化检测 | 第50-51页 |
| ·CGMMV RT-LAMP灵敏度试验 | 第51页 |
| ·CGMMV RT-LAMP检测西瓜种子 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| ·小结 | 第53-56页 |
| 第六章 番茄斑萎病毒的免疫层析试纸条 | 第56-94页 |
| ·试验材料、试剂及器材 | 第57页 |
| ·试验材料 | 第57页 |
| ·试验试剂 | 第57页 |
| ·主要仪器 | 第57页 |
| ·试验方法 | 第57-81页 |
| ·病毒RNA提取 | 第57-58页 |
| ·引物设计和表达载体构建 | 第58-64页 |
| ·重组载体原核表达 | 第64-67页 |
| ·多克隆抗体制备 | 第67页 |
| ·单克隆抗体制备 | 第67-71页 |
| ·融合细胞的选择性培养 | 第71-72页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的克隆化及建株 | 第72-73页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存和复苏 | 第73页 |
| ·单抗的大量制备和纯化 | 第73-76页 |
| ·免疫层析试纸条的制作 | 第76-80页 |
| ·胶体金免疫层析试纸条成品的检验 | 第80-81页 |
| ·实验结果 | 第81-91页 |
| ·pET28a-TSWV N表达载体的构建和原核表达 | 第81-82页 |
| ·抗血清的制备与ELISA测定效价 | 第82-83页 |
| ·Western blot的鉴定结果 | 第83页 |
| ·TSWV单克隆抗体亚型的确定 | 第83-84页 |
| ·胶体金制备的结果鉴定 | 第84-85页 |
| ·最佳抗体标计量的确定 | 第85-86页 |
| ·试纸条检测线优化结果 | 第86-87页 |
| ·试纸条质控线检测结果 | 第87-88页 |
| ·特异性试验 | 第88-89页 |
| ·灵敏度试验 | 第89-90页 |
| ·田间样品的快速检测 | 第90-91页 |
| ·讨论 | 第91-92页 |
| ·小结 | 第92-94页 |
| 第七章 全文总结 | 第94-96页 |
| ·总结 | 第94-95页 |
| ·本研究的创新点 | 第95-96页 |
| ·RT-LAMP检测黄瓜绿斑驳花叶病毒创新点 | 第95页 |
| ·免疫层析试纸条检测番茄斑萎病毒的创新点 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-102页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及专利 | 第102-104页 |
| 致谢 | 第104页 |