| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 综述 | 第9-19页 |
| 1 引言 | 第9-10页 |
| 2 DNA甲基化 | 第10-11页 |
| 3 DNA甲基化的研究方法 | 第11-14页 |
| ·甲基化敏感的限制性内切酶方法 | 第11-12页 |
| ·亚硫酸氢盐法 | 第12-13页 |
| ·甲基化特异PCR法(MSP) | 第12页 |
| ·DNA甲基化荧光PCR检测 | 第12-13页 |
| ·结合亚硫酸氢盐处理的酶解分析法(CO-BRA) | 第13页 |
| ·甲基化敏感性高分辨率熔解(MS-HRM) | 第13页 |
| ·甲基化敏感的单核苷酸的扩增(Ms-SnuPE) | 第13页 |
| ·甲基化检测芯片技术 | 第13-14页 |
| ·差式甲基化杂交法(DMH) | 第14页 |
| ·甲基化特异性寡核苷酸芯片(methylation specific oligonucleotide microarray,MSO microarray) | 第14页 |
| ·高效液相色谱(HPLC)法 | 第14页 |
| 4 DNA甲基化对基因表达的调控 | 第14-15页 |
| 5 DNA甲基化在水产动物育种中的应用 | 第15-16页 |
| ·甲基化敏感扩增多态性技术在水产动物上的应用 | 第15页 |
| ·DNA甲基化与杂种优势 | 第15-16页 |
| ·DNA甲基化与分子标记 | 第16页 |
| 6 国内外研究进展 | 第16-18页 |
| 7 本课题的研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 第二章 Dmrt、Sox、Vasa基因克隆及甲基化序列分析 | 第19-37页 |
| 1 实验材料 | 第19页 |
| ·实验动物 | 第19页 |
| ·实验仪器 | 第19页 |
| ·实验试剂 | 第19页 |
| 2 实验方法 | 第19-24页 |
| ·总DNA的提取 | 第19页 |
| ·引物设计 | 第19-22页 |
| ·Dmrt基因的引物设计 | 第20-21页 |
| ·Sox基因的引物设计 | 第21页 |
| ·Vasa基因的引物设计 | 第21-22页 |
| ·黄鳝性别相关基因的酶切 | 第22页 |
| ·黄鳝性别相关基因酶切产物的扩增 | 第22-23页 |
| ·扩增产物电泳分离 | 第23-24页 |
| 3 实验结果 | 第24-33页 |
| ·Dmrt基因的甲基化分析 | 第24-28页 |
| ·黄鳝各组织中Dmrt2基因的酶切结果 | 第24-25页 |
| ·黄鳝各组织中Dmrt3基因的酶切结果 | 第25-26页 |
| ·黄鳝各组织中Dmrt4基因的酶切结果 | 第26-27页 |
| ·黄鳝Dmrt基因的甲基化分析 | 第27-28页 |
| ·Sox基因的甲基化分析 | 第28-31页 |
| ·黄鳝各组织中Sox9a1基因的酶切结果 | 第28-29页 |
| ·黄鳝各组织中Sox17基因的酶切结果 | 第29-31页 |
| ·黄鳝Sox基因的甲基化分析 | 第31页 |
| ·Vasa基因的甲基化分析 | 第31-33页 |
| ·黄鳝各组织中Vasa基因的酶切结果 | 第31-32页 |
| ·黄鳝Vasa基因的甲基化分析 | 第32-33页 |
| 4 分析与讨论 | 第33-36页 |
| 5 小结 | 第36-37页 |
| 第三章 黄鳝Dmrt3基因在雌雄性腺中的甲基化差异 | 第37-43页 |
| 1 实验材料 | 第37页 |
| ·实验动物 | 第37页 |
| ·实验仪器 | 第37页 |
| ·实验试剂 | 第37页 |
| 2 实验方法 | 第37-39页 |
| ·精巢和卵巢总DNA的提取 | 第38页 |
| ·精巢和卵巢Dmrt3-FR2的酶切 | 第38页 |
| ·精巢和卵巢Dmrt3-FR2酶切产物的扩增 | 第38-39页 |
| ·扩增产物电泳分离 | 第39页 |
| 3 实验结果 | 第39-40页 |
| 4 分析与讨论 | 第40-41页 |
| 5 小结 | 第41-43页 |
| 全文总结 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 致谢 | 第49-51页 |
| 科研情况 | 第51页 |
