摘要 | 第1-5页 |
abstract | 第5-6页 |
英文缩写汇总表 | 第6-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-24页 |
·菊糖 | 第10-11页 |
·菊糖的简介 | 第10页 |
·菊糖的功能与应用 | 第10-11页 |
·菊粉酶 | 第11-15页 |
·菊粉酶简介 | 第11-12页 |
·菊粉酶来源 | 第12页 |
·菊粉酶特性 | 第12-13页 |
·菊粉酶分子生物学特性 | 第13-15页 |
·环果寡糖糖基转移酶 | 第15-20页 |
·环果寡糖糖基转移酶简介 | 第15-16页 |
·环果寡糖糖基转移酶性质 | 第16-17页 |
·环果寡糖糖基转移酶异源表达 | 第17-20页 |
·环果寡糖 | 第20-23页 |
·环果寡糖简介 | 第20页 |
·环果寡糖的结构 | 第20-22页 |
·环果寡糖的研究现状及应用前景 | 第22-23页 |
·本课题研究意义 | 第23-24页 |
第二章 材料与方法 | 第24-39页 |
·菌株与质粒 | 第24页 |
·培养基 | 第24页 |
·试剂 | 第24-26页 |
·主要实验试剂 | 第24-25页 |
·配置试剂 | 第25-26页 |
·缓冲液 | 第25页 |
·SDS-PAGE电泳所需试剂 | 第25-26页 |
·引物 | 第26-27页 |
·实验方法 | 第27-39页 |
·类芽孢杆菌(Paenibacillus sp.)Lfos16的培养 | 第27页 |
·类芽孢杆菌(Paenibacillus sp.)Lfos16基因组的提取 | 第27-28页 |
·DNA的 1%琼脂糖凝胶电泳 | 第28页 |
·环果寡糖糖基转移酶基因PCR扩增 | 第28-33页 |
·环果寡糖糖基转移酶基因特异引物扩增 | 第28-29页 |
·%DNA琼脂糖凝胶切胶纯化回收 | 第29页 |
·环果寡糖糖基转移酶PCR产物的亚克隆 | 第29-30页 |
·环果寡糖糖基转移酶基因两翼序列的TAIL PCR扩增 | 第30-32页 |
·环果寡糖糖基转移酶基因两翼序列的SEFA PCR扩增 | 第32-33页 |
·环果寡糖糖基转移酶CFT-pET28a(+)载体构建 | 第33-36页 |
·pCFT150(BL 21) 重组菌的诱导表达及活性测定 | 第36-37页 |
·pCFT150(BL 21) 重组菌的诱导表达及产物的SDS-PAGE分析 | 第36页 |
·pCFT150重组菌的活性测定 | 第36-37页 |
·pCFT150重组蛋白与野生菌蛋白酶活性比较 | 第37页 |
·CFTase基因截短表达及各部分基因功能测定 | 第37-39页 |
·CFTase基因截短表达 | 第37-38页 |
·CFTase部分基因功能测定 | 第38-39页 |
第三章 结果与讨论 | 第39-58页 |
·Lfos16基因组提取 | 第39-40页 |
·环果寡糖糖基转移酶编码基因PCR的扩增及鉴定 | 第40-44页 |
·环果寡糖糖基转移酶编码基因特异引物扩增结果 | 第40页 |
·环果寡糖糖基转移酶基因两翼序列的TAIL PCR扩增结果及鉴定 | 第40-41页 |
·环果寡糖糖基转移酶基因两翼序列的SEFA PCR扩增结果及鉴定 | 第41-42页 |
·环果寡糖糖基转移酶序列的分析 | 第42-44页 |
·环果寡糖糖基转移酶原核表达载体构建 | 第44-46页 |
·环果寡糖糖基转移酶全长序列扩增及表达载体构建 | 第44-45页 |
·环果寡糖糖基转移酶表达重组质粒鉴定 | 第45-46页 |
·环果寡糖糖基转移酶的诱导表达及活性测定 | 第46-48页 |
·环果寡糖糖基转移酶的诱导表达SDS-PAGE电泳分析 | 第46-47页 |
·环果寡糖糖基转移酶的诱导表达酶作用产物检测 | 第47-48页 |
·环果寡糖糖基转移酶活性测定 | 第48页 |
·环果寡糖糖基转移酶截短表达 | 第48-58页 |
·环果寡糖糖基转移酶截短基因序列扩增 | 第48-50页 |
·环果寡糖糖基转移酶截短序列的诱导表达及SDS-PAGE电泳分析 | 第50-51页 |
·环果寡糖糖基转移酶截短部分基因功能测定 | 第51-56页 |
·环果寡糖糖基转移酶截短序列的诱导表达酶与不同底物作用TLC分析 | 第51-54页 |
·环果寡糖糖基转移酶截短序列的诱导表达酶与不同底物作用HPLC分析 | 第54-56页 |
·CFTase部分基因功能预测 | 第56-58页 |
第四章 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-62页 |
致谢 | 第62页 |