| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略语表（Abbreviation） | 第12-13页 |
| 1. 文献综述 | 第13-25页 |
| ·革兰氏阴性菌蛋白质分泌系统的概述 | 第13-15页 |
| ·Ⅵ型分泌系统的研究进展 | 第15-22页 |
| ·Ⅵ型分泌系统的概述 | 第15-19页 |
| ·类噬菌体的注射器样结构 | 第16-18页 |
| ·膜复合体 | 第18页 |
| ·伴侣分子 | 第18-19页 |
| ·Ⅵ型分泌系统的调控 | 第19页 |
| ·Ⅵ型分泌系统功能的研究进展 | 第19-21页 |
| ·致病性 | 第20页 |
| ·减毒性 | 第20页 |
| ·抗菌因子——介导细菌间的竞争 | 第20-21页 |
| ·水平转移获得基因 | 第21页 |
| ·支气管败血波氏杆菌Ⅵ型分泌系统的研究进展 | 第21-22页 |
| ·支气管败血波氏杆菌的研究进展 | 第22-25页 |
| ·病原学简介 | 第22页 |
| ·致病性 | 第22-23页 |
| ·临床症状 | 第23页 |
| ·临床防治 | 第23-25页 |
| 2. 研究目的和意义 | 第25-26页 |
| 3. 材料与方法 | 第26-37页 |
| ·材料 | 第26-30页 |
| ·菌株、质粒、细胞 | 第26-28页 |
| ·酶及其它试剂 | 第28页 |
| ·主要培养基及试剂配制 | 第28-30页 |
| ·试验动物 | 第30页 |
| ·PCR引物 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-37页 |
| ·细菌培养与分子生物学基本操作 | 第30-31页 |
| ·支气管败血波氏杆菌Hcp蛋白的表达及鉴定 | 第31-33页 |
| ·hcp基因的克隆与重组表达质粒的构建 | 第31页 |
| ·Hcp蛋白的表达、鉴定 | 第31-32页 |
| ·蛋白表达条件的优化 | 第32页 |
| ·表达蛋白的纯化 | 第32页 |
| ·Hcp蛋白多克隆抗体的制备 | 第32-33页 |
| ·蛋白Western Blot验证 | 第33页 |
| ·支气管败血波氏杆菌缺失株QH0814Δhcp的构建 | 第33-35页 |
| ·支气管败血波氏杆菌的PCR鉴定 | 第33页 |
| ·目的基因上下游DNA序列的克隆 | 第33-34页 |
| ·重组自杀性质粒pREΔhcp的构建与鉴定 | 第34页 |
| ·缺失株QH0814Δhcp的构建与鉴定 | 第34-35页 |
| ·缺失株QH0814Δhcp生物学特性分析 | 第35-36页 |
| ·生长特性 | 第35页 |
| ·细胞吞噬实验 | 第35页 |
| ·细胞粘附入侵实验 | 第35-36页 |
| ·小鼠半数致死量（LD50）的测定 | 第36页 |
| ·小鼠组织载菌量实验 | 第36页 |
| ·统计学分析 | 第36-37页 |
| 4. 结果与分析 | 第37-44页 |
| ·支气管败血波氏杆菌Ⅵ型分泌系统基因序列分析 | 第37页 |
| ·支气管败血波氏杆菌Hcp蛋白的表达及鉴定 | 第37-39页 |
| ·支气管败血波氏杆菌hcp基因的克隆以及重组表达质粒的构建 | 第37-38页 |
| ·Hcp蛋白原核表达与纯化的鉴定 | 第38-39页 |
| ·Western Blot验证表达 | 第39页 |
| ·支气管败血波氏杆菌缺失株QH0814Δhcp的构建 | 第39-41页 |
| ·Ⅵ型分泌系统hcp基因上下游DNA序列的克隆 | 第39页 |
| ·重组自杀性质粒pRE-Δhcp的构建及鉴定 | 第39-40页 |
| ·缺失株QH0814Δhcp的构建及鉴定 | 第40-41页 |
| ·缺失株QH0814Δhcp生物学特性分析 | 第41-44页 |
| ·生长特性 | 第41页 |
| ·细胞吞噬实验 | 第41-42页 |
| ·细胞粘附入侵实验 | 第42页 |
| ·小鼠半数致死量（LD50）的测定 | 第42-43页 |
| ·小鼠体内组织载菌量比较 | 第43-44页 |
| 5. 讨论 | 第44-46页 |
| 6. 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-55页 |
| 附录 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
