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小苍兰ACC合成酶基因FhACS1的克隆及其表达特征

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
英文缩写词表第7-12页
1 引言第12-25页
   ·乙烯与切花衰老的研究进展第12-17页
     ·乙烯概述第12页
     ·乙烯的作用途径及其与切花衰老关系第12-13页
     ·外源化学物质与乙烯的交互作用和对切花衰老的影响第13-16页
     ·环境条件对切花乙烯生成以及衰老的影响第16-17页
   ·ACC合成酶基因(ACS)的研究进展第17-23页
     ·乙烯的生物合成途径第17-18页
     ·ACC合成酶(ACS)(?)特性第18-19页
     ·ACC合成酶基因(ACS)的克隆及序列特性第19-20页
     ·ACS基因表达的诱导因子第20-21页
     ·ACS基因的表达特征第21-22页
     ·ACS基因在植物基因工程中的应用第22-23页
   ·研究的目的和意义第23-25页
     ·目的和意义第23页
     ·技术路线第23-25页
2 材料与方法第25-43页
   ·材料与试剂第25-27页
     ·植物材料第25页
     ·菌种与载体第25页
     ·试剂及试剂盒第25-26页
     ·主要仪器设备第26页
     ·PCR引物序列第26-27页
   ·小苍兰ACC合成酶基因FhACS1的克隆第27-35页
     ·小苍兰DNA、RNA提取以及FhACS1基因中间片段的分离第27-30页
     ·FhACSl基因3'和5'末端序列克隆第30-31页
     ·FhACS1基因DNA全长的克隆第31-32页
     ·FhACS1基因CDS序列的克隆第32-34页
     ·FhACS1基因DNA和蛋白序列的生物信息分析第34-35页
   ·FhACS1基因在小苍兰基因组中的拷贝数分析第35-38页
     ·CTAB法大量粗提小苍兰花瓣总DNA第35页
     ·DNA的纯化第35-36页
     ·基因组总DNA的酶切消化和电泳分离第36页
     ·转膜印迹第36-37页
     ·探针标记第37页
     ·预杂交和杂交第37页
     ·洗膜第37-38页
   ·小苍兰FhACS1基因的表达特征研究第38-43页
     ·材料处理与采样第38-41页
     ·样品总RNA的提取和eDNA的获得第41页
     ·FhACS1基因及内参基因引物设计第41页
     ·FhACS1基因及内参基因标准曲线的制作第41页
     ·样品中FhACS1基因的定量分析(Real-time PCR)第41-42页
     ·Real-time PCR数据处理第42-43页
3 结果与分析第43-76页
   ·小苍兰ACC合成酶基因FhACSl的分离第43-48页
     ·FhACS1基因中间片断序列第43-44页
     ·FhACS1基因3'端序列第44-45页
     ·FhACS1基因5'端序列第45-46页
     ·FhACS1基因DNA全长第46-47页
     ·FhACS1基因的CDS序列第47-48页
   ·小苍兰FhACS1基因的生物信息分析第48-53页
     ·FhACS1基因的序列分析第49-50页
     ·FhACS1基因推导蛋白结构分析第50-52页
     ·分子进化树分析第52-53页
   ·FhACS1基因在小苍兰基因组中的拷贝数第53-54页
   ·小苍兰FhACS1基因的表达特征分析第54-76页
     ·目的基因及内参基因的标准曲线第54-55页
     ·FhACS1基因在小苍兰不同发育等级花朵中的表达特征第55-56页
     ·FhACS1基因在整朵花、花瓣、雄蕊、雌蕊中的表达特征第56-57页
     ·瓶插期间FhACS1基因在不同花朵器官中的表达模式第57-61页
     ·FhACS1基因在乙烯利诱导下的表达模式第61-65页
     ·FhACS1基因在IAA诱导下的表达模式第65-66页
     ·FhACS1基因在6-BA诱导下的表达模式第66-68页
     ·FhACS1基因在蔗糖诱导下的表达模式第68-69页
     ·FhACS1基因在STS诱导下的表达模式第69-74页
     ·FhACS1基因在干旱和低温环境中的表达特征第74-76页
4 讨论和总结第76-85页
   ·FhACS1基因的特征分析第76页
   ·FhACS1基因在花朵中的时空表达特征第76-78页
     ·在不同发育等级花朵和不同花朵器官中的表达特征第76-77页
     ·瓶插期间在不同花朵器官中的表达特征第77-78页
   ·FhACS1基因的诱导表达模式第78-81页
     ·乙烯利对花朵FhACS1基因表达的影响第78-79页
     ·IAA对花朵FhACS1基因表达的影响第79-80页
     ·6-BA对花朵FhACS1基因表达的影响第80页
     ·蔗糖对花朵FhACS1基因表达的影响第80-81页
     ·STS对花朵FhACS1基因表达的影响第81页
   ·干旱和低温对FhACS1基因表达的影响第81-82页
   ·总结第82-85页
参考文献第85-94页
附录第94-95页
致谢第95-96页
作者简介第96页

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