| 摘要 | 第1-9页 |
| 文献综述 | 第9-18页 |
| 1 传染性法氏囊病概述 | 第9-10页 |
| ·IBDV的基本结构与特征 | 第9页 |
| ·IBDV的基因组及编码蛋白 | 第9-10页 |
| ·编码区 | 第9页 |
| ·IBDV编码五种蛋白 | 第9-10页 |
| 2 中药抗病毒作用机制 | 第10-12页 |
| ·直接杀灭病毒途径 | 第10-11页 |
| ·阻止病毒对宿主细胞的吸附和侵入 | 第11-12页 |
| ·抑制病毒的装配和释放 | 第12页 |
| 3 MAPK信号通路概述 | 第12-18页 |
| ·JNK信号通路 | 第13-14页 |
| ·JNK的生物学特性及功能 | 第13页 |
| ·JNK抑制剂SP600125 | 第13-14页 |
| ·JNK在临床中的研究 | 第14-18页 |
| ·JNK与肿瘤 | 第14页 |
| ·JNK与细胞凋亡 | 第14-15页 |
| ·JNK与抗炎反应 | 第15-16页 |
| ·JNK与病毒 | 第16-18页 |
| 前言 | 第18-19页 |
| 1 试验材料 | 第19-24页 |
| ·试验主要试剂及材料 | 第19页 |
| ·试验试剂的配制 | 第19-21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·试验药物 | 第22-24页 |
| 2. 试验方法 | 第24-34页 |
| ·鸡胚成纤维细胞(Chick Embryo Fibroblasts,CEFs)的制备 | 第24-25页 |
| ·IBDV的制备 | 第25页 |
| ·IBDV病毒的扩增 | 第25页 |
| ·IBDV病毒的收集 | 第25页 |
| ·病毒毒力测定 | 第25页 |
| ·药物的溶解 | 第25页 |
| ·药物的细胞毒性测定 | 第25-26页 |
| ·药物对IBDV病毒感染细胞抑制作用的测定 | 第26页 |
| ·药物对病毒复制的测定 | 第26页 |
| ·重组质粒的制备 | 第26-30页 |
| ·IBDV VP1基因和VP2基因引物的设计 | 第26-27页 |
| ·细胞培养物总RNA的提取 | 第27页 |
| ·RT-PCR(ReverseTranscription-Polymerase Chain Reaction)试验 | 第27-28页 |
| ·PCR体系构建 | 第28页 |
| ·目的基因片段的回收 | 第28-29页 |
| ·目的片段的克隆 | 第29-30页 |
| ·重组质粒的提取及浓度的测定 | 第30页 |
| ·荧光定量PCR检测药物对病毒的拷贝数的影响 | 第30-31页 |
| ·标准曲线的制作 | 第30页 |
| ·荧光定量PCR检测病毒拷贝数 | 第30-31页 |
| ·Western blot 分析 | 第31-34页 |
| ·BD对病毒复制抑制试验总蛋白样品的提取 | 第31页 |
| ·药物对JNK通路抑制试验总蛋白的提取 | 第31-32页 |
| ·BCA法测定蛋白浓度 | 第32页 |
| ·十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第32-34页 |
| ·数据统计分析 | 第34页 |
| 3 结果 | 第34-44页 |
| ·病毒毒力测定结果 | 第34页 |
| ·药物的细胞毒性试验结果 | 第34-37页 |
| ·BD抗病毒感染的抑制试验结果 | 第37-38页 |
| ·BD对病毒复制阻断作用的测定结果 | 第38-39页 |
| ·重组质粒的制备结果 | 第39-40页 |
| ·细胞培养物总RNA提取与检测 | 第39页 |
| ·普通PCR电泳验证VP1和VP2基因的目的片段 | 第39-40页 |
| ·荧光定量PCR检测药物对病毒拷贝数的影响 | 第40-42页 |
| ·VP1和VP2标准曲线的建立 | 第40页 |
| ·VP1和VP2标准品扩增曲线和溶解曲线 | 第40-41页 |
| ·不同时间点BD对IBDV VP1、VP2基因拷贝数的影响 | 第41-42页 |
| ·BCA蛋白浓度测定结果 | 第42-43页 |
| ·Western blot分析结果 | 第43-44页 |
| ·Western blot检测VP1复制结果 | 第43页 |
| ·Western blot检测JNK信号通路的结果 | 第43-44页 |
| 4 分析与讨论 | 第44-47页 |
| ·体外筛选出1种化合物具有抗IBDV作用 | 第44-45页 |
| ·药物对IBDV VP1和VP2基因的合成和VP1蛋白的表达的影响 | 第45-46页 |
| ·药物对IBDV激活的JNK信号通路的影响 | 第46-47页 |
| 5 全文总结 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| Abstract | 第55-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
