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通过表达特异定位贮藏蛋白提高木薯蛋白质水平的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
主要符号缩写表第10-12页
第一章 绪论第12-20页
   ·木薯简介第12-14页
     ·木薯的生物学特性第12-13页
     ·木薯的起源与发展第13页
     ·木薯的综合营养组分第13-14页
   ·贮藏蛋白第14-16页
     ·贮藏蛋白的种类第14-15页
     ·甘薯贮藏蛋白第15-16页
   ·转基因技术在贮藏蛋白的研究概况第16-17页
     ·外源贮藏蛋白在非木薯植物中的研究进展第16-17页
     ·外源贮藏蛋白在木薯品质改良中的研究进展第17页
   ·植物淀粉颗粒结合蛋白第17-18页
   ·淀粉结合域SBD第18-19页
   ·本文研究目的意义与应用价值第19-20页
第二章 转基因木薯RV8的检测分析第20-43页
   ·实验材料第20-21页
     ·植物材料第20页
     ·主要仪器第20-21页
     ·限制性内切酶及主要试剂第21页
   ·实验方法第21-33页
     ·引物的设计第21页
     ·木薯试管苗的继代培养第21-22页
     ·木薯植株的移栽第22页
     ·木薯基因组DNA的大量提取(CTAB法)第22页
     ·PCR鉴定阳性植株第22-23页
     ·Southern Blot鉴定转基因木薯的拷贝数第23-27页
     ·RNA的提取第27页
     ·cDNA的制备第27-28页
     ·半定量RT-PCR第28页
     ·Real-Time PCR第28-29页
     ·木薯总蛋白提取第29-30页
     ·蛋白质SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳第30-32页
     ·Western Blot第32页
     ·转基因木薯总蛋白含量的测定第32-33页
   ·结果与分析第33-41页
     ·PCR对阳性植株的检测结果第33-34页
     ·Southern Blot检测结果第34-36页
     ·半定量RT-PCR检测结果第36-37页
     ·Real-Time PCR的检测结果第37-38页
     ·蛋白质SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳第38-39页
     ·Western Blot第39-40页
     ·转基因木薯叶片总蛋白含量的测定结果第40-41页
 本章小结第41-43页
第三章 SBD载体的构建、遗传转化及定位分析第43-69页
   ·实验材料第43-45页
     ·植物材料第43页
     ·供试菌株及供试质粒第43页
     ·抗生素第43页
     ·酶及化学试剂第43页
     ·软件第43页
     ·主要仪器设备第43-44页
     ·培养基第44-45页
   ·实验方法第45-55页
     ·载体的构建第45-54页
     ·农杆菌介导拟南芥的转化第54-55页
     ·农杆菌注射侵染本氏烟第55页
     ·木薯转化子的选择培养和生根试验第55页
   ·实验结果与分析第55-68页
     ·目的小片段的获得第55-58页
     ·序列分析第58-63页
     ·农杆菌中重组质粒的酶切鉴定第63-64页
     ·侵染烟草的瞬时表达第64-65页
     ·农杆菌介导的拟南芥转化后筛选及定位检测第65-66页
     ·转基因木薯的筛选和生根实验第66-68页
   ·本章小结第68-69页
讨论与结论第69-73页
 讨论第69-71页
 结论第71-73页
参考文献第73-80页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第80-81页
致谢第81-82页
附件第82页

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