| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 1 前言 | 第11-32页 |
| ·香蕉概述 | 第11-12页 |
| ·香蕉的分类地位及种类 | 第11页 |
| ·香蕉的生物学特性 | 第11页 |
| ·香蕉的经济价值 | 第11-12页 |
| ·香蕉抗逆品种改良的重要性 | 第12页 |
| ·小G蛋白Ras超家族ROP研究进展 | 第12-31页 |
| ·ROP与G蛋白 | 第12-14页 |
| ·ROP的结构与分类 | 第14-16页 |
| ·ROP的信号通路 | 第16-23页 |
| ·GAP(GTPase activating Proteins,鸟苷酸激活蛋白) | 第17-18页 |
| ·GDI(GDP dissociation inhibitor,鸟苷酸解离抑制因子) | 第18-19页 |
| ·GEF(GDP exchange factor,鸟苷酸转换因子) | 第19-20页 |
| ·ROP上游细胞质膜受体RLK(receptor-like kinase,受体样激酶) | 第20页 |
| ·ROP的下游效应因子 | 第20-23页 |
| ·RIC(ROP-interactive CRIB-containing protein) | 第20-21页 |
| ·脂酰肌醇单磷酸激酶 | 第21页 |
| ·NADPH氧化酶 | 第21-22页 |
| ·尿核苷二磷酸葡萄糖转移酶(UGT1,UDP-glucose transferase) | 第22页 |
| ·乙酰基辅酶A还原酶(CCR,Cinnamoyl-CoA reductase) | 第22页 |
| ·组成型激活ROP互作子(ICR1,Interactor of constitutive activeROP1) | 第22页 |
| ·促分裂原活化蛋白激酶(MAPK,mitogen-activated proteinkinases) | 第22-23页 |
| ·ROP的生物学功能 | 第23-31页 |
| ·ROP调节花粉管生长 | 第23-24页 |
| ·ROP调节根毛发育 | 第24页 |
| ·ROP调控肌动蛋白细胞骨架和细胞极性 | 第24-25页 |
| ·ROP与活性氧 | 第25页 |
| ·ROP与次生壁合成 | 第25页 |
| ·ROP参与植物激素应答 | 第25-26页 |
| ·ROP参与脱落酸负调控 | 第25-26页 |
| ·ROP调节生长素和油菜内酯素 | 第26页 |
| ·ROP与乙烯 | 第26页 |
| ·ROP参与逆境调节 | 第26-31页 |
| ·ROP与非生物胁迫 | 第27-28页 |
| ·ROP与盐胁迫 | 第27页 |
| ·ROP与缺氧胁迫 | 第27页 |
| ·ROP与高温胁迫 | 第27页 |
| ·ROP与冷害胁迫 | 第27-28页 |
| ·ROP与生物胁迫 | 第28-31页 |
| ·ROP与水稻抗病 | 第28-30页 |
| ·ROP与大麦抗病 | 第30-31页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第31-32页 |
| ·技术路线 | 第32页 |
| 2 植物材料、试剂与仪器 | 第32-34页 |
| ·材料 | 第32页 |
| ·试剂 | 第32-33页 |
| ·仪器 | 第33-34页 |
| ·培养基的配制 | 第34页 |
| 3 方法 | 第34-43页 |
| ·MaROP1基因系统发生分析、氨基酸序列比对、功能域分析 | 第34-35页 |
| ·pCAMBIA1302-MaROP1植物表达载体构建 | 第35-37页 |
| ·MaROP1插入片段的获得 | 第35-36页 |
| ·引物的设计 | 第35页 |
| ·目的片段的扩增 | 第35-36页 |
| ·目的片段的回收 | 第36页 |
| ·目的片段的酶切 | 第36页 |
| ·目的片段的再次回收 | 第36页 |
| ·pCAMBIA1302载体的获得 | 第36页 |
| ·目的片段和pCAMBIA1302载体的连接 | 第36-37页 |
| ·大肠杆菌E.coli.DH5a感受态细胞的制备和pCAMBIA1302-MaROP1转化E.coli DH5α | 第37页 |
| ·pCAMBIA1302-MaROP1质粒小量提取 | 第37页 |
| ·pCAMBIA1302-MaROP1质粒酶切和PCR鉴定及测序 | 第37页 |
| ·根癌农杆菌EHA105感受态细胞的制备和pCAMBIA1302-MaROP1转化EHA105 | 第37-38页 |
| ·MaROP1基因转化拟南芥 | 第38-41页 |
| ·拟南芥培养 | 第38页 |
| ·Dip法浸染野生型拟南芥花序 | 第38页 |
| ·转基因拟南芥植株的潮霉素筛选 | 第38-39页 |
| ·T1代抗性苗PCR检测 | 第39页 |
| ·野生型和T1代抗性苗叶片总DNA的微量提取 | 第39页 |
| ·T1代抗性苗PCR检测 | 第39页 |
| ·MaROP1转基因拟南芥的Southern blot检测 | 第39-40页 |
| ·各转基因纯合株系的RT-PCR分析 | 第40-41页 |
| ·野生型和MaROP1转基因型拟南芥叶片总RNA的提取 | 第40页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第40页 |
| ·RT-PCR检测各转基因纯合株系MaROP1基因表达水平 | 第40-41页 |
| ·盐胁迫对野生型和各转基因拟南芥株系的影响 | 第41页 |
| ·NaCl对野生型和各转基因株系种子萌发率的影响 | 第41页 |
| ·NaCl对野生型和各转基因株系根长的影响 | 第41页 |
| ·NaCl处理野生型和MaROP1转基因株系成苗 | 第41页 |
| ·干旱胁迫对野生型各转基因拟南芥株系的影响 | 第41-42页 |
| ·甘露醇对野生型和各转基因株系种子萌发率的影响 | 第41-42页 |
| ·甘露醇对野生型和各转基因纯合根长的影响 | 第42页 |
| ·干旱处理野生型和各转基因株系成苗 | 第42页 |
| ·野生型和各转基因株系叶片离体失水率测定 | 第42页 |
| ·高温胁迫对野生型和各转基因拟南芥株系的影响 | 第42页 |
| ·ABA对野生型和各转基因拟南芥株系的影响 | 第42-43页 |
| ·内源ABA对野生型和MaROP1转基因株系种子萌发的影响 | 第42页 |
| ·外源ABA对野生型和各转基因株系种子萌发率的影响 | 第42-43页 |
| ·外源ABA对野生型和各转基因株系生长情况的影响 | 第43页 |
| ·ACC对野生型和各转基因拟南芥株系根长的影响 | 第43页 |
| 4 结果 | 第43-73页 |
| ·MaROP1基因推导的氨基酸序列结构分析 | 第43-44页 |
| ·MaROP1与拟南芥AtROPs系统发生分析 | 第43页 |
| ·MaROP1与拟南芥AtROP1-6氨基酸序列比对和功能域分析 | 第43-44页 |
| ·pCAMBIA1302-MaROP1植物表达的构建 | 第44-46页 |
| ·pCAMBIA1302-MaROP1转入根癌农杆菌 | 第46-47页 |
| ·MaROP1转拟南芥纯合系的获得 | 第47-52页 |
| ·潮霉素筛选压力的确定 | 第47页 |
| ·T1代抗性苗筛选及PCR检测 | 第47页 |
| ·T2代转基因植株潮霉素筛选的分离 | 第47页 |
| ·T3代转基因纯合系的获得 | 第47-50页 |
| ·MaROP1转基因T3代纯合株系的Southern检测 | 第50-51页 |
| ·RT PCR检测转基因T3纯合株系MaROP1基因的表达 | 第51-52页 |
| ·转基因T3纯合株系表型观测 | 第52-55页 |
| ·野生型和各转基因株系开花期观察 | 第52-53页 |
| ·野生型和各转基因株系叶片数、地上部分鲜重统计 | 第53-55页 |
| ·盐胁迫对野生型和各转基因株系的影响 | 第55-59页 |
| ·干旱胁迫对野生型和各转基因株系的影响 | 第59-64页 |
| ·高温胁迫对野生型和各转基因株系的影响 | 第64-66页 |
| ·ABA对野生型和各转基因拟南芥的影响 | 第66-71页 |
| ·ACC对野生型和各转基因株系的影响 | 第71-73页 |
| 5 讨论 | 第73-75页 |
| ·MaROP1植物表达构建和转化拟南芥 | 第73页 |
| ·MaROP1转基因拟南芥对盐胁迫抵抗能力增强 | 第73-74页 |
| ·MaROP1转基因拟南芥对干旱胁迫抵抗能力增强 | 第74页 |
| ·MaROP1转基因拟南芥降低了对ABA的敏感性 | 第74-75页 |
| 6 结论 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
