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CD133~+CD24~+肝癌干细胞的分离、鉴定及生物学特征的研究

前言第1-6页
中文摘要第6-8页
Abstract第8-15页
中英文缩略词对照表第15-17页
第1章 综述—肝癌第17-25页
   ·肝癌的发病率及病因第17-18页
   ·肝癌的发展过程第18-19页
   ·肝癌细胞中失调的信号通路第19-20页
     ·RAF/MAPK 通路第19-20页
     ·PI3K/AKT/MTOR 信号通路第20页
   ·肝癌的治疗手段第20-25页
     ·手术治疗第20-21页
     ·肝移植第21页
     ·微创治疗第21-22页
     ·化疗第22-23页
     ·靶向治疗第23页
     ·当前治疗手段的局限性第23-25页
第2章 综述—肿瘤干细胞第25-43页
   ·干细胞概述及分类第25-26页
   ·肿瘤干细胞第26-29页
     ·肿瘤干细胞起源第26-27页
     ·肿瘤干细胞假说第27-28页
     ·肿瘤干细胞的特征第28-29页
   ·肿瘤干细胞分离与鉴定的方法第29-33页
     ·免疫磁珠分选法第29-30页
     ·流式细胞仪分选第30页
     ·侧群细胞分选法第30-31页
     ·ALDEFLUOR 分选法第31-32页
     ·细胞表面分子分选第32-33页
   ·肝癌干细胞的微环境第33-34页
   ·调控肝癌干细胞增殖分化的信号通路第34-38页
     ·WNT 信号通路第35-36页
     ·HEDGEHOG 信号通路第36-37页
     ·NOTCH 信号通路第37-38页
     ·PTEN 信号通路第38页
   ·靶向肝癌干细胞的治疗策略第38-41页
     ·针对肿瘤干细胞的分选标志物第38-39页
     ·针对肿瘤干细胞的信号转导路径第39-40页
     ·改变肿瘤干细胞的微环境第40-41页
   ·肿瘤干细胞研究存在的问题第41-43页
第3章 材料与方法第43-59页
   ·实验材料第43-46页
     ·实验细胞第43页
     ·实验动物第43页
     ·主要实验仪器设备第43-44页
     ·实验试剂第44-46页
   ·常用溶液配制第46-48页
   ·实验方法第48-58页
     ·肝癌干细胞分选前流式细胞仪检测第48页
     ·肝癌干细胞分选第48页
     ·肝癌干细胞悬浮球培养第48-49页
     ·肝癌干细胞普通培养第49页
     ·平板克隆形成实验第49-50页
     ·总 RNA 的提取及 RT-PCR第50页
     ·RNA 纯度及浓度检测第50-51页
     ·RT-PCR第51-52页
     ·WESTERN BLOT第52-54页
     ·肝癌组织 HE 染色第54-55页
     ·免疫组化检测 CD133 和 CD24 的表达第55-56页
     ·细胞周期检测第56页
     ·MTT 法检测分选细胞增殖能力第56-57页
     ·凋亡检测第57页
     ·肝癌动物模型的建立第57-58页
   ·统计学分析第58-59页
第4章 实验结果第59-73页
   ·流失细胞仪检测肝癌细胞系中肿瘤干细胞标志物的表达第59-61页
   ·肿瘤干细胞标志 CD133 和 CD24 在分选细胞中的表达第61-63页
   ·CD133~+CD24~+肝癌细胞具有更强的成球能力第63-65页
   ·CD133~+CD24~+ Huh-7 细胞具有更强的克隆形成能力第65-66页
   ·细胞周期的检测第66-68页
   ·CD133~+CD24~+ Huh-7 肝癌细胞更耐药第68-69页
   ·CD133~+CD24~+ Huh-7 肝癌细胞在裸鼠体内的致瘤性第69-71页
   ·肿瘤组织中 CD133 和 CD24 的表达情况第71-73页
第5章 讨论第73-81页
   ·分选方法的选择第73-74页
   ·细胞表面分子标记的选择第74-76页
   ·CD133 和 CD24 基因及蛋白差异性的表达第76页
   ·肿瘤干细胞的特征第76-77页
   ·CD133~+CD24~+ Huh-7 细胞具有更强的成球能力和克隆形成能力第77-78页
   ·细胞周期的检测第78页
   ·CD133~+CD24~+ Huh-7 肝癌干细胞的耐药性第78-79页
   ·CD133~+CD24~+ Huh-7 肝癌干细胞在裸鼠体内具有高致瘤性第79-80页
   ·肿瘤组织中 CD133 和 CD24 的表达第80-81页
第6章 结论及展望第81-83页
参考文献第83-97页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第97-99页
致谢第99页

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