| 縮写词 | 第1-10页 |
| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-24页 |
| 1 中国水仙现状 | 第13页 |
| 2 中国水仙遗传转化体系研究进展 | 第13-19页 |
| ·根癌农杆菌介导的单子叶植物遗传转化研究进展 | 第13-15页 |
| ·水仙离体再生体系研究进展 | 第15-18页 |
| ·营养器官离体培养与植株再生 | 第15-17页 |
| ·生殖器官离体培养与植株再生 | 第17-18页 |
| ·体细胞胚胎发生与植株再生 | 第18页 |
| ·中国水仙遗传转化研究进展 | 第18-19页 |
| 3 花卉花色基因工程研究进展 | 第19-21页 |
| ·花卉花色基因工程研究进展 | 第19-20页 |
| ·水仙花色基因工程研究进展 | 第20页 |
| ·LCYE基因研究进展 | 第20-21页 |
| 4 RNAi技术研究进展 | 第21-22页 |
| 5 本研究科学依据及意义 | 第22-24页 |
| 第二章 中国水仙遗传转化体系的优化 | 第24-39页 |
| 1 试验材料及仪器 | 第24-25页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·根癌农杆菌和质粒 | 第24-25页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第25页 |
| ·培养基和培养条件 | 第25页 |
| 2 试验方法 | 第25-31页 |
| ·重组质粒pC1301-LCYB转化根癌农杆菌 | 第25-28页 |
| ·含pC1301-LCYB质粒的大肠杆菌活化培养及质粒提取 | 第25-26页 |
| ·根癌农杆菌EHA105的活化及感受态细胞的制备 | 第26页 |
| ·重组质粒pC1301-LCYB转化根癌农杆菌 | 第26-27页 |
| ·pC1301-LCYB质粒转化根癌农杆菌后的鉴定 | 第27-28页 |
| ·根癌农杆菌介导的LCYB基因转化中国水仙 | 第28-31页 |
| ·中国水仙花葶的获取、消毒及接种 | 第28页 |
| ·外植体的转化 | 第28页 |
| ·中国水仙遗传转化体系的优化 | 第28-29页 |
| ·抗性植株的培养 | 第29页 |
| ·抗性植株炼苗驯化培养和移栽 | 第29-30页 |
| ·抗性植株的定量PCR检测及差异显著性分析 | 第30-31页 |
| ·水仙花葶遗传转化过程中的数据统计方法 | 第31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-36页 |
| ·转化的农杆菌菌株鉴定结果 | 第31-32页 |
| ·中国水仙遗传转化体系的优化 | 第32-34页 |
| ·预培养时间对转化的影响 | 第32-33页 |
| ·共培养基中不同激素组合对转化的影响 | 第33页 |
| ·不同筛选方式对转化的影响 | 第33-34页 |
| ·抗性植株的实时荧光定量PCR检测及差异显著性分析 | 第34-35页 |
| ·RNA提取结果 | 第34页 |
| ·转基因植株实时荧光定量PCR检测及差异显著性分析结果 | 第34-35页 |
| ·抗性植株的培养和移栽 | 第35-36页 |
| 4 讨论 | 第36-39页 |
| ·预培养在农杆菌介导的水仙花葶转化中的作用 | 第36-37页 |
| ·共培养基成分在农杆菌介导的水仙花葶转化中的作用 | 第37-38页 |
| ·延迟培养在农杆菌介导的水仙花葶转化中的作用 | 第38-39页 |
| 第三章 LYCE RNAi及反义BCH双价植物表达载体的构建 | 第39-54页 |
| 1 试验材料 | 第39页 |
| ·植物材料 | 第39页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第39页 |
| ·培养基 | 第39页 |
| 2 试验方法 | 第39-48页 |
| ·总RNA的提取及cDNA合成 | 第42页 |
| ·正义及反义LCYE片段的PCR扩增 | 第42页 |
| ·目的载体转化大肠杆菌及测序 | 第42页 |
| ·LCYE RNAi与反义BCH双价植物表达载体的构建 | 第42-48页 |
| ·pCKB-antiBCH-LCYE RNAi双价植物表达载体的构建策略 | 第42-47页 |
| ·pKAN-LCYERNAi中间表达载体的构建 | 第47页 |
| ·pKB-LCYE RNAi中间表达载体的构建 | 第47页 |
| ·pCKB-antiBCH-LCYE RNAi双价植物表达载体的构建 | 第47-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-52页 |
| ·LCYE正义及反义片段的PCR扩增结果 | 第48页 |
| ·pKAN-LCYE RNAi载体的构建结果 | 第48-50页 |
| ·pKB-LCYE RNAi中间载体的构建结果 | 第50-51页 |
| ·pCKB-antiBCH-LCYE RNAi双价植物表达载体的构建结果 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 第四章 LYCE RNAi及反义BCH双价植物表达载体转化中国水仙 | 第54-63页 |
| 1 试验材料 | 第54-55页 |
| ·植物材料 | 第54页 |
| ·根癌农杆菌和质粒 | 第54页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第54-55页 |
| ·培养基和培养条件 | 第55页 |
| 2 试验方法 | 第55-57页 |
| ·表达载体pCKB-antiBCH-LCYE RNAi转化根癌农杆菌 | 第55页 |
| ·含pCKB-antiBCH-LCYE RNAi质粒的大肠杆菌菌液培养及质粒提取 | 第55页 |
| ·根癌农杆菌EHA105的培养 | 第55页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞制备与转化 | 第55页 |
| ·pCKB-antiBCH -LCYE RNAi质粒导入EHA105的鉴定 | 第55页 |
| ·根癌农杆菌介导的pCKB-antiBCH -LCYE RNAi质粒转化中国水仙 | 第55-57页 |
| ·中国水仙花葶消毒与接种 | 第55页 |
| ·外植体的转化 | 第55-56页 |
| ·抗性植株的培养 | 第56页 |
| ·抗性植株炼苗和移栽 | 第56页 |
| ·抗性植株的定量PCR检测及差异显著性分析 | 第56-57页 |
| ·转化过程中的数据统计方法 | 第57页 |
| 结果与分析 | 第57-61页 |
| ·转化的农杆菌菌株鉴定结果 | 第57-58页 |
| ·农杆菌介导的pCKB-antiBCH -LCYE RNAi质粒转化中国水仙 | 第58-59页 |
| ·抗性植株的实时荧光定量PCR检测及差异显著性分析 | 第59-61页 |
| ·抗性植株RNA提取结果 | 第59页 |
| ·抗性植株的实时荧光定量PCR检测及差异显著性分析结果 | 第59-61页 |
| 4 讨论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 附录：图版和图版说明 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
