| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一篇 文献综述 | 第11-35页 |
| 第一章 马动脉炎病毒研究进展 | 第11-35页 |
| 1 概述 | 第11-12页 |
| 2 病原 | 第12-17页 |
| ·马动脉炎病毒的基因组结构 | 第12-13页 |
| ·马动脉炎病毒非结构蛋白的结构和功能 | 第13-15页 |
| ·EAV结构蛋白的结构和功能 | 第15-17页 |
| 3 诊断 | 第17-24页 |
| ·病毒分离 | 第17-18页 |
| ·从精液中分离病毒试验 | 第18-20页 |
| ·核酸检测 | 第20-21页 |
| ·病理组织学检查 | 第21页 |
| ·清学试验 | 第21-24页 |
| 4 防控 | 第24-26页 |
| 参考文献 | 第26-35页 |
| 第二篇 研究内容 | 第35-71页 |
| 第二章 马动脉炎病毒N蛋白的原核表达和纯化 | 第35-45页 |
| 摘要 | 第35页 |
| Abstract | 第35-36页 |
| 1 材料与方法 | 第36-38页 |
| ·病毒和血清 | 第36页 |
| ·质粒和菌种 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·EAVN基因引物设计、合成及总RNA的提取 | 第36-37页 |
| ·N蛋白的RT-PCR扩增 | 第37页 |
| ·EAVN基因原核表达载体的构建 | 第37页 |
| ·融合蛋白的诱导表达及活性检测 | 第37-38页 |
| ·融合蛋白的镍柱纯化 | 第38页 |
| 2 结果 | 第38-42页 |
| ·PCR扩增 | 第38-39页 |
| ·原核表达载体的构建及鉴定 | 第39页 |
| ·EAV N基因的序列测定与分析 | 第39-40页 |
| ·EAV N蛋白在大肠杆菌中的诱导表达 | 第40-42页 |
| ·融合N蛋白的纯化及活性检测 | 第42页 |
| 3 讨论 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-45页 |
| 第三章 马动脉炎病毒间接ELISA检测方法的建立及应用 | 第45-59页 |
| 摘要 | 第45页 |
| Abstract | 第45-46页 |
| 1 材料和试剂 | 第46页 |
| ·试剂 | 第46页 |
| ·仪器 | 第46页 |
| 2 方法 | 第46-50页 |
| ·间接ELISA方法的建立 | 第46-48页 |
| ·特异性实验 | 第48页 |
| ·敏感性试验 | 第48页 |
| ·间接ELISA方法的重复性试验 | 第48-49页 |
| ·临床样品检测 | 第49页 |
| ·病毒中和试验操作步骤 | 第49-50页 |
| 3 结果 | 第50-57页 |
| ·包被条件的确立 | 第50页 |
| ·抗原包被量的选择与血清稀释度的确立 | 第50-51页 |
| ·封闭条件的确立 | 第51页 |
| ·酶标二抗稀释度的确立 | 第51-52页 |
| ·底物作用时间的确立 | 第52页 |
| ·终止液浓度的确立 | 第52-53页 |
| ·各步反应时间的确立 | 第53页 |
| ·临界值的确定 | 第53-54页 |
| ·间接ELISA方法的确立 | 第54页 |
| ·特异性实验结果 | 第54-55页 |
| ·敏感性试验 | 第55页 |
| ·间接ELISA方法的重复性试验 | 第55-56页 |
| ·临床应用 | 第56-57页 |
| 4 讨论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-59页 |
| 第四章 马动脉炎病毒RT-LAMP检测方法的建立 | 第59-71页 |
| 摘要 | 第59页 |
| Abstract | 第59-60页 |
| 1 材料与方法 | 第60-62页 |
| ·病毒和质粒 | 第60页 |
| ·主要试剂 | 第60页 |
| ·引物设计 | 第60-61页 |
| ·病毒RNA的提取和cDNA合成 | 第61页 |
| ·LAMP方法的优化以及建立 | 第61页 |
| ·LAMP的特异性检测 | 第61页 |
| ·LAMP方法的灵敏性 | 第61-62页 |
| 2 结果 | 第62-66页 |
| ·LAMP方法优化结果 | 第62-63页 |
| ·RT-LAMP方法的特异性 | 第63-64页 |
| ·RT-LAMP方法的敏感性 | 第64-65页 |
| ·临床应用情况 | 第65-66页 |
| 3 讨论 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-71页 |
| 全文总结 | 第71-73页 |
| 成果转化及发表论文情况 | 第73-75页 |
| 附件2 | 第75-83页 |
| 附件3 | 第83-87页 |
| 附件4 | 第87-93页 |
| 附件5 | 第93-101页 |
| 致谢 | 第101页 |