摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
目录 | 第6-9页 |
縮略词 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-28页 |
·植物对干旱胁迫的感知及响应 | 第10-13页 |
·干旱胁迫对植物的影响 | 第10-11页 |
·植物对干旱胁迫的响应 | 第11-13页 |
·干旱胁迫下植物的信号转导途径 | 第13-20页 |
·植物对干旱胁迫的感知 | 第13-14页 |
·干旱胁迫信号的转导 | 第14-20页 |
·钙离子在干旱胁迫信号中的作用 | 第15页 |
·蛋白激酶信号途径 | 第15-16页 |
·其它信号途径 | 第16-17页 |
·植物激素参与干旱胁迫信号转导 | 第17-18页 |
·干旱胁迫下基因的转录调控 | 第18-19页 |
·干旱胁迫信号转导中的转录后调节 | 第19-20页 |
·干旱胁迫信号转导中的翻译后调节 | 第20页 |
·植物中与干旱胁迫相关的转录因子 | 第20-24页 |
·植物中与逆境胁迫相关的DREB类转录因子的研究 | 第21-24页 |
·植物中与逆境胁迫相关的AREB类转录因子的研究 | 第24页 |
·谷子的研究进展 | 第24-26页 |
·谷子的重要地位和特色 | 第24-25页 |
·谷子的研究进展 | 第25-26页 |
·本论文研究的目的和意义 | 第26-28页 |
第二章 材料与方法 | 第28-52页 |
·实验材料 | 第28-32页 |
·宿主菌 | 第28页 |
·主要载体 | 第28页 |
·植物材料 | 第28页 |
·各种酶及试剂 | 第28-29页 |
·主要仪器设备 | 第29页 |
·实验所用引物 | 第29-30页 |
·常用培养基配制 | 第30-31页 |
·常用溶液的配制 | 第31-32页 |
·实验所需溶液配制 | 第32-36页 |
·质粒DNA的提取 | 第32页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第32页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第32页 |
·农杆菌介导的遗传转化 | 第32页 |
·植物基因组DNA提取缓冲液 | 第32-33页 |
·Northern杂交 | 第33页 |
·Western杂交 | 第33页 |
·His融合蛋白表达纯化 | 第33页 |
·GST融合蛋白表达纯化 | 第33-34页 |
·SDS-PAGE | 第34页 |
·凝胶阻滞 | 第34-35页 |
·植物蛋白提取 | 第35页 |
·体外磷酸化 | 第35页 |
·谷子原生质体转化 | 第35页 |
·酵母单杂 | 第35-36页 |
·实验方法 | 第36-52页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第36页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第36页 |
·质粒或连接产物对大肠杆菌及农杆菌的转化 | 第36页 |
·质粒DNA的提取 | 第36-37页 |
·小量提取植物基因组DNA | 第37页 |
·植物基因组DNA的PCR扩增 | 第37-38页 |
·植物组织总RNA的提取 | 第38页 |
·RNA反转录、RT-PCR及Real-time PCR体系 | 第38-39页 |
·Northern杂交 | 第39-40页 |
·点突变实验 | 第40-41页 |
·融合蛋白的原核诱导表达及纯化 | 第41-42页 |
·融合蛋白诱导表达 | 第41页 |
·His-tag融合蛋白的纯化 | 第41页 |
·GST融合蛋白的纯化 | 第41-42页 |
·Western blot检测 | 第42页 |
·凝胶阻滞实验 | 第42-44页 |
·植物组织蛋白提取 | 第44页 |
·体外磷酸化实验 | 第44页 |
·植物培养 | 第44页 |
·农杆菌转化拟南芥 | 第44页 |
·拟南芥阳性植株筛选 | 第44-45页 |
·拟南芥及谷子的抗旱抗盐检测 | 第45页 |
·电导率测定 | 第45页 |
·植物体内游离脯氨酸测定 | 第45-46页 |
·农杆菌转化谷子愈伤组织 | 第46-47页 |
·谷子原生质体的分离和转化 | 第47页 |
·染色质免疫共沉淀(Chromatin immunoprecipitation assay,ChIP) | 第47-48页 |
·酵母转录激活实验 | 第48-49页 |
·酵母单杂交实验 | 第49-52页 |
·诱饵酵母转化及抗生素浓度检测 | 第49页 |
·酵母单杂实验谷子cDNA文库构建及转化 | 第49-52页 |
第三章 结果与分析 | 第52-89页 |
·谷子SiARDP的克隆 | 第52-56页 |
·构建诱饵质粒和酵母诱饵菌株 | 第52-53页 |
·酵母单杂筛选谷子cDNA文库 | 第53-54页 |
·酵母单杂验证Si138结合DRE元件 | 第54页 |
·凝胶阻滞实验验证Si138结合DRE元件 | 第54-56页 |
·Si138的生物信息学分析 | 第56-59页 |
·谷子Si138逆境胁迫下表达模式及表达部位分析 | 第59-60页 |
·SiARDP转录因子性质分析 | 第60-61页 |
·SiARDP的亚细胞定位 | 第60-61页 |
·SiARDP的转录活性分析 | 第61页 |
·SiARDP增强转基因拟南芥对干旱和盐胁迫的耐受力 | 第61-67页 |
·SiARDP异源表达拟南芥植株的获得 | 第61-62页 |
·SiARDP异源表达拟南芥植株的抗旱及抗盐性分析 | 第62-67页 |
·SiARDP增强超表达谷子对干旱胁迫的耐受力 | 第67-72页 |
·SiARDP超表达谷子的获得 | 第67-68页 |
·SiARDP超表达谷子的检测 | 第68-69页 |
·SiARDP超表达谷子的抗旱性分析 | 第69-70页 |
·SiARDP下游靶基因分析 | 第70-72页 |
·谷子AREB类转录因子结合SiARDP启动子区 | 第72-79页 |
·SiARDP启动子区分析 | 第72-73页 |
·谷子SiAREB1和SiAREB2的克隆和非生物胁迫下表达模式分析 | 第73-74页 |
·谷子SiAREB1和SiAREB2体外结合SiARDP启动子区 | 第74-77页 |
·谷子SiAREB1和SiAREB2体内结合SiARDP启动子 | 第77-79页 |
·SiAREB1和SiAREB2转录因子性质分析 | 第79-80页 |
·SiAREB1和SiAREB2的亚细胞定位 | 第79-80页 |
·SiAREB1和SiAREB2的转录活性分析 | 第80页 |
·SiAREB1和SiAREB2参与植物对干旱和盐胁迫的响应 | 第80-89页 |
·SiAREB1和SiAREB2转基因拟南芥植株的获得 | 第81-82页 |
·SiAREB1和SiAREB2异源表达植株抗旱性和抗盐性分析 | 第82-86页 |
·SiAREB1和SiAREB2点突变和体外磷酸化分析 | 第86-89页 |
第四章 讨论 | 第89-94页 |
·SiARDP超表达增强转基因植株抵抗干旱胁迫和盐胁迫的能力 | 第89-90页 |
·SiAREB1和SiAREB2调控SiARDP并且参与植物逆境胁迫 | 第90-91页 |
·SiARDP参与到依赖ABA的逆境信号转导途径 | 第91-92页 |
·SiAREB2对SiARDP的调控可能受磷酸化修饰调节 | 第92-93页 |
·进一步研究设想 | 第93-94页 |
第五章 结论 | 第94-96页 |
第六章 参考文献 | 第96-112页 |
致谢 | 第112-114页 |
个人简历 | 第114页 |