| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略语表（Abbreviations) | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-27页 |
| ·淀粉酶概述 | 第12-13页 |
| ·淀粉 | 第12页 |
| ·淀粉酶 | 第12页 |
| ·淀粉酶的分类 | 第12-13页 |
| ·α -淀粉酶概述 | 第13-20页 |
| ·α-淀粉酶 | 第13-14页 |
| ·α-淀粉酶家族 | 第14页 |
| ·α-淀粉酶的结构特征 | 第14-17页 |
| ·α -淀粉酶的一级结构 | 第14-15页 |
| ·α-淀粉酶的高级结构 | 第15-17页 |
| ·α -淀粉酶的催化机理 | 第17-18页 |
| ·α -淀粉酶的工业应用 | 第18-20页 |
| ·淀粉加工 | 第18页 |
| ·食品工业 | 第18-19页 |
| ·造纸工业 | 第19页 |
| ·纺织工业 | 第19页 |
| ·洗涤工业 | 第19页 |
| ·医药工业 | 第19-20页 |
| ·极端α-淀粉酶概述 | 第20-23页 |
| ·低温α-淀粉酶 | 第20-22页 |
| ·低温淀粉酶概述 | 第20页 |
| ·低温酶的冷适应机制 | 第20-21页 |
| ·低温α-淀粉酶的应用 | 第21-22页 |
| ·耐盐α-淀粉酶 | 第22-23页 |
| ·耐盐淀粉酶概述 | 第22页 |
| ·耐盐酶的结构特征 | 第22-23页 |
| ·α-淀粉酶的研究进展 | 第23-25页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第25-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-38页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·菌株与质粒 | 第27页 |
| ·试剂 | 第27页 |
| ·培养基 | 第27-28页 |
| ·仪器设备 | 第28页 |
| ·α -淀粉酶基因的克隆 | 第28-32页 |
| ·扩增α-淀粉酶基因 | 第28-29页 |
| ·扩增不含信号肽的α-淀粉酶基因 | 第29-30页 |
| ·PCR产物纯化、回收与酶切 | 第30-31页 |
| ·酶连与转化 | 第31-32页 |
| ·检测阳性克隆子 | 第32页 |
| ·α-淀粉酶AmyZ的表达与纯化 | 第32-34页 |
| ·α -淀粉酶AmyZ的诱导表达 | 第32-33页 |
| ·α-淀粉酶AmyZ的纯化 | 第33页 |
| ·凝胶电泳和蛋白浓度测定 | 第33-34页 |
| ·α-淀粉酶AmyZ的酶学性质研究 | 第34-38页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第34页 |
| ·α-淀粉酶活性的测定方法 | 第34-35页 |
| ·α-淀粉酶的最适pH和pH稳定性 | 第35页 |
| ·α -淀粉酶的最适温度和热稳定性 | 第35-36页 |
| ·NaCl对酶活性、酶稳定性和热稳定的影响 | 第36页 |
| ·CaCl_2对酶活性和热稳定性的影响 | 第36-37页 |
| ·金属离子和化学试剂对α-淀粉酶活性的影响 | 第37页 |
| ·α -淀粉酶的底物特异性 | 第37页 |
| ·α-淀粉酶动力学参数测定 | 第37页 |
| ·α-淀粉酶三维结构模拟 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-59页 |
| ·Zunongwangia sp.(MCCC 1A01486)总DNA的提取 | 第38页 |
| ·α-淀粉酶AmyZ1的研究 | 第38-49页 |
| ·α-淀粉酶基因amyZ1的克隆 | 第38-41页 |
| ·α-淀粉酶AmyZ1的表达与纯化 | 第41-42页 |
| ·α-淀粉酶AmyZ1酶学性质分析 | 第42-49页 |
| ·麦芽糖标准曲线 | 第42-43页 |
| ·最适反应pH和pH稳定性 | 第43页 |
| ·最适反应温度和热稳定性 | 第43-45页 |
| ·NaCl对酶活和酶热稳定性的影响 | 第45页 |
| ·CaCl_2对酶活和酶热稳定性的影响 | 第45页 |
| ·金属离子和化学试剂对酶活的影响 | 第45-47页 |
| ·底物特异性 | 第47页 |
| ·动力学参数 | 第47-48页 |
| ·结构模拟 | 第48-49页 |
| ·α -淀粉酶AmyZ2的研究 | 第49-59页 |
| ·α-淀粉酶基因amyZ2的克隆 | 第49-52页 |
| ·α -淀粉酶AmyZ2的表达与纯化 | 第52-53页 |
| ·α-淀粉酶AmyZ2酶学性质分析 | 第53-59页 |
| ·葡萄糖标准曲线 | 第53页 |
| ·最适反应pH和pH稳定性 | 第53-54页 |
| ·最适反应温度和热稳定性 | 第54-55页 |
| ·NaCl对酶活和酶热稳定性的影响 | 第55-56页 |
| ·金属离子和化学试剂对酶活的影响 | 第56-57页 |
| ·底物特异性 | 第57页 |
| ·动力学参数 | 第57页 |
| ·结构模拟 | 第57-59页 |
| 4 讨论 | 第59-72页 |
| ·底物特异性差异分析 | 第59-62页 |
| ·AmyZ1的冷活性 | 第62-64页 |
| ·酶的耐盐性 | 第64-67页 |
| ·AmyZ2的碱稳定性 | 第67-70页 |
| ·金属离子的影响 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-80页 |
| 附录 | 第80-89页 |
| 1. 溶液 | 第80-82页 |
| 2. 细菌基因组DNA抽提 | 第82-83页 |
| 3. 抽提细菌的质粒DNA | 第83页 |
| 4. 大肠杆菌感受态细胞制备 | 第83-84页 |
| 5. 凝胶电泳分离蛋白 | 第84-85页 |
| 6. α-淀粉酶AmyZ1核苷酸及氨基酸序列 | 第85-88页 |
| 7. 研究成果 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89页 |