| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-15页 |
| 第1章 前言 | 第15-18页 |
| 第2章 体外研究 | 第18-48页 |
| ·实验材料 | 第18-20页 |
| ·细胞 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18-20页 |
| ·主要仪器与设备 | 第20页 |
| ·器材准备及试剂配制 | 第20-23页 |
| ·细胞培养用品的处理 | 第20-21页 |
| ·去RNA酶处理 | 第21页 |
| ·Ham’s F-12K培养基的配制 | 第21页 |
| ·LPS溶液的配制 | 第21页 |
| ·miR-146a mimics相关试剂的配置 | 第21-22页 |
| ·免疫荧光法相关试剂配置 | 第22页 |
| ·Western Blot相关试剂配置 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-37页 |
| ·NR8383细胞的培养、传代、冻存和复苏 | 第23-24页 |
| ·细胞总RNA抽提、定量和质量检测 | 第24-25页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第25-30页 |
| ·ELISA检测上清中TNF-α蛋白的表达 | 第30-31页 |
| ·Western blot检测NF-κB p65、IRAK-1、TRAF-6蛋白的表达变化 | 第31-33页 |
| ·LPS诱导NR8383细胞TNF-α和miR-146a的表达变化 | 第33-34页 |
| ·转染miR-146a Precursors入NR8383细胞 | 第34-35页 |
| ·上调miRNA-146a对LPS诱导TNF-α表达和NF-κB p65核移位的影响 | 第35-36页 |
| ·统计学处理 | 第36-37页 |
| ·结果 | 第37-48页 |
| ·实时荧光定量PCR反应条件的优化 | 第37-40页 |
| ·脂多糖(LPS)诱导NR8383细胞炎症反应 | 第40-42页 |
| ·miR-146a在NR8383细胞炎症反应中的功能研究 | 第42-48页 |
| 第3章 体内研究 | 第48-66页 |
| ·实验材料 | 第48-51页 |
| ·大鼠 | 第48页 |
| ·主要试剂 | 第48-50页 |
| ·主要仪器 | 第50-51页 |
| ·器材准备及试剂配制 | 第51-53页 |
| ·去RNA酶处理 | 第51页 |
| ·LPS溶液配制 | 第51页 |
| ·4%多聚甲醛 | 第51页 |
| ·Western Blot相关试剂配制 | 第51-52页 |
| ·电镜所需主要试剂配制 | 第52-53页 |
| ·实验方法 | 第53-61页 |
| ·SD大鼠ALI模型建立及实验分组 | 第53-54页 |
| ·肺组织湿干重比测定 | 第54页 |
| ·肺组织常规HE染色病理检查 | 第54页 |
| ·透射电镜检测肺病理改变 | 第54-55页 |
| ·肺泡灌洗液中TNF-α检测 | 第55-56页 |
| ·Western blot检测NF-κB p65蛋白含量变化 | 第56-57页 |
| ·RT-qPCR检查肺组织中miR-146a、TNF-α mRNA表达变化 | 第57-58页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第58-61页 |
| ·统计学分析 | 第61页 |
| ·结果 | 第61-66页 |
| ·血气分析 | 第61-62页 |
| ·肺损伤模型大体标本及W/D比值 | 第62页 |
| ·肺组织HE染色 | 第62-63页 |
| ·透射电镜下观察肺组织损伤 | 第63页 |
| ·肺泡灌洗液中TNF-α蛋白浓度的变化 | 第63-64页 |
| ·肺组织中NF-κB p65蛋白含量的变化 | 第64页 |
| ·肺组织中TNF-α mRNA和miR-146a的表达变化 | 第64-66页 |
| 第4章 讨论 | 第66-73页 |
| ·体内外炎症反应模型的建立 | 第66-68页 |
| ·miR-146a在固有免疫反应中的调控作用 | 第68-71页 |
| ·miR-146a在ALI/ARDS中的表达变化 | 第71-73页 |
| 第5章 结论与展望 | 第73-74页 |
| ·结论 | 第73页 |
| ·进一步工作的方向 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-80页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第80-81页 |
| 综述 | 第81-87页 |
| 参考文献 | 第84-87页 |
